| 致谢 | 第1-10页 |
| 图表目录 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-64页 |
| 1 植物基因对基因抗病性信号传导 | 第17-30页 |
| ·植物R基因 | 第17-20页 |
| ·病原物无毒基因(avirulence gene，Avr)产物及其功能 | 第20-24页 |
| ·病原物Avr基因的克隆 | 第20-22页 |
| ·病原物Avr基因的功能 | 第22-24页 |
| ·病原物Avr基因具有毒性和无毒双重功能 | 第22-23页 |
| ·病原物Avr基因具有的生化活性和功能 | 第23-24页 |
| ·植物R基因产物对病原物Avr基因产物的识别 | 第24-27页 |
| ·受体—配体模式 | 第24页 |
| ·“保卫”模式 | 第24-27页 |
| ·植物R基因介导的信号传导 | 第27-30页 |
| ·植物R基因下游早期信号传导基因 | 第27-28页 |
| ·植物R基因介导活化的防卫反应及其信号传导 | 第28-30页 |
| ·HR | 第28页 |
| ·氧化迸发(oxidative burst) | 第28-29页 |
| ·NO的积累 | 第29页 |
| ·水杨酸的积累及其下游防卫信号传导因子的活化 | 第29-30页 |
| ·乙烯和茉莉酸的积累及下游防卫信号传导因子的活化 | 第30页 |
| ·不同防卫反应信号传导途径之间的对话(cross-talk) | 第30页 |
| 2 番茄与叶霉菌互作的分子机理 | 第30-36页 |
| ·C.fulvum Avr基因 | 第31-32页 |
| ·番茄抗叶霉菌基因(Cf) | 第32-33页 |
| ·番茄Cf基因在基因组中的组织及其进化 | 第32页 |
| ·番茄Cf基因产物结构和功能 | 第32-33页 |
| ·番茄Cf蛋白对C.fulvum Avr蛋白的识别 | 第33-34页 |
| ·Cf／Avr互作下游信号传导和防卫反应的激活 | 第34-35页 |
| ·环境条件对Cf介导的HR和抗病性的影响 | 第35-36页 |
| 3 病毒诱导的基因沉默及其在植物基因功能鉴定中的作用 | 第36-47页 |
| ·病毒诱导的基因沉默现象的发现 | 第36-37页 |
| ·VIGS的作用机制 | 第37-38页 |
| ·VIGS病毒载体的开发 | 第38-40页 |
| ·基因沉默的指示基因 | 第40-41页 |
| ·影响VIGS沉默效率的因子 | 第41-43页 |
| ·VIGS载体中插入的目的片段 | 第41-42页 |
| ·植物培育条件 | 第42页 |
| ·寄主生育期 | 第42页 |
| ·VIGS载体病毒的接种方法 | 第42-43页 |
| ·VIGS在功能基因组学研究中的应用 | 第43-46页 |
| ·VIGS作为基因鉴定和功能研究工具的优点 | 第43-44页 |
| ·VIGS的缺点及其避免方法 | 第44-45页 |
| ·VIGS在植物基因功能研究中的应用 | 第45-46页 |
| ·VIGS今后研究方向 | 第46-47页 |
| 4 参考文献 | 第47-64页 |
| 第二章 番茄抗叶霉病基因Cf-4和Cf-9启动子转录调节性的比较分析 | 第64-91页 |
| 1 前言 | 第65-67页 |
| 2 材料与方法 | 第67-70页 |
| ·转化的受体植物 | 第67页 |
| ·菌株与质粒 | 第67页 |
| ·培养基与抗生素 | 第67-68页 |
| ·用于植物转化的双元表达载体的构建 | 第68页 |
| ·烟草叶盘转化与卡那抗性植株的再生 | 第68-69页 |
| ·烟草基因组DNA的提取 | 第69页 |
| ·RT-PCR | 第69页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第69-70页 |
| ·PCR检测 | 第69-70页 |
| ·抗生素抗性检测 | 第70页 |
| ·HR检测 | 第70页 |
| 3 结果 | 第70-74页 |
| ·Cf-4和Cf-9基因开读框上游非编码区3Kb序列的比较 | 第70页 |
| ·Cf-4和Cf-9基因启动子分别与Cf-9和GFP开读框的嵌合表达载体构建 | 第70-71页 |
| ·转基因烟草植株的获取 | 第71-72页 |
| ·Cf-4和Cf-9启动子对Cf-9和GFP基因转录本积累水平的调节活性比较 | 第72页 |
| ·不同启动子驱动的GFP基因转化植株的荧光强度检测 | 第72页 |
| ·pCfg∷Cf-9／Avr9与pCf4∷Cf-9／Avr9烟草产生的HR比较 | 第72-73页 |
| ·pCf9∷Cf-9／Avr9与pCf4∷Cf-9／Avr9烟草小苗生物重量的比较 | 第73页 |
| ·高温条件下，pCf9∷Cf-9／Avr9与pCf4∷Cf-9／Avr9烟草的HR比较 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| ·导致Cf-4启动子与Cf-9启动子转录调控活性及高温敏感性差异的可能原因 | 第74页 |
| ·Cf-4／Avr4和Cf-9／Avr9植株小苗产生不同HR的可能原因 | 第74-75页 |
| ·GFP转基因烟草植株的荧光检测 | 第75-76页 |
| 5 参考文献 | 第76-91页 |
| 第三章 高温高湿协同抑制Cf-4／Avr4和Cf-9／Avr9介导的HR | 第91-113页 |
| 1 前言 | 第92-93页 |
| 2 材料与方法 | 第93-95页 |
| ·植物材料和培育条件 | 第93-94页 |
| ·过敏性细胞死亡的显微检测 | 第94页 |
| ·Northern分析 | 第94页 |
| ·反Northern分析 | 第94-95页 |
| 3 结果与分析 | 第95-97页 |
| ·高湿条件下Cf-4／Avr4和Cf-9／Avr9番茄苗过敏性坏死延迟产生，强度减弱 | 第95页 |
| ·Cf-4／Avr4和Cf-9／Avr9番茄苗子叶HR产生的显微分析 | 第95-96页 |
| ·高温和高湿对Cf-4／Avr4和Cf-9／Avr9番茄苗HR的协同抑制作用 | 第96页 |
| ·高湿抑制Cf／Avr苗中与HR，信号传导和防卫反应相关基因的表达 | 第96-97页 |
| ·高湿改变Cf／Avr苗中与HR，信号传导和防卫相关的60个基因的转录本分布型 | 第97页 |
| 4 讨论 | 第97-99页 |
| ·一个通用的研究环境条件对R／Avr介导的抗病性的影响的HR产生系统 | 第97-98页 |
| ·高湿抑制Cf／Avr介导的HR的机理 | 第98-99页 |
| 5 参考文献 | 第99-113页 |
| 第四章 TRV介导的拟南芥基因沉默操作方法的优化 | 第113-129页 |
| 1 前言 | 第114-115页 |
| 2 材料与方法 | 第115-117页 |
| ·载体构建 | 第115-116页 |
| ·农杆菌接种液的准备 | 第116页 |
| ·农杆菌接种 | 第116页 |
| ·植物培养条件 | 第116-117页 |
| ·统计分析 | 第117页 |
| 3 结果和分析 | 第117-119页 |
| ·农杆菌接种方法对TRV介导的基因沉默效率的影响 | 第117页 |
| ·农杆菌菌液浓度对拟南芥基因沉默效率的影响 | 第117-118页 |
| ·农杆菌菌液恢复培养时间对拟南芥基因沉默效率的影响 | 第118页 |
| ·农杆菌接种后拟南芥培养温度对基因沉默效率的影响 | 第118页 |
| ·接种时拟南芥不同生育期对基因沉默效率的影响 | 第118-119页 |
| ·结论 | 第119页 |
| 4 讨论 | 第119-121页 |
| 5 参考文献 | 第121-129页 |
| 第五章 DNAmβ介导的基因沉默体系可以使番茄成株和花萼基因获得有效沉默 | 第129-137页 |
| 1.前言 | 第130-131页 |
| 2.材料与方法 | 第131页 |
| ·基因沉默载体 | 第131页 |
| ·农杆菌的准备与接种 | 第131页 |
| ·植物培养条件 | 第131页 |
| 3.结果与分析 | 第131-133页 |
| ·接种后培养温度对DNAmβ介导的基因沉默效率的影响 | 第132页 |
| ·不同生育期番茄植株基因沉默效率的比较 | 第132页 |
| ·不同生育期番茄植株基因沉默特性的比较 | 第132-133页 |
| 4.讨论 | 第133-135页 |
| 5 参考文献 | 第135-137页 |
| 第六章 胚根接种：一种新的快速有效的基因沉默方法 | 第137-150页 |
| 1 前言 | 第138-139页 |
| 2 材料与方法 | 第139-140页 |
| ·载体构建 | 第139页 |
| ·种子催芽 | 第139-140页 |
| ·农杆菌准备与接种 | 第140页 |
| ·植物培育条件 | 第140页 |
| ·统计分析 | 第140页 |
| 3 结果和分析 | 第140-143页 |
| ·胚根处理法——带胚根种子与农杆菌共培养在本氏烟极小苗中成功获得基因沉默 | 第141页 |
| ·带胚根种子处理法基因沉默体系的优化 | 第141-142页 |
| ·带胚根种子处理法成功沉默其它茄科植物内源PDS基因 | 第142-143页 |
| 4 讨论 | 第143-144页 |
| 5 参考文献 | 第144-150页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第150页 |
