致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 囊膜病毒融合蛋白研究现状及文献评述 | 第11-31页 |
·腮腺炎病毒概述 | 第11页 |
·囊膜病毒融合的分子机制 | 第11-20页 |
·病毒囊膜融合蛋白的一些基本特征 | 第12-13页 |
·流感病毒HA和HIV-1Env蛋白 | 第13-20页 |
·共同融合机制 | 第20-22页 |
·副粘病毒的融合机制 | 第22-29页 |
·副粘病毒简介 | 第22-24页 |
·副粘病毒的融合蛋白 | 第24-26页 |
·副粘病毒的融合机制 | 第26-29页 |
·存在问题、研究内容与目标 | 第29-31页 |
2 腮腺炎病毒HR1、HR2及2-Helix基因载体构建 | 第31-37页 |
·材料与方法 | 第31-35页 |
·质粒与菌株 | 第31页 |
·HR基因的引物设计 | 第31页 |
·构建载体 | 第31-35页 |
·结果与分析 | 第35-37页 |
·基因载体构建 | 第35页 |
·重组质粒的双酶切鉴定和测序 | 第35-36页 |
·重组质粒的表达鉴定 | 第36-37页 |
3 HR1、HR2及2-Helix蛋白的表达和纯化 | 第37-41页 |
·材料与方法 | 第37-38页 |
·重组载体在大肠杆菌中的表达 | 第37页 |
·表达蛋白产物的纯化 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·pGEX-HR1、pGEX-HR2、pGEX-2-Helix都以可溶性蛋白的形式表达 | 第38-39页 |
·HR1、HR2和2-Helix蛋白的初步纯化 | 第39页 |
·HR1和HR2相互作用分析 | 第39-40页 |
·2-Helix与HR1/HR2蛋白以多聚体形式存在 | 第40-41页 |
4 腮腺炎病毒融合蛋白核心结构的二级结构分析 | 第41-46页 |
·材料和方法 | 第41页 |
·质谱分析 | 第41页 |
·化学交联 | 第41页 |
·圆二色谱分析 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-46页 |
·2-Helix和HR1/HR2蛋白以三聚体的形式存在 | 第41-44页 |
·2-Helix和HR1/HR2的α螺旋结构 | 第44-46页 |
5 蛋白2-Helix的结晶和结构解析 | 第46-49页 |
·材料与方法 | 第46页 |
·晶体生长条件的筛选 | 第46页 |
·晶体X射线衍射数据的收集和分析 | 第46页 |
·晶体结构的解析 | 第46页 |
·结果与分析 | 第46-49页 |
·蛋白2-Helix的结晶 | 第46-47页 |
·2-Helix蛋白晶体X射线衍射数据的分析 | 第47-49页 |
6 问题与讨论 | 第49-53页 |
参考文献 | 第53-65页 |
附录1: MuV-HR1测序图 | 第65-66页 |
附录2: MuV-HR2测序图 | 第66-67页 |
附录3: MuV-2-Helix测序图 | 第67-68页 |
附录4: MuV-2-Helix mutation测序图 | 第68-69页 |
附录5: 在读期间发表的研究论文 | 第69页 |