| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-35页 |
| 1 高等植物启动子的研究进展 | 第12-32页 |
| ·高等植物启动子的基本组成 | 第12-16页 |
| ·转录起始位点 | 第12-13页 |
| ·TATA-box | 第13-14页 |
| ·一般上游启动子元件 | 第14-15页 |
| ·CAAT-box | 第15页 |
| ·GC-box | 第15页 |
| ·特有的上游启动子元件 | 第15-16页 |
| ·高等植物诱导型启动子 | 第16-31页 |
| ·光诱导表达启动子 | 第17-18页 |
| ·温度诱导表达启动子 | 第18-21页 |
| ·热诱导表达启动子 | 第19-20页 |
| ·冷诱导表达启动子 | 第20-21页 |
| ·水分诱导表达启动子 | 第21-23页 |
| ·低氧（或无氧）诱导表达启动子 | 第22-23页 |
| ·脱水诱导表达启动子 | 第23页 |
| ·植物激素诱导表达启动子 | 第23-28页 |
| ·脱落酸诱导表达启动子 | 第23-25页 |
| ·乙烯诱导表达启动子 | 第25-26页 |
| ·茉莉酸甲酯诱导表达启动子 | 第26-28页 |
| ·伤害诱导表达启动子 | 第28-30页 |
| ·NaCl 诱导表达启动子 | 第30-31页 |
| ·启动子的应用前景 | 第31-32页 |
| 2 BADH 基因及其启动子 | 第32-33页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 4 技术路线 | 第34-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-51页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·菌株和质粒 | 第35-36页 |
| ·PCR 引物 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-51页 |
| ·BADH 基因启动子序列分析 | 第36-37页 |
| ·BADH 基因启动子5' 端缺失片段的获得 | 第37-41页 |
| ·pMD18T-BADH (p)质粒的提取 | 第37-38页 |
| ·PCR 获得不同长度缺失片段 | 第38-39页 |
| ·不同长度缺失片段的限制性酶双酶切 | 第39-40页 |
| ·不同长度缺失片段的回收 | 第40-41页 |
| ·pCAMBIA1301 载体大片段的获得 | 第41页 |
| ·pCAMBIA1301 质粒的提取 | 第41页 |
| ·pCAMBIA1301 载体的限制性酶双酶切 | 第41页 |
| ·载体大片段的回收 | 第41页 |
| ·BADH 基因启动子各缺失片段与GUS 基因融合表达载体构建 | 第41-44页 |
| ·BADH 基因启动子不同长度缺失片段与载体大片段的连接 | 第41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41-44页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·热激法转化大肠杆菌 | 第42页 |
| ·转化产物的检测 | 第42-44页 |
| ·植物表达载体转化根癌农杆菌 | 第44页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第44页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第44页 |
| ·农杆菌的PCR 检测 | 第44页 |
| ·根癌农杆菌介导转化烟草及抗性芽的筛选 | 第44-48页 |
| ·转化用烟草叶片的预培养 | 第45页 |
| ·农杆菌的培养 | 第45页 |
| ·浸染 | 第45页 |
| ·抗性芽的筛选及转基因植株在潮霉素中的生根培养 | 第45页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第45-47页 |
| ·转基因烟草叶片总DNA 的提取 | 第45-46页 |
| ·PCR 检测 | 第46-47页 |
| ·转基因植株的GUS 组织化学染色检测 | 第47-48页 |
| ·BADH 基因启动子不同区段盐诱导功能分析 | 第48-51页 |
| ·转基因烟草的盐处理 | 第48页 |
| ·GUS 组织化学分析 | 第48页 |
| ·GUS 荧光定量分析 | 第48-51页 |
| 第三章 结果与分析 | 第51-63页 |
| 1 BADH 基因启动子序列分析 | 第51-53页 |
| 2 BADH 基因启动子5'端缺失片段与pCAMBIA1301 载体大片段的获得 | 第53-55页 |
| ·pMD18T-BADH (p)与pCAMBIA1301 质粒的提取 | 第53-54页 |
| ·PCR 扩增获得BADH 基因启动子5'端缺失片段 | 第54页 |
| ·不同长度缺失片段与pCAMBIA1301 载体的限制性酶双酶切 | 第54-55页 |
| ·不同长度缺失片段与载体大片段的回收 | 第55页 |
| 3 BADH 基因启动子各缺失片段与GUS 基因融合表达载体构建 | 第55-57页 |
| ·PCR 检测 | 第55-56页 |
| ·双酶切检测 | 第56-57页 |
| 4 植物表达载体转化根癌农杆菌 | 第57页 |
| 5 根癌农杆菌介导转化烟草及抗性芽的筛选 | 第57-60页 |
| ·抗性芽的筛选及转基因植株在潮霉素中的生根培养 | 第57-58页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第58-59页 |
| ·转基因植株的GUS 组织化学染色检测 | 第59-60页 |
| 6 BADH 基因启动子不同区段盐诱导功能分析 | 第60-63页 |
| ·GUS 组织化学分析 | 第60-61页 |
| ·GUS 荧光定量分析 | 第61-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 附录 | 第77-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
