| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-22页 |
| 1 TIL的研究现状 | 第15-18页 |
| ·TIL的分离技术 | 第15-16页 |
| ·TIL的扩增方法 | 第16页 |
| ·TIL的抗瘤作用及其机制 | 第16-17页 |
| ·TIL细胞表型 | 第17页 |
| ·TIL抗肿瘤免疫困境 | 第17-18页 |
| 2 肝癌的TIL过继治疗 | 第18-21页 |
| ·限制肝癌TIL过继治疗的因素 | 第19页 |
| ·肝癌TIL过继治疗的预后 | 第19-20页 |
| ·肝癌免疫治疗的新方向 | 第20-21页 |
| 3 本课题要解决的问题及研究目的 | 第21-22页 |
| ·课题设计的出发点 | 第21页 |
| ·课题的研究目的 | 第21-22页 |
| 第二章 肝癌“年轻”TIL的建立及其快速扩增 | 第22-34页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 实验器材 | 第22-24页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·所需的主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| 3 方法 | 第24-27页 |
| ·“年轻”TIL的分离 | 第24-26页 |
| ·TIL的快速扩增 | 第26页 |
| ·TIL快速扩增条件的优化 | 第26-27页 |
| 4 结果 | 第27-32页 |
| ·“年轻”TIL的建立 | 第27-28页 |
| ·不同TIL的小规模快速扩增 | 第28-29页 |
| ·OKT3对TIL扩增的影响 | 第29-30页 |
| ·IL-2对TIL扩增的影响 | 第30-31页 |
| ·饲养细胞对TIL扩增的影响 | 第31-32页 |
| 5 讨论 | 第32-33页 |
| 6 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 携带hIL-15的腺病毒-腺相关病毒杂合载体的构建 | 第34-56页 |
| 1 前言 | 第34页 |
| 2 实验器材 | 第34-38页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·主要的实验仪器与设备 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要试剂的配制 | 第36-37页 |
| ·所需引物 | 第37-38页 |
| 3 方法 | 第38-49页 |
| ·pDC759-hIL-15载体构建 | 第38-42页 |
| ·质粒pDC759-hIL-15的大量制备及鉴定 | 第42-44页 |
| ·病毒重组、扩增和纯化 | 第44-48页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第48-49页 |
| 4 结果 | 第49-54页 |
| ·用于质粒pDC759-hIL-15构建的各目的片段的电泳结果 | 第49-52页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第52-54页 |
| ·病毒滴度测定 | 第54页 |
| 5 讨论 | 第54-55页 |
| 6 小结 | 第55-56页 |
| 第四章 携带hIL-15的杂合病毒转染TIL及其对肝癌细胞的体外杀伤 | 第56-70页 |
| 1 前言 | 第56页 |
| 2 实验器材 | 第56-58页 |
| ·实验所需材料 | 第56-57页 |
| ·实验所需仪器 | 第57页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第57-58页 |
| ·主要试剂的配制 | 第58页 |
| 3 实验方法 | 第58-63页 |
| ·细胞培养 | 第58页 |
| ·携带CopGFP基因的病毒转染TIL | 第58-59页 |
| ·ELISA法检测目的蛋白的表达量 | 第59-60页 |
| ·病毒转染的TIL体外增殖活性的检测 | 第60页 |
| ·TK基因自杀功能的检测 | 第60-61页 |
| ·肝癌原代细胞的建立 | 第61-63页 |
| ·病毒转染TIL对肝癌细胞的杀伤 | 第63页 |
| 4 实验结果 | 第63-68页 |
| ·病毒转染TIL后绿色荧光的观察 | 第63-64页 |
| ·病毒转染后IL-15的表达量 | 第64页 |
| ·病毒转染对TIL增殖的影响 | 第64-65页 |
| ·TK基因的自杀功能 | 第65-67页 |
| ·肝癌原代细胞的分离 | 第67-68页 |
| ·病毒转染的TIL对肝癌细胞的杀伤 | 第68页 |
| 5 讨论 | 第68-69页 |
| 6 小结 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 附录1 实验流程图 | 第78-79页 |
| 附录2 载体pDC759-hIL-15的构建流程 | 第79页 |
