摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1.前言 | 第11-20页 |
·果实成熟代谢途径的研究进展 | 第12-14页 |
·乙烯合成途径 | 第12-13页 |
·乙烯信号传导系统 | 第13页 |
·转录因子调控 | 第13-14页 |
·RIN基因 | 第14-17页 |
·RIN基因的发现及克隆 | 第14-15页 |
·MADS-box基因家族概念及结构特征 | 第15页 |
·MADS-box基因家族的分类及功能 | 第15-16页 |
·MADS-box基因互作机理 | 第16-17页 |
·番茄中MADS-box基因的研究进展 | 第17页 |
·酵母双杂交系统 | 第17-18页 |
·研究的目的和意义 | 第18-20页 |
2.材料与方法 | 第20-33页 |
·材料 | 第20-21页 |
·植物材料 | 第20页 |
·菌株和质粒 | 第20页 |
·工具酶、试剂盒及试剂 | 第20页 |
·引物合成及序列测定 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-33页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·组织表达分析 | 第22-23页 |
·cDNA文库的构建 | 第23-26页 |
·pGBKT7钓饵载体的构建 | 第26-29页 |
·酵母的转化及"钓饵"可利用性验证 | 第29-31页 |
·MATING及效率检测 | 第31-32页 |
·基因的生物信息学分析 | 第32-33页 |
3.结果与分析 | 第33-52页 |
·RIN基因cDNA的克隆与表达分析 | 第33-35页 |
·RIN基因cDNA的克隆与亚克隆 | 第33页 |
·RIN基因的表达分析 | 第33-35页 |
·Mating"钓饵"的构建 | 第35-37页 |
·pGBKT7重组载体的构建 | 第35-36页 |
·文库"钓饵"的生成 | 第36-37页 |
·"钓饵"载体自激活和毒性验证 | 第37-38页 |
·自激活验证 | 第37页 |
·毒性验证 | 第37-38页 |
·酵母双杂交文库的构建 | 第38-42页 |
·酵母双杂交cDNA文库的生成 | 第38-40页 |
·酵母双杂交GAL4 AD融合文库的构建 | 第40-41页 |
·文库cDNA插入片段大小凝胶电泳检测 | 第41-42页 |
·Mating | 第42-44页 |
·Mating效率检测 | 第42-43页 |
·双杂交阳性菌落凝胶电泳检测 | 第43-44页 |
·cDNA插入片段序列分析和功能预测 | 第44-52页 |
·cDNA插入片段序列分析 | 第44-45页 |
·cDNA插入片段功能预测分析 | 第45-52页 |
4.讨论 | 第52-57页 |
·转录因子作用机制的探讨 | 第52-53页 |
·RIN基因果实成熟调控机制的假设 | 第53-54页 |
·MIKC型MADS基因保守域结构功能在本实验中的讨论 | 第54-55页 |
·酵母系统假阳性的探讨 | 第55-56页 |
·后期工作展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
附录一:常用培养基及试剂的配制 | 第69-71页 |
附录二:Mating序列原始信息 | 第71-80页 |