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苏丹红Ⅰ酶联免疫分析方法的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-28页
 1 苏丹红的化学结构与理化性质第13-15页
   ·苏丹红的化学结构第13-14页
   ·Sudan I的理化特性第14-15页
 2 Sudan I的代谢和毒性第15-17页
   ·Sudan I的代谢第15-16页
   ·Sudan I的毒理学研究第16-17页
     ·Sudan I诱导细胞微核形成第16页
     ·DNA加合物的形成第16-17页
     ·RNA加合物的形成第17页
     ·促癌活性第17页
     ·致敏性研究第17页
 3 食品中苏丹红的检测方法第17-21页
   ·高效液相色谱法(HPLC)第18页
   ·高效液相色谱/质谱联用法(HPLC/MS)第18-19页
   ·气相色谱/质谱联用法(GC/MS)第19页
   ·毛细管电泳法第19-20页
   ·分光光度法第20页
   ·薄层色谱法(TLC)第20-21页
   ·极谱法第21页
 4 免疫测定法第21-27页
   ·人工抗原的制备第22-23页
   ·抗体的制备第23-24页
   ·ELISA在食品安全检测中的应用第24-27页
     ·食品中农药小分子残留的测定第24-25页
     ·动物性食品中兽药和违禁药物等小分子残留的测定第25-26页
     ·食品中生物毒素的检测第26-27页
 5 研究目的和意义第27-28页
第二章 Sudan I人工抗原的合成第28-37页
 1 材料与方法第28-31页
   ·材料第28-29页
     ·主要试剂第28-29页
     ·主要仪器第29页
   ·方法第29-31页
     ·试剂和材料的预处理第29-30页
     ·Sudan I-HS的制备第30页
     ·Sudan I-HS的红外光谱分析第30页
     ·Sudan I-HS的液质联用分析第30-31页
     ·人工抗原Sudan I-HS-BSA(OVA)的合成第31页
     ·Sudan I-HS-BSA(OVA)结合比的测定第31页
 2 结果与分析第31-36页
   ·Sudan I-HS的鉴定第31-34页
     ·Sudan I-HS的红外光谱分析第31-33页
     ·Sudan I-HS的液质联用鉴定第33-34页
   ·人工抗原的紫外扫描和摩尔比分析第34-36页
 3 讨论第36-37页
第三章 Sudan I抗血清制备及ELISA的建立第37-54页
 1 材料与方法第37-41页
   ·材料第37-38页
     ·主要试剂第37页
     ·主要仪器第37页
     ·实验动物第37-38页
   ·方法第38-41页
     ·几种主要溶液的配制第38页
     ·动物饲养与处理第38页
     ·免疫方法第38-39页
     ·抗体的产生进程第39页
     ·抗Sudan I抗体的制备第39页
     ·间接非竞争酶联免疫吸附法测定抗体的效价第39-40页
     ·间接竞争ELISA条件的优化第40-41页
     ·间接竞争ELISA测定抗体的灵敏度第41页
     ·间接竞争ELISA测定抗体的特异性第41页
 2 结果与分析第41-51页
   ·抗体的产生进程第41-42页
   ·抗体的ELISA效价第42-43页
   ·抗原抗体反应影响因素的分析第43-49页
     ·包被缓冲液pH值和离子强度的选择第43-44页
     ·包被温度和时间的选择第44页
     ·包被抗原与抗血清最佳工作浓度的选择第44-45页
     ·pH值对抗原-抗体反应的影响第45-46页
     ·反应时间对抗原-抗体反应的影响第46-47页
     ·加样方式对间接竞争ELISA反应的影响第47-48页
     ·有机溶剂对间接竞争ELISA分析的影响第48-49页
   ·灵敏度和特异性研究第49-51页
 3 讨论第51-54页
   ·间接竞争ELISA工作条件的选择第51-52页
   ·有机溶剂对ELISA检测的影响第52页
   ·灵敏度第52-53页
   ·交叉反应率第53-54页
第四章 辣椒粉中Sudan I残留的ELISA第54-60页
 1 材料与方法第54-56页
   ·材料第54页
     ·主要试剂第54页
     ·主要仪器第54页
   ·方法第54-56页
     ·样品的前处理第54-55页
     ·工作条件的选择第55页
     ·建立标准曲线方法第55页
     ·辣椒粉样品中Sudan I的间接竞争ELISA和HPLC分析方法第55-56页
     ·添加回收率的测定第56页
 2 结果与分析第56-59页
   ·标准曲线第56-57页
     ·ELISA分析第56页
     ·HPLC分析第56-57页
   ·辣椒粉样品中Sudan I的检测第57页
   ·加标回收样品中Sudan I的检测第57-59页
 3 讨论第59-60页
第五章 总结与讨论第60-64页
 1 总结第60-61页
   ·Sudan I人工抗原的合成第60页
   ·获得了Sudan I多克隆抗体第60页
   ·建立了优化的间接竞争ELISA第60-61页
   ·建立了Sudan I在辣椒粉上的残留检测方法第61页
   ·本实验为后续研究工作奠定基础第61页
 2 讨论第61-64页
   ·Sudan I-阳离子化蛋白偶联物的一步法构建第61-62页
   ·Sudan I-HS的得率较低第62-63页
   ·灵敏度与特异性第63-64页
参考文献第64-72页
致谢第72-73页
附录第73页

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