摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
1 文献综述 | 第12-23页 |
·转基因动物研究进展 | 第13-16页 |
·显微注射法 | 第13页 |
·逆转录病毒法 | 第13-14页 |
·胚胎干细胞法 | 第14-15页 |
·体细胞、胚胎细胞克隆法 | 第15页 |
·精子介导法 | 第15-16页 |
·原始生殖细胞介导法 | 第16页 |
·精子介导法转基因动物研究进展 | 第16-20页 |
·精子对外源DNA内化转运、整合、降解的分子机制 | 第16-17页 |
·精子介导的转基因动物的方法 | 第17-20页 |
·卵母细胞介导的转基因研究进展 | 第20-22页 |
·卵母细胞发育 | 第20-21页 |
·卵母细胞介导的转基因研究进展 | 第21-22页 |
·脂质体的作用 | 第22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-38页 |
·材料 | 第23-27页 |
·试验对象 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·主要试剂及配制 | 第24-27页 |
·手术器械 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-38页 |
·试验鼠的准备 | 第27-28页 |
·提取RNA器皿的处理 | 第28页 |
·超排方法 | 第28页 |
·质粒的转化 | 第28页 |
·质粒提取 | 第28-29页 |
·质粒的质量和浓度的检测 | 第29页 |
·探针的标记 | 第29-31页 |
·打点注射法转染公鼠睾丸对公鼠繁殖力的影响 | 第31-32页 |
·公鼠睾丸打点注射后外源DNA在睾丸组织中代谢时间的研究 | 第32页 |
·母鼠卵巢打点注射后外源DNA在卵巢组织中代谢时间的研究 | 第32-33页 |
·转基因母鼠与正常母鼠繁殖力的比较 | 第33-34页 |
·母鼠卵巢打点注射后胚胎eGFP表达的检测 | 第34-35页 |
·F1代转基因阳性小鼠的筛选和鉴定 | 第35-38页 |
3 结果与分析 | 第38-48页 |
·质粒的酶切鉴定 | 第39页 |
·PCR产物的电泳结果 | 第39页 |
·打点注射法对公鼠生殖力的影响程度 | 第39-40页 |
·外源DNA在睾丸组织和精液中的代谢时间 | 第40-41页 |
·母鼠卵巢打点注射后外源DNA在卵巢组织中代谢的时间 | 第41-42页 |
·转基因母鼠与正常母鼠繁殖力的比较结果 | 第42-44页 |
·母鼠卵巢打点注射后卵母细胞的EGFP表达 | 第44页 |
·母鼠卵巢打点注射后胚胎的EGFP表达 | 第44页 |
·F1代小鼠基因组PCR产物的电泳结果及数据统计 | 第44-45页 |
·PCR产物的SOUTHERN杂交结果 | 第45-46页 |
·反转录PCR(RT-PCR)结果 | 第46-47页 |
·PCR产物的序列测定 | 第47页 |
·活体成像仪中观察F1代阳性鼠 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
·小鼠麻醉及手术问题 | 第48-49页 |
·台盼兰的指示作用 | 第49页 |
·外源基因进入组织后的命运 | 第49-50页 |
·雄性生殖细胞的转染 | 第50-52页 |
·转基因阳性后代的筛选 | 第51-52页 |
·转基因表达的检测 | 第52页 |
5 结论 | 第52-54页 |
6.参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第60页 |