| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-22页 |
| 第一章 CD163 分子及其在PRRSV 感染过程中的作用研究进展 | 第12-22页 |
| ·CD163 分子结构、功能及表达 | 第12-13页 |
| ·CD163 作为PRRSV 受体的研究 | 第13-18页 |
| ·硫酸乙酰肝素 | 第15页 |
| ·唾液酸粘附素 | 第15-17页 |
| ·CD163 分子 | 第17-18页 |
| ·细胞蛋白酶和其它相关因子 | 第18页 |
| ·CD163 与PRRSV 相互作用研究 | 第18-20页 |
| ·PRRSV 感染过程中CD163 与IL-10 的关系 | 第20-22页 |
| 试验研究 | 第22-55页 |
| 第二章 猪CD163 基因的克隆表达 | 第22-37页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·实验载体和菌株 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-32页 |
| ·表达猪CD163 基因外膜区的原核表达质粒构建 | 第23-27页 |
| ·重组质粒的诱导表达及鉴定 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白切胶纯化 | 第29页 |
| ·真核表达载体构建 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的大量提取 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-35页 |
| ·猪CD163 基因胞质外区部分基因CD163 的PCR 扩增 | 第32页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组质粒 pGEX-6P-CD163 原核表达产物的 SDS-PAGE 检测结果 | 第33页 |
| ·原核表达产物的Western-blot 分析 | 第33-34页 |
| ·真核表达猪CD163 胞质外区PCR 扩增 | 第34-35页 |
| ·真核表达质粒的双酶切鉴定 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第三章 抗猪CD163 蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第37-45页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37-38页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·动物免疫程序 | 第38页 |
| ·间接ELISA 方法的建立 | 第38-39页 |
| ·Western Blot 检测多抗血清效价 | 第39页 |
| ·流式检测兔多抗血清的特异性 | 第39页 |
| ·抗体阻断实验 | 第39页 |
| ·荧光定量检测 HP-PRRSV N 基因 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-43页 |
| ·间接ELISA 检测多抗血清效价 | 第40-41页 |
| ·Western Blot 检测兔多抗血清效价 | 第41-42页 |
| ·流式检测兔抗猪多克隆抗体的特异性 | 第42页 |
| ·抗体阻断实验的荧光定量PCR 检测PRRSV 复制结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 抗猪CD163 蛋白单克隆抗体的制备 | 第45-55页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45-46页 |
| ·实验动物及细胞 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-51页 |
| ·动物免疫程序 | 第46页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏与培养 | 第46-47页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第47页 |
| ·间接ELISA 方法建立 | 第47-48页 |
| ·免疫脾细胞的制备 | 第48页 |
| ·细胞融合 | 第48-49页 |
| ·间接ELISA 检测阳性克隆 | 第49页 |
| ·间接免疫荧光检测方法的建立 | 第49-50页 |
| ·单克隆细胞株的建立 | 第50页 |
| ·Western Blot 检测单抗特异性 | 第50-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-53页 |
| ·间接ELISA 检测免疫小鼠血清效价 | 第51页 |
| ·融合杂交瘤细胞的形态观察 | 第51-52页 |
| ·细胞株分泌单抗间接ELISA 结果 | 第52页 |
| ·细胞株分泌单抗间接免疫荧光结果 | 第52页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第52-53页 |
| ·细胞株分泌单抗特异性测定 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 缩略词 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 个人简介 | 第66页 |
