| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-17页 |
| 1．1 金针菇概述 | 第10-11页 |
| 1．2 金针菇有效成分概述 | 第11-13页 |
| 1．2．1 食用价值 | 第11页 |
| 1．2．2 药用价值 | 第11-13页 |
| 1．2．2．1 金针菇子实体的药用及其中的抗肿瘤物质 | 第11-12页 |
| 1．2．2．2 金针菇菌丝体中的抗肿瘤物质 | 第12页 |
| 1．2．2．3 金针菇发酵醒液中的抗肿瘤物质 | 第12-13页 |
| 1．3 食用菌深层发酵技术 | 第13-14页 |
| 1．4 本课题研究目的和意义 | 第14-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-33页 |
| 2．1 摇瓶培养工作前期准备条件 | 第17页 |
| 2．2 金针菇菌丝(母种)的纯培养 | 第17-19页 |
| 2．2．1 试验材料 | 第17页 |
| 2．2．2 试验方法 | 第17-19页 |
| 2．2．2．1 培养基的制作 | 第17-18页 |
| 2．2．2．2 培养基灭菌 | 第18页 |
| 2．2．2．3 菌丝的分离纯化 | 第18-19页 |
| 2．3 液体(一级)菌种的培养 | 第19-20页 |
| 2．3．1 试验材料 | 第19页 |
| 2．3．1．1 试验菌种 | 第19页 |
| 2．3．1．2 液体培养基(%) | 第19页 |
| 2．3．2 试验方法 | 第19-20页 |
| 2．3．3 液体菌种的制作 | 第20页 |
| 2．4 液体发酵培养 | 第20-22页 |
| 2．4．1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2．4．1．1 试验菌种 | 第20页 |
| 2．4．1．2 基础液体培养基(%) | 第20-21页 |
| 2．4．2 发酵培养基的筛选方法 | 第21-22页 |
| 2．4．2．1 碳源含量 | 第21页 |
| 2．4．2．2 氮源含量 | 第21页 |
| 2．4．2．3 营养素正交设计 | 第21-22页 |
| 2．4．3 菌丝体深层培养条件试验 | 第22页 |
| 2．4．3．1 培养条件试验 | 第22页 |
| 2．4．3．2 周期确定 | 第22页 |
| 2．4．4 菌丝体的发酵培养 | 第22页 |
| 2．4．4．1 菌丝体干重测定 | 第22页 |
| 2．4．4．2 菌丝体大小测定 | 第22页 |
| 2．5 金针菇菌丝体细胞破壁处理 | 第22-25页 |
| 2．5．1 溶媒试剂的选择 | 第23页 |
| 2．5．2 细胞破壁试验方法 | 第23-25页 |
| 2．5．2．1 热水浸提法 | 第23-24页 |
| 2．5．2．2 超声波法 | 第24页 |
| 2．5．2．3 反复冻融法 | 第24页 |
| 2．5．2．4 自溶法 | 第24页 |
| 2．5．2．5 超声波-反复冻融协同作用法 | 第24-25页 |
| 2．6 多糖和蛋白质的提取分离及产物生产流程的设计 | 第25-26页 |
| 2．7 多糖的提取分离 | 第26-28页 |
| 2．7．1 多糖在醇沉法中的分离提纯 | 第26-27页 |
| 2．7．1．1 菌丝体胞内多糖的分离提纯 | 第26页 |
| 2．7．2．2 发酵醪液中胞外多糖的提取方法 | 第26-27页 |
| 2．7．2 多糖在铜试剂沉淀法中的分离提纯 | 第27-28页 |
| 2．7．2．1 胞内多糖的粗提 | 第27页 |
| 2．7．2．2 胞外多糖的精制 | 第27-28页 |
| 2．8 蛋白质的提取分离 | 第28-30页 |
| 2．8．1 鞣酸复合沉淀法分离蛋白质 | 第28-29页 |
| 2．8．1．1 试验材料 | 第28页 |
| 2．8．1．2 试验方法 | 第28-29页 |
| 2．8．2 盐析法提纯蛋白质 | 第29-30页 |
| 2．8．2．1 试验材料 | 第29-30页 |
| 2．8．2．2 试验方法 | 第30页 |
| 2．9 透析法提纯蛋白质和多糖 | 第30-33页 |
| 2．9．1 试验材料 | 第31页 |
| 2．9．2 试验方法 | 第31页 |
| 2．9．3 透析袋的制备及预处理 | 第31页 |
| 2．9．4 透析操作 | 第31-33页 |
| 2．9．4．1 透析复溶提纯多糖 | 第31-32页 |
| 2．9．4．2 透析提纯蛋白质 | 第32-33页 |
| 第3章 结果与分析 | 第33-62页 |
| 3．1 金针菇菌丝(母种)的纯培养 | 第33-36页 |
| 3．1．1 试验菌种的选择 | 第33页 |
| 3．1．2 母种分离方法的选择 | 第33-34页 |
| 3．1．3 灭菌效果的检验 | 第34页 |
| 3．1．4 菌丝生长现象 | 第34页 |
| 3．1．5 液体菌种的质量控制 | 第34页 |
| 3．1．6 菌种的稳定性 | 第34页 |
| 3．1．7 菌种还原实验 | 第34-35页 |
| 3．1．8 灭菌锅的使用 | 第35页 |
| 3．1．9 试管灭菌的改进 | 第35-36页 |
| 3．2 金针菇发酵培养基组分配比 | 第36-38页 |
| 3．2．1 葡萄糖浓度对菌丝体生长的影响 | 第36-37页 |
| 3．2．2 蛋白陈浓度对菌丝体生长的影响 | 第37-38页 |
| 3．2．3 V_(B1)，MgSO_4KH_2PO_4正交实验求最佳组合 | 第38页 |
| 3．3 金针菇菌丝体深层培养条件 | 第38-43页 |
| 3．3．1 发酵培养时间对菌丝体生长的影响 | 第38-39页 |
| 3．3．2 发酵培养温度对菌丝体生长的影响 | 第39-40页 |
| 3．3．3 发酵温度对菌丝体产物的影响 | 第40页 |
| 3．3．4 培养温度，培养时间，摇瓶转速的正交设计求最佳组合 | 第40-42页 |
| 3．3．5 不同摇瓶装量对金针菇菌丝生长的影响 | 第42页 |
| 3．3．6 不同摇瓶体积、摇瓶装量、接种量对金针菇菌丝生长的影响 | 第42-43页 |
| 3．4 摇瓶发酵培养现象观察 | 第43-45页 |
| 3．4．1 关于静止培养的问题 | 第43-44页 |
| 3．4．2 发酵醒液的质量要求 | 第44页 |
| 3．4．3 发酵终点的判断 | 第44-45页 |
| 3．5 金针菇菌丝体细胞破壁处理 | 第45-51页 |
| 3．5．1 热水浸提法 | 第45-46页 |
| 3．5．2 超声波法 | 第46-48页 |
| 3．5．2．1 破壁时间的影响 | 第46页 |
| 3．5．2．2 加水量对超声波作用的影响 | 第46-47页 |
| 3．5．2．3 破壁次数的影响 | 第47-48页 |
| 3．5．3 反复冻融法 | 第48-49页 |
| 3．5．3．1 冷冻时间的影响 | 第48页 |
| 3．5．3．2 冻融次数的影响 | 第48-49页 |
| 3．5．4 自溶法 | 第49-50页 |
| 3．5．5 超声波—反复冻融协同作用法 | 第50-51页 |
| 3．6 多糖的分离提取 | 第51-55页 |
| 3．6．1 胞内多糖的醇沉分离提取 | 第52-53页 |
| 3．6．1．1 胞内粗多糖的提取 | 第52页 |
| 3．6．1．2 胞内杂多糖的分级 | 第52-53页 |
| 3．6．1．3 胞内精多糖的分级 | 第53页 |
| 3．6．2 胞外多糖的醇沉分离提取 | 第53-55页 |
| 3．6．2．1 胞外粗多糖的提取 | 第53-54页 |
| 3．6．2．2 胞外杂多糖的分级 | 第54-55页 |
| 3．6．2．3 胞外多糖的分步沉淀 | 第55页 |
| 3．7 蛋白质的分离提取 | 第55-60页 |
| 3．7．1 鞣酸复合沉淀蛋白质 | 第55-57页 |
| 3．7．1．1 鞣酸用量对蛋白质絮凝效果的影响 | 第55-56页 |
| 3．7．1．2 絮凝时间对絮凝效果的影响 | 第56页 |
| 3．7．1．3 温度对蛋白质絮凝效果的影响 | 第56-57页 |
| 3．7．1．4 絮凝次数对絮凝效果的影响 | 第57页 |
| 3．7．1．5 碳酸钠用量的判定 | 第57页 |
| 3．7．2 等电点范围的测估 | 第57-59页 |
| 3．7．2．1 沉淀浓度值对应的pI值 | 第57-58页 |
| 3．7．2．2 沉淀质量值对应的pI值 | 第58-59页 |
| 3．7．3 盐析饱和度范围的初步探讨 | 第59-60页 |
| 3．7．3．1 未知等电点的pH7．0盐析效果 | 第59页 |
| 3．7．3．2 特定等电点下的盐析处理 | 第59-60页 |
| 3．7．3．3 盐析操作结果与观察 | 第60页 |
| 3．8 透析注意事项 | 第60-62页 |
| 第4章 结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 附录 | 第66-69页 |
| 附录一 紫外(UV)吸收法测定蛋白质 | 第66-67页 |
| 附录二 铜试剂-苯酚-硫酸法测多糖 | 第67-69页 |
| 附录三 0℃时的硫酸铰饱和浓度表 | 第69页 |
