| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-29页 |
| ·突变株固氮酶研究进展 | 第10-21页 |
| ·固氮酶的组成 | 第10-12页 |
| ·固氮菌突变株研究的意义 | 第12-13页 |
| ·利用突变株研究固氮酶的合成过程 | 第12页 |
| ·利用突变株揭示固氮酶的作用机理 | 第12-13页 |
| ·利用突变株探索新型固氮酶 | 第13页 |
| ·突变株的种类 | 第13-14页 |
| ·突变株研究进展 | 第14-21页 |
| ·氨基酸发生改变的突变株 | 第14-15页 |
| ·FeMoco发生改变的突变株 | 第15-18页 |
| ·P-cluster 发生改变的突变株 | 第18-21页 |
| ·新型固氮酶的研究进展 | 第21页 |
| ·血红素利用研究进展 | 第21-27页 |
| ·血红素的合成 | 第21-22页 |
| ·血红素的利用 | 第22-24页 |
| ·血红素蛋白的作用 | 第24页 |
| ·血红素蛋白的理化特性 | 第24-27页 |
| ·立题依据 | 第27-29页 |
| ·△nifE Av1 研究 | 第27-28页 |
| ·HBP59 蛋白研究 | 第28-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-45页 |
| ·棕色固氮菌的培养 | 第29-31页 |
| ·培养基配制 | 第29页 |
| ·母液配制 | 第29页 |
| ·应用液配制 | 第29页 |
| ·菌体培养 | 第29-31页 |
| ·斜面培养 | 第30页 |
| ·摇瓶培养 | 第30页 |
| ·小罐发酵 | 第30页 |
| ·菌体收集 | 第30-31页 |
| ·菌体生长及活性测定 | 第31页 |
| ·菌体浓度检测 | 第31页 |
| ·突变种在限氨培养基中耗氨情况的检测 | 第31页 |
| ·菌体活性检测 | 第31页 |
| ·厌氧技术 | 第31-32页 |
| ·氩气的纯化 | 第31-32页 |
| ·除氧溶液的配制 | 第32页 |
| ·除氧溶液的使用 | 第32页 |
| ·厌氧操作要点 | 第32页 |
| ·△nifE Av1 和HBP59 的分离纯化 | 第32-36页 |
| ·含不同盐浓度的厌氧Tris-HCl缓冲液的配制 | 第32-33页 |
| ·△nifE Av1 的分离纯化 | 第33-34页 |
| ·HBP59 的分离纯化 | 第34-36页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第36-37页 |
| ·浓度测定 | 第36-37页 |
| ·试剂配制 | 第36页 |
| ·标准曲线制作 | 第36页 |
| ·样品蛋白浓度测定 | 第36-37页 |
| ·蛋白质电泳及Western-blotting | 第37-40页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37-38页 |
| ·电泳试剂配制 | 第37-38页 |
| ·不同染色方法试剂配制 | 第38页 |
| ·染色步骤 | 第38页 |
| ·Western-blotting 免疫印渍 | 第38-39页 |
| ·试剂配制 | 第38-39页 |
| ·电印渍步骤 | 第39页 |
| ·检测 | 第39页 |
| ·凝胶成像扫描及干胶制作 | 第39-40页 |
| ·固氮酶活性测定 | 第40-41页 |
| ·Mg-ATP 发生系统的配制 | 第40页 |
| ·FeMoco 的抽提 | 第40页 |
| ·C2H2 还原和放氢活性测定 | 第40-41页 |
| ·蛋白金属含量测定 | 第41页 |
| ·质谱分析 | 第41页 |
| ·吸收光谱和圆二色谱的测定 | 第41-42页 |
| ·电子顺磁共振谱测定 | 第42页 |
| ·蛋白质结晶 | 第42-45页 |
| ·溶液配制 | 第42-43页 |
| ·结晶方法 | 第43页 |
| ·晶体回收鉴定 | 第43-45页 |
| ·离心法回收晶体 | 第43页 |
| ·挑取晶体法回收晶体 | 第43-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-70页 |
| ·△nifE Av1 的纯化特性及晶体生长研究 | 第45-60页 |
| ·△nifE Av1 的分离纯化 | 第45-46页 |
| ·△nifE Av1 的特性 | 第46-53页 |
| ·亚基组成 | 第46-47页 |
| ·FeMoco激活特性 | 第47-48页 |
| ·金属组成特性 | 第48-49页 |
| ·△nifE Av1 的光谱特性 | 第49-51页 |
| ·△nifE Av1 的EPR 特性 | 第51-53页 |
| ·△nifE Av1 和△nifH Av1 结晶研究 | 第53-60页 |
| ·△nifE Av1 和△nifH Av1 晶体生长 | 第53-58页 |
| ·晶体鉴定 | 第58-60页 |
| ·HBP59 蛋白的纯化特性及晶体生长研究 | 第60-70页 |
| ·HBP59 的纯化和鉴定 | 第60-63页 |
| ·HBP59 蛋白的特性 | 第63-68页 |
| ·蛋白的亚基组成和分子量 | 第63-64页 |
| ·金属组成 | 第64-65页 |
| ·吸收光谱特征 | 第65-66页 |
| ·圆二色谱特征 | 第66-67页 |
| ·血红素结合特性 | 第67-68页 |
| ·HBP59 对温度 O_2 和pH 的稳定性 | 第68页 |
| ·HBP59 蛋白结晶 | 第68-70页 |
| 第四章 讨论 | 第70-74页 |
| ·△nifE Av1 的纯化特性及晶体生长研究 | 第70-72页 |
| ·HBP59 的纯化特性及晶体生长研究 | 第72-74页 |
| 第五章 研究进展与展望 | 第74-76页 |
| ·研究进展 | 第74-75页 |
| ·△nifE Av1和△nifH Av1的纯化特性鉴定和结晶 | 第74页 |
| ·蛋白质纯化 | 第74页 |
| ·蛋白质的特性鉴定 | 第74页 |
| ·蛋白质的晶体生长 | 第74页 |
| ·HBP59 的分离纯化特性鉴定和结晶 | 第74-75页 |
| ·纯化 | 第74页 |
| ·鉴定 | 第74页 |
| ·结晶 | 第74-75页 |
| ·研究创新 | 第75页 |
| ·研究展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-87页 |
| 缩略语 | 第87-89页 |
| 论文 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
