核酸酶Onconase抗肿瘤研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 综述部分 | 第7-21页 |
| 前言 | 第8页 |
| 1 核酸酶的活性和核酸酶的抗肿瘤关系 | 第8-10页 |
| 2 抗肿瘤核酸酶 | 第10-15页 |
| ·Onconase | 第10-13页 |
| ·Onconase结构特点 | 第10-11页 |
| ·Onconase的酶活性 | 第11-12页 |
| ·Onconase抗肿瘤特性 | 第12页 |
| ·Onconase的细胞内吞途径 | 第12-13页 |
| ·BS RNase | 第13-14页 |
| ·Angiogenin | 第14-15页 |
| 3 核酸酶用于抗肿瘤的展望 | 第15-16页 |
| 参考文献 | 第16-21页 |
| 论文部分 | 第21-52页 |
| 背景介绍 | 第23-24页 |
| 1 材料与方法 | 第24-31页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·细胞、培养液 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要溶液 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-31页 |
| ·高效感受态制备 | 第26页 |
| ·质粒构建 | 第26-27页 |
| ·蛋白小量诱导表达(3ml) | 第27页 |
| ·蛋白大量表达(500ml) | 第27页 |
| ·包涵体收集和洗涤 | 第27-28页 |
| ·包涵体溶解和复性 | 第28页 |
| ·蛋白纯化 | 第28页 |
| ·制备C57小鼠的ONC多克隆抗体 | 第28-29页 |
| ·ELISA | 第29页 |
| ·Western Blot | 第29页 |
| ·SPDP偶联蛋白 | 第29-30页 |
| ·小鼠肝脏总RNA抽提 | 第30页 |
| ·降解小鼠肝脏总RNA反应 | 第30页 |
| ·核酸酶活力测定 | 第30-31页 |
| ·MTT法检测细胞数存活率 | 第31页 |
| ·肿瘤细胞毒性检测 | 第31页 |
| 2 结果 | 第31-45页 |
| ·表达质粒的构建和鉴定 | 第31-32页 |
| ·蛋白表达 | 第32-34页 |
| ·包涵体的复性与蛋白纯化 | 第34-36页 |
| ·SPDP偶联蛋白 | 第36-38页 |
| ·降解小鼠肝脏总RNA反应 | 第38-39页 |
| ·核酸酶活性测定 | 第39-41页 |
| ·肿瘤细胞毒性检测 | 第41-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| ·蛋白表达 | 第45-46页 |
| ·包涵体复性 | 第46页 |
| ·酶活力 | 第46页 |
| ·肿瘤细胞毒性 | 第46-47页 |
| 4 结论和展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 英文缩写词表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
