前言 | 第1-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
·磷酸戊糖途径 | 第10-12页 |
·磷酸戊糖途径 | 第10页 |
·磷酸戊糖途径的功能 | 第10-12页 |
·转醛醇酶的研究 | 第12-18页 |
·转醛醇酶的发现 | 第12页 |
·转醛醇酶的作用 | 第12-13页 |
·转醛醇酶的性质 | 第13-18页 |
·转醛醇酶基因的研究及基因工程 | 第18-22页 |
·转醛醇酶基因的研究 | 第18-19页 |
·转醛醇酶的基因工程研究 | 第19-22页 |
·Zymomonas mobilis CP4 的基因及调控研究 | 第22-24页 |
·Z. mobilis CP4 的碳代谢 | 第22页 |
·Z. mobilis CP4 碳代谢有关基因及表达调控研究 | 第22-24页 |
·本课题的研究目的与内容 | 第24-25页 |
·研究目的 | 第24页 |
·研究内容 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25-26页 |
第二章 实验材料与方法 | 第26-40页 |
·实验材料 | 第26-31页 |
·菌株与质粒 | 第26-27页 |
·主要仪器设备 | 第27-28页 |
·主要的实验试剂 | 第28页 |
·培养基及常用溶液的配制 | 第28-30页 |
·蛋白质含量测定试剂 | 第30-31页 |
·转醛醇酶酶活测定试剂 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-40页 |
·菌株的培养 | 第31-32页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第32-33页 |
·酶切反应 | 第33页 |
·核酸共沉剂回收DNA 片段 | 第33页 |
·凝胶电泳分析 | 第33-34页 |
·目的条带的回收 | 第34页 |
·连接反应 | 第34页 |
·感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
·转化大肠杆菌感受态细胞以及转化子的筛选 | 第35页 |
·电穿孔转化Z.mobilis CP4 感受态细胞以及转化子的筛选 | 第35页 |
·质粒的小量提取 | 第35-37页 |
·转醛醇酶酶活的测定 | 第37-40页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第40-58页 |
·E.coli K-12 talB 基因的克隆 | 第40-44页 |
·PCR 克隆E.coli K-12 talB 基因 | 第40-41页 |
·pZ81-talB 的构建及分析鉴定 | 第41-44页 |
·Peno-talB 基因的构建与分析 | 第44-53页 |
·Peno-talB 基因的构建 | 第44-47页 |
·pUC19-Peno-talB 的构建及分析鉴定 | 第47-49页 |
·pZ81-Peno-talB 的构建及分析鉴定 | 第49-53页 |
·E.coli K-12 talB 和基因Peno-talB 在Z. mobilis CP4 中的表达 | 第53-58页 |
·pZ81-talB 转化Z. mobilis CP4 及转化子的鉴定 | 第53-54页 |
·pZ81-Peno-talB 转化Z. mobilis CP4 及转化子的鉴定 | 第54-55页 |
·转化子生长曲线的测定 | 第55-56页 |
·酶活测定 | 第56-58页 |
第四章 结论 | 第58-59页 |
·结论 | 第58页 |
·建议 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录一 PUC19 的物理图谱 | 第64-65页 |
附录二 PZ81 的物理图谱 | 第65-66页 |
附录三 PZ81-TALB 的物理图谱 | 第66-67页 |
附录四 PUC19-PENO-TALB 的物理图谱 | 第67-68页 |
附录五 PZ81-PENO-TALB 的物理图谱 | 第68-69页 |
附录六 克隆的E.COLI K-12 TALB 产物测序结果 | 第69-71页 |
附录七 克隆的PENO-TALB 产物测序结果 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |