| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第一章 引言 | 第7-15页 |
| ·酵母及酿酒酵母简介 | 第7-10页 |
| ·酿酒酵母HOG MAPK 途径及ScRck2 蛋白的作用 | 第10-13页 |
| ·酿酒酵母HOG MAPK 途径 | 第10-11页 |
| ·酿酒酵母Rck2 蛋白功能的研究进展 | 第11-13页 |
| ·本论文的研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 实验材料 | 第15-23页 |
| ·菌株 | 第15-16页 |
| ·质粒 | 第16-17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·试剂 | 第18-20页 |
| ·常用溶液与缓冲液 | 第20-23页 |
| 第三章 表达载体的构建 | 第23-44页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·大肠感觉和酵母菌的培养与菌株保存 | 第23页 |
| ·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第23-24页 |
| ·质粒转化E.coli 感受态细胞 | 第24页 |
| ·SDS 碱裂解法小量制备质粒 | 第24-25页 |
| ·SDS 碱裂解法大量制备质粒 | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增DAN 片段 | 第26页 |
| ·乙醇沉淀法纯化DNA 片段 | 第26页 |
| ·DNA 片段的柱纯化 | 第26-27页 |
| ·酶切 | 第27-28页 |
| ·连接 | 第28页 |
| ·酿酒酵母RCK2 基因的亚克隆 | 第28-43页 |
| ·酿酒酵母RCK2 基因片段的PCR 扩增 | 第28-31页 |
| ·第一步连接及重组质粒的检测 | 第31-36页 |
| ·第二步连接及重组质粒的检测 | 第36-40页 |
| ·高表达载体的构建 | 第40-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 突变体ScRck2 蛋白的表达与检测 | 第44-48页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞 | 第44页 |
| ·Westernblot | 第44-46页 |
| ·突变体Rck2p 的表达 | 第46-47页 |
| ·突变体Rck2p 的检测 | 第47页 |
| ·本章结论 | 第47-48页 |
| 第五章 突变体ScRck2 蛋白的功能研究 | 第48-55页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·梯度连续稀释实验 | 第48-49页 |
| ·划线实验 | 第49页 |
| ·表型实验 | 第49-54页 |
| ·划线法观察生长情况 | 第50-52页 |
| ·梯度稀释实验 | 第52-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-55页 |
| 第六章 总结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |