豫谷一号BAC文库的构建及鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1.文献综述 | 第11-32页 |
| ·谷子的经济意义及其研究 | 第11页 |
| ·谷子研究的分子生物学概况 | 第11-19页 |
| ·谷子分子标记的开发及相关研究进展 | 第12-16页 |
| ·遗传图谱的构建 | 第16-17页 |
| ·基因定位 | 第17页 |
| ·谷子与其它禾谷类作物的比较遗传学研究 | 第17-18页 |
| ·谷子品种鉴定及遗传进化研究 | 第18-19页 |
| ·常用的目的基因克隆技术 | 第19-22页 |
| ·通过已知基因产物的分析鉴定 | 第19-20页 |
| ·通过遗传表型分析 | 第20页 |
| ·以图谱为基础的定位克隆技术 | 第20-22页 |
| ·大片段DNA插入文库 | 第22-31页 |
| ·lamda噬菌体文库 | 第22-23页 |
| ·Cosmid文库 | 第23页 |
| ·YAC文库 | 第23页 |
| ·PAC文库 | 第23页 |
| ·BAC文库 | 第23-31页 |
| ·本论文的立题依据 | 第31-32页 |
| 2.实验材料与方法 | 第32-41页 |
| ·实验材料及药品的准备 | 第32页 |
| ·试验材料的准备 | 第32页 |
| ·BAC载体的选择 | 第32页 |
| ·感受态细胞的选择 | 第32页 |
| ·配制试剂(见附录3) | 第32页 |
| ·试验所用仪器 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-41页 |
| ·大分子量核DNA的提取[63-67] | 第32-33页 |
| ·胶块的制备 | 第33-34页 |
| ·胶块质量的鉴定 | 第34页 |
| ·部分酶切最佳酶用量的确定 | 第34-35页 |
| ·大片段DNA的大量酶切 | 第35页 |
| ·酶切DNA片段的第一次选择 | 第35-36页 |
| ·大片段DNA的二次选择 | 第36页 |
| ·大片段DNA的回收 | 第36-37页 |
| ·大片段DNA与载体的连接 | 第37页 |
| ·连接产物的电转化 | 第37-38页 |
| ·BAC质粒的提取及鉴定 | 第38-39页 |
| ·BAC文库的装备 | 第39-41页 |
| 3.结果与分析 | 第41-56页 |
| ·高分子量DNA的制备 | 第41-43页 |
| ·酶切条件的确定 | 第43-45页 |
| ·大量酶切DNA的第一次片段选择的结果 | 第45-46页 |
| ·对所回收片段的二次选择 | 第46-47页 |
| ·回收片段的定量 | 第47-48页 |
| ·转化结果 | 第48页 |
| ·克隆平均插入片段大小的分析 | 第48-50页 |
| ·装配文库 | 第50-51页 |
| ·插入片段的稳定性分析 | 第51-56页 |
| 4.讨论 | 第56-61页 |
| ·HWMDNA制备的方法探讨 | 第56-57页 |
| ·影响连接效率的因素及库及最佳片段选择的探讨 | 第57-58页 |
| ·BAC文库构建所需感受态细胞的优化选择 | 第58-59页 |
| ·影响转化效率因素的研究 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录(1) 缩略词表 | 第68-69页 |
| 附录(2) 试验过程中的图片 | 第69-70页 |
| 附录(3) 试验所用试剂的配置 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
