摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-14页 |
第一章 腺相关病毒载体及 Shuffling 研究进展 | 第14-19页 |
·腺相关病毒简介 | 第14-15页 |
·肝癌治疗的研究历史、现状及其基因治疗的发展 | 第15-16页 |
·Shuffling 原理及研究进展 | 第16-18页 |
·本课题的创意及研究内容 | 第18-19页 |
·本课题的创意 | 第18页 |
·本课题的研究内容 | 第18-19页 |
第二章 pARC 载体库的构建 | 第19-39页 |
·实验器材 | 第19-21页 |
·实验材料 | 第19页 |
·所需的主要仪器 | 第19-20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要试剂的配制 | 第20-21页 |
·所用引物 | 第21页 |
·方法 | 第21-35页 |
·pAdB 载体的构建 | 第21-30页 |
·AAV1-9 Cap 片段的获得 | 第30-31页 |
·AAV1-9 Cap Shuffling | 第31-32页 |
·pARC 载体库的构建 | 第32-35页 |
·结果 | 第35-39页 |
·AAV1-9 Cap 片段 PCR 结果电泳 | 第35页 |
·AAV1-9 Cap 片段 DNaseI 酶切及 Shuffling 结果电泳 | 第35-36页 |
·pAdB 载体构建相关电泳图 | 第36-38页 |
·pARC 载体的鉴定 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39页 |
第三章 细胞培养及嵌合 AAV 的筛选 | 第39-47页 |
·实验器材 | 第39-41页 |
·实验所需材料及试剂 | 第39-40页 |
·实验所需仪器 | 第40页 |
·主要试剂的配制 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-44页 |
·细胞培养 | 第41-42页 |
·pARC 质粒转染 HEK293 细胞 | 第42-43页 |
·嵌合 AAV 的筛选 | 第43页 |
·PCR 检测筛选到的嵌合 AAV(cAAV) | 第43-44页 |
·实验结果 | 第44-46页 |
·pARC 质粒转染 HEK293 细胞相关实验荧光图 | 第44-46页 |
·cAAV PCR 检测电泳图 | 第46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
第四章 cAAV 感染活性的检测 | 第47-56页 |
·实验器材 | 第47-50页 |
·实验所需材料 | 第47页 |
·实验所需仪器 | 第47-48页 |
·实验所需主要试剂 | 第48-49页 |
·主要试剂的配制 | 第49-50页 |
·实验方法 | 第50-53页 |
·pARC-T 载体的构建 | 第50-52页 |
·pARC-T 质粒与 pAAV-EGFP 共转染 HEK293 细胞包装 cAAV-EGFP | 第52-53页 |
·cAAV-EGFP 感染活性的检测 | 第53页 |
·实验结果 | 第53-55页 |
·pARC-T 载体的鉴定 | 第53-54页 |
·cAAV-EGFP 感染 BEL7402 细胞荧光图及 cCap 序列结构模式图 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
总结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
附录 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |