摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
主要英文缩略词语 | 第8-11页 |
1 文献综述 | 第11-22页 |
·脂肪的合成与分解 | 第11-12页 |
·脂肪合成代谢 | 第11-12页 |
·脂肪分解代谢 | 第12页 |
·肝脂肪变性研究 | 第12-17页 |
·肝脏脂肪酸生成 | 第12-13页 |
·肝脂肪变性发生的分子机制 | 第13-15页 |
·水禽肝脂质代谢相关基因研究进展 | 第15-17页 |
·表达序列标签(EST)技术及应用 | 第17-21页 |
·EST概念及原理 | 第17页 |
·EST的应用现状 | 第17-19页 |
·ESTs研究现状 | 第19-21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-43页 |
·试验材料 | 第22页 |
·仪器和试剂 | 第22-26页 |
·主要仪器设备 | 第22-23页 |
·菌种及载体 | 第23页 |
·引物和核苷酸序列 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·主要试剂配置 | 第24-26页 |
·试验方法 | 第26-43页 |
·鹅肝细胞分离及培养 | 第26页 |
·肝细胞总RNA提取 | 第26-27页 |
·mRNA分离纯化 | 第27-28页 |
·SSH文库的构建 | 第28-35页 |
·PCR产物纯化与消减文库的生成 | 第35-38页 |
·斑点杂交筛选阳性克隆 | 第38-41页 |
·表达序列标签(EST)测序 | 第41页 |
·EST生物信息学分析 | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-55页 |
·肝细胞的形态特征 | 第43-44页 |
·总RNA提取与mRNA分离纯化 | 第44-45页 |
·总RNA提取 | 第44页 |
·mRNA分离纯化 | 第44-45页 |
·SSH文库的构建 | 第45-47页 |
·ds cDNA的制备与Rsa I酶切 | 第45页 |
·接头连接效率分析 | 第45页 |
·消减产物第二次PCR扩增 | 第45-46页 |
·消减效率分析 | 第46-47页 |
·斑点杂交 | 第47-48页 |
·差异表达基因的生物信息学分析 | 第48-55页 |
·克隆测序 | 第48页 |
·EST基因的分类 | 第48-49页 |
·EST功能分类 | 第49-55页 |
4 讨论 | 第55-62页 |
·鹅肝细胞体外培养 | 第55页 |
·肝细胞脂肪变性模型的建立 | 第55-56页 |
·SSH文库构建的质量评价 | 第56-58页 |
·脂肪酸诱导肝细胞差异表达基因 | 第58-62页 |
·PRL家族(RPL22、RPL23、RPL39、RPL5) | 第58-59页 |
·谷氨酰胺转氨酶3(TGM3) | 第59页 |
·凝血栓蛋白(THBS1) | 第59-60页 |
·载脂蛋白H(APoH) | 第60页 |
·脂肪酸结合蛋白(FABP) | 第60-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录 | 第70-71页 |
硕士研究生学习期间参与科研项目及发表文章 | 第71页 |