| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 插图和附表清单 | 第10-13页 |
| 第一章 序言 | 第13-29页 |
| ·苯醌安莎类抗生素 | 第13-17页 |
| ·研究背景 | 第13页 |
| ·抗肿瘤机制 | 第13-14页 |
| ·生物合成 | 第14-16页 |
| ·调控机制 | 第16页 |
| ·自溶霉素 | 第16-17页 |
| ·LuxR家族调控蛋白 | 第17-27页 |
| ·细菌群体感应 | 第17-19页 |
| ·LuxR在细菌中的分布 | 第19页 |
| ·LuxR家族蛋白结构 | 第19-21页 |
| ·LuxR与AHL的结合 | 第21-22页 |
| ·LuxR家族蛋白的调控机制 | 第22-26页 |
| ·LuxR家族蛋白调控总结 | 第26-27页 |
| ·LuxR家族蛋白的研究展望 | 第27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-53页 |
| ·菌株、载体、培养条件 | 第29-30页 |
| ·引物 | 第30页 |
| ·抗生素、酶、抗体和试剂盒 | 第30-31页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·质粒提取 | 第33-35页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第35页 |
| ·DNA片段与载体连接 | 第35页 |
| ·制备感受态细胞 | 第35-36页 |
| ·转化 | 第36页 |
| ·almRⅠ和almRⅡ基因的表达 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第37页 |
| ·包涵体纯化、变性及复性 | 第37-39页 |
| ·蛋白纯化 | 第39页 |
| ·Bradford法检测蛋白含量 | 第39-40页 |
| ·Western blot | 第40页 |
| ·凝胶阻滞(EMSA) | 第40-44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44-46页 |
| ·试剂和配方 | 第46-53页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第53-74页 |
| ·almRⅠ和almRⅡ基因克隆 | 第53-57页 |
| ·almRⅠ和almRⅡ基因扩增 | 第53-55页 |
| ·克隆载体的制备 | 第55-56页 |
| ·连接与转化 | 第56-57页 |
| ·AlmRⅠ和AlmRⅡ蛋白的表达 | 第57-60页 |
| ·AlmRⅠ蛋白的纯化 | 第60-66页 |
| ·AlmRⅠ包涵体提取和纯化 | 第60-64页 |
| ·AlmRⅠ蛋白的过柱纯化 | 第64-66页 |
| ·AlmRⅡ蛋白的纯化 | 第66-67页 |
| ·LuxR结合域分析 | 第67-68页 |
| ·AlmRⅠ与靶DNA的结合 | 第68-74页 |
| ·靶DNA的PCR扩增 | 第68-69页 |
| ·AlmRⅠ与almK的结合 | 第69-71页 |
| ·AlmRⅠ与almM、almO和almF启动子的结合 | 第71-74页 |
| 第五章 总结与展望 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第85-86页 |
| 附录B 其他需要说明的内容 | 第86页 |