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高效靶向肝癌细胞的嵌合AAV建库及筛选

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-14页
第一章 腺相关病毒载体及 Shuffling 研究进展第14-19页
   ·腺相关病毒简介第14-15页
   ·肝癌治疗的研究历史、现状及其基因治疗的发展第15-16页
   ·Shuffling 原理及研究进展第16-18页
   ·本课题的创意及研究内容第18-19页
     ·本课题的创意第18页
     ·本课题的研究内容第18-19页
第二章 pARC 载体库的构建第19-39页
   ·实验器材第19-21页
     ·实验材料第19页
     ·所需的主要仪器第19-20页
     ·主要试剂第20页
     ·主要试剂的配制第20-21页
     ·所用引物第21页
   ·方法第21-35页
     ·pAdB 载体的构建第21-30页
     ·AAV1-9 Cap 片段的获得第30-31页
     ·AAV1-9 Cap Shuffling第31-32页
     ·pARC 载体库的构建第32-35页
   ·结果第35-39页
     ·AAV1-9 Cap 片段 PCR 结果电泳第35页
     ·AAV1-9 Cap 片段 DNaseI 酶切及 Shuffling 结果电泳第35-36页
     ·pAdB 载体构建相关电泳图第36-38页
     ·pARC 载体的鉴定第38-39页
   ·讨论第39页
第三章 细胞培养及嵌合 AAV 的筛选第39-47页
   ·实验器材第39-41页
     ·实验所需材料及试剂第39-40页
     ·实验所需仪器第40页
     ·主要试剂的配制第40-41页
   ·实验方法第41-44页
     ·细胞培养第41-42页
     ·pARC 质粒转染 HEK293 细胞第42-43页
     ·嵌合 AAV 的筛选第43页
     ·PCR 检测筛选到的嵌合 AAV(cAAV)第43-44页
   ·实验结果第44-46页
     ·pARC 质粒转染 HEK293 细胞相关实验荧光图第44-46页
     ·cAAV PCR 检测电泳图第46页
   ·讨论第46-47页
第四章 cAAV 感染活性的检测第47-56页
   ·实验器材第47-50页
     ·实验所需材料第47页
     ·实验所需仪器第47-48页
     ·实验所需主要试剂第48-49页
     ·主要试剂的配制第49-50页
   ·实验方法第50-53页
     ·pARC-T 载体的构建第50-52页
     ·pARC-T 质粒与 pAAV-EGFP 共转染 HEK293 细胞包装 cAAV-EGFP第52-53页
     ·cAAV-EGFP 感染活性的检测第53页
   ·实验结果第53-55页
     ·pARC-T 载体的鉴定第53-54页
     ·cAAV-EGFP 感染 BEL7402 细胞荧光图及 cCap 序列结构模式图第54-55页
   ·讨论第55-56页
总结第56-57页
参考文献第57-60页
附录第60-63页
致谢第63页

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