| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-31页 |
| ·立题背景和意义 | 第13-14页 |
| ·脂肪酶结构和功能研究进展 | 第14-18页 |
| ·脂肪酶简介 | 第14页 |
| ·脂肪酶的底物特异性 | 第14-15页 |
| ·脂肪酶的结构 | 第15-16页 |
| ·脂肪酶结构和专一性的关系 | 第16-18页 |
| ·底物结合部位 | 第17页 |
| ·盖子 | 第17-18页 |
| ·壳聚糖的酶法降解研究进展 | 第18-21页 |
| ·壳聚糖的专一性酶法降解研究进展 | 第18-19页 |
| ·壳聚糖的非专一性酶法降解研究进展 | 第19-21页 |
| ·纤维素酶 | 第19-20页 |
| ·果胶酶 | 第20页 |
| ·蛋白酶 | 第20页 |
| ·脂肪酶 | 第20-21页 |
| ·非专一性酶降解壳聚糖机理研究进展 | 第21-22页 |
| ·课题的研究目的和内容 | 第22-24页 |
| ·课题研究目的 | 第22-23页 |
| ·课题的研究内容 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-31页 |
| 第二章 脂肪酶降解壳聚糖的特性研究 | 第31-46页 |
| ·前言 | 第31页 |
| ·材料与试剂 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-34页 |
| ·壳聚糖脱乙酰度(DD)的测定 | 第32页 |
| ·壳聚糖酶粘均分子量的测定 | 第32页 |
| ·pH 值对各种脂肪酶水解壳聚糖的的活力影响 | 第32-33页 |
| ·温度对各种脂肪酶水解壳聚糖的活力的影响 | 第33页 |
| ·pH 值对脂肪酶水解不同DD 壳聚糖活力的影响 | 第33页 |
| ·温度对脂肪酶水解不同DD 壳聚糖活力的影响 | 第33页 |
| ·脂肪酶与不同DD 值壳聚糖的结合能力研究 | 第33页 |
| ·脂肪酶降解壳聚糖产物研究 | 第33-34页 |
| ·水解产物的红外光谱分析 | 第33页 |
| ·水解产物的薄层层析(TLC) 分析 | 第33-34页 |
| ·壳聚糖酶活力的测定 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-43页 |
| ·脂肪酶的壳聚糖酶活力 | 第34-36页 |
| ·pH 值对各种脂肪酶水解壳聚糖活力的影响 | 第34-35页 |
| ·温度对各种脂肪酶水解壳聚糖的活力的影响 | 第35-36页 |
| ·pH 值对脂肪酶降解不同DD 值壳聚糖活力的影响 | 第36-37页 |
| ·温度对脂肪酶降解不同DD 值壳聚糖活力的影响 | 第37-38页 |
| ·脂肪酶与不同DD 值壳聚糖的结合能力 | 第38-39页 |
| ·壳聚糖水解过程中还原糖含量的变化 | 第39-40页 |
| ·壳聚糖水解过程中的粘度变化 | 第40-41页 |
| ·脂肪酶水解壳聚糖产物分析 | 第41-43页 |
| ·壳聚糖水解产物的红外光谱分析 | 第41-42页 |
| ·壳聚糖水解产物的TLC 分析 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 第三章 脂肪酶中具有壳聚糖酶活成分的分离纯化和纯度鉴定 | 第46-59页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·材料与试剂 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·脂肪酶中壳聚糖降解活力组分的分离纯化 | 第47-48页 |
| ·提取缓冲液的选择 | 第47页 |
| ·超滤 | 第47页 |
| ·阴离子交换层析 | 第47页 |
| ·疏水相互作用层析 | 第47-48页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第48页 |
| ·纯化酶的纯度鉴定 | 第48-49页 |
| ·纯化酶的分子量测定 | 第49页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第49页 |
| ·非还原SDS-PAGE | 第49页 |
| ·壳聚糖酶活力测定方法 | 第49页 |
| ·脂肪酶活力测定方法 | 第49-50页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-58页 |
| ·提取缓冲液的选择 | 第50-52页 |
| ·超滤 | 第52-53页 |
| ·脂肪酶中具有壳聚糖降解活力组分的纯化 | 第53-55页 |
| ·阴离子交换层析 | 第53页 |
| ·疏水相互作用层析 | 第53-54页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第54-55页 |
| ·HPLC 鉴定纯化酶的纯度 | 第55-56页 |
| ·纯化酶的纯度鉴定和相对分子质量的测定 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第四章 脂肪酶中具有壳聚糖降解活力酶组分的结构与活性部位研究 | 第59-74页 |
| ·前言 | 第59页 |
| ·材料与试剂 | 第59-60页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·纯化酶的氨基酸组成分析 | 第60页 |
| ·纯化酶N-末端氨基酸列的测定 | 第60页 |
| ·组氨酸的修饰 | 第60页 |
| ·DEPC 浓度的测定 | 第60页 |
| ·DEPC 修饰 | 第60页 |
| ·羟胺对修饰酶活力的恢复作用 | 第60页 |
| ·色氨酸的修饰 | 第60-61页 |
| ·甲硫氨酸的修饰 | 第61页 |
| ·羧基氨基酸的修饰 | 第61页 |
| ·羟基的修饰 | 第61页 |
| ·精氨酸的修饰 | 第61-62页 |
| ·酪氨酸的修饰 | 第62页 |
| ·巯基的修饰 | 第62页 |
| ·二硫键的修饰 | 第62页 |
| ·壳聚糖酶活测定 | 第62页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-71页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第62-63页 |
| ·N-末端氨基酸序列测定 | 第63-64页 |
| ·组氨酸的化学修饰 | 第64-67页 |
| ·色氨酸的化学修饰 | 第67-68页 |
| ·甲硫氨酸的化学修饰 | 第68-69页 |
| ·羧基的化学修饰 | 第69页 |
| ·羟基、精氨酸、酪氨酸和二硫键的修饰 | 第69-70页 |
| ·巯基的修饰 | 第70-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第五章 具有壳聚糖酶活力组分的酶学性质及作用模式研究 | 第74-92页 |
| ·前言 | 第74页 |
| ·材料与试剂 | 第74-75页 |
| ·实验材料 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74-75页 |
| ·实验方法 | 第75-76页 |
| ·pH 值对纯化酶活性的影响 | 第75页 |
| ·pH 值对纯化酶稳定性的影响 | 第75页 |
| ·温度对纯化酶活力的影响 | 第75页 |
| ·温度对纯化酶稳定性的影响 | 第75页 |
| ·纯化酶水解壳聚糖动力学研究 | 第75-76页 |
| ·底物专一性测定 | 第76页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第76页 |
| ·纯化酶水解氨基葡萄糖低聚糖和乙酰氨基葡萄糖低聚糖 | 第76页 |
| ·TLC 法分析壳聚糖酶水解产物 | 第76页 |
| ·HPLC 法分析酶水解产物 | 第76页 |
| ·壳聚糖酶活力测定 | 第76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-88页 |
| ·pH 值对酶活力的影响 | 第76-77页 |
| ·pH 值对酶稳定性的影响 | 第77-78页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第78-79页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第79页 |
| ·底物专一性测定 | 第79-80页 |
| ·纯化酶水解壳聚糖的动力学 | 第80页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第80-81页 |
| ·TLC 法分析纯化酶水解甲壳低聚糖产物 | 第81-83页 |
| ·HPLC 法分析纯化酶水解甲壳低聚糖产物 | 第83-85页 |
| ·TLC 法分析纯化酶水解乙酰甲壳低聚糖产物 | 第85-86页 |
| ·HPLC 法分析纯化酶水解乙酰甲壳低聚糖产物 | 第86-88页 |
| ·本章小结 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-92页 |
| 主要结论 | 第92-94页 |
| 论文创新点 | 第94-95页 |
| 附录 | 第95-103页 |
| 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
