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脂质体包裹质粒直接打点注射睾丸和卵巢生产转基因小鼠的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
1 文献综述第12-23页
   ·转基因动物研究进展第13-16页
     ·显微注射法第13页
     ·逆转录病毒法第13-14页
     ·胚胎干细胞法第14-15页
     ·体细胞、胚胎细胞克隆法第15页
     ·精子介导法第15-16页
     ·原始生殖细胞介导法第16页
   ·精子介导法转基因动物研究进展第16-20页
     ·精子对外源DNA内化转运、整合、降解的分子机制第16-17页
     ·精子介导的转基因动物的方法第17-20页
   ·卵母细胞介导的转基因研究进展第20-22页
     ·卵母细胞发育第20-21页
     ·卵母细胞介导的转基因研究进展第21-22页
   ·脂质体的作用第22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-38页
   ·材料第23-27页
     ·试验对象第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·主要试剂及配制第24-27页
     ·手术器械第27页
   ·试验方法第27-38页
     ·试验鼠的准备第27-28页
     ·提取RNA器皿的处理第28页
     ·超排方法第28页
     ·质粒的转化第28页
     ·质粒提取第28-29页
     ·质粒的质量和浓度的检测第29页
     ·探针的标记第29-31页
     ·打点注射法转染公鼠睾丸对公鼠繁殖力的影响第31-32页
     ·公鼠睾丸打点注射后外源DNA在睾丸组织中代谢时间的研究第32页
     ·母鼠卵巢打点注射后外源DNA在卵巢组织中代谢时间的研究第32-33页
     ·转基因母鼠与正常母鼠繁殖力的比较第33-34页
     ·母鼠卵巢打点注射后胚胎eGFP表达的检测第34-35页
     ·F1代转基因阳性小鼠的筛选和鉴定第35-38页
3 结果与分析第38-48页
   ·质粒的酶切鉴定第39页
   ·PCR产物的电泳结果第39页
   ·打点注射法对公鼠生殖力的影响程度第39-40页
   ·外源DNA在睾丸组织和精液中的代谢时间第40-41页
   ·母鼠卵巢打点注射后外源DNA在卵巢组织中代谢的时间第41-42页
   ·转基因母鼠与正常母鼠繁殖力的比较结果第42-44页
   ·母鼠卵巢打点注射后卵母细胞的EGFP表达第44页
   ·母鼠卵巢打点注射后胚胎的EGFP表达第44页
   ·F1代小鼠基因组PCR产物的电泳结果及数据统计第44-45页
   ·PCR产物的SOUTHERN杂交结果第45-46页
   ·反转录PCR(RT-PCR)结果第46-47页
   ·PCR产物的序列测定第47页
   ·活体成像仪中观察F1代阳性鼠第47-48页
4 讨论第48-52页
   ·小鼠麻醉及手术问题第48-49页
   ·台盼兰的指示作用第49页
   ·外源基因进入组织后的命运第49-50页
   ·雄性生殖细胞的转染第50-52页
     ·转基因阳性后代的筛选第51-52页
     ·转基因表达的检测第52页
5 结论第52-54页
6.参考文献第54-59页
致谢第59-60页
攻读学位期间发表论文情况第60页

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