| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-42页 |
| ·高等植物体中多胺生理功能及其分子生物学研究进展 | 第13-27页 |
| ·多胺的分布与生物合成及代谢 | 第13-15页 |
| ·多胺与果树生长发育的关系 | 第15-20页 |
| ·多胺与高等植物的逆境胁迫 | 第20-23页 |
| ·多胺生物合成代谢相关酶的生物学研究 | 第23-27页 |
| ·高等植物体内脯氨酸的生物合成代谢及其相关酶类基因研究进展 | 第27-40页 |
| ·植物体内Pro 的自然分布与运输 | 第27-28页 |
| ·Pro 生物合成及其相关酶的生物学研究进展 | 第28-35页 |
| ·Pro 累积的研究进展 | 第35-38页 |
| ·Pro 降解代谢及其相关酶的生物学研究进展 | 第38-40页 |
| ·外源Pro 对高等植物的影响 | 第40页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二章 苹果多胺生物合成相关基因的功能鉴定 | 第42-101页 |
| ·材料和方法 | 第42-57页 |
| ·实验材料 | 第42-44页 |
| ·植物组织总RNA 的提取及含量和纯度检测 | 第44-45页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第45-46页 |
| ·基因组DNA 的提取与检测 | 第46-47页 |
| ·PCR 扩增 | 第47页 |
| ·目的DNA 片段回收 | 第47-48页 |
| ·连接反应 | 第48页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第48-49页 |
| ·碱法小量质粒DNA 的提取 | 第49-50页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第50页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第50-51页 |
| ·苹果MdADC、MdACL5 和MdSPMS 基因过量表达载体构建 | 第51-53页 |
| ·烟草的栽培、转化及转基因植株分析 | 第53-54页 |
| ·逆境胁迫下转基因植株的生理生化测定 | 第54-56页 |
| ·数据处理分析 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-96页 |
| ·苹果MdADC、MdACL5 和MdSPMS 基因克隆与表达载体构建 | 第57页 |
| ·苹果MdADC 转基因烟草的获得和鉴定 | 第57-59页 |
| ·苹果MdADC 基因过量表达对烟草表型的影响 | 第59页 |
| ·苹果MdADC 转基因烟草的非生物胁迫抗性鉴定 | 第59-74页 |
| ·苹果MdACL5 和MdSPMS 转基因烟草的获得和鉴定 | 第74-76页 |
| ·苹果MdACL5 与MdSPMS 基因过量表达对烟草表型的影响比较 | 第76-78页 |
| ·苹果MdACL5 与MdSPMS 转基因烟草的非生物胁迫抗性比较鉴定 | 第78-96页 |
| ·讨论 | 第96-101页 |
| ·过量表达苹果MdADC、MdACL5 和MdSPMS 均可以提高烟草的内源多胺含量 | 第96-97页 |
| ·过量表达苹果MdADC、MdACL5 和MdSPMS 对烟草株高等表型的影响 | 第97页 |
| ·过量表达苹果MdADC、MdACL5 和MdSPMS 均提高了烟草的非生物胁迫抗性 | 第97-98页 |
| ·多胺与脯氨酸含量的关系 | 第98页 |
| ·多胺与抗氧化酶的关系 | 第98-99页 |
| ·多胺与丙二醛含量、相对电导率及根系活力的关系 | 第99-100页 |
| ·苹果MdACL5 和MdSPMS 基因的功能表型差异 | 第100-101页 |
| 第三章 苹果Δ~1-吡咯琳-5-羧酸脱氢酶基因的克隆与功能研究 | 第101-123页 |
| ·材料和方法 | 第101-111页 |
| ·实验材料 | 第101-102页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因片段的分离 | 第102页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的3'-RACE | 第102-103页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的5'-RACE | 第103-104页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因全长的分离 | 第104页 |
| ·目的DNA 片段回收与连接反应 | 第104页 |
| ·大肠杆菌DH5α及根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第104页 |
| ·碱法小量质粒DNA 的提取及酶切鉴定 | 第104页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因原核表达研究 | 第104-107页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的组织特异性表达及低温胁迫响应表达分析 | 第107页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因正反义植物表达载体的构建 | 第107-109页 |
| ·‘王林’愈伤组织的转化研究及转基因检测 | 第109-110页 |
| ·苹果MdP5CDH 转正反义基因与非转基因愈伤组织生长曲线的制作 | 第110-111页 |
| ·内源脯氨酸含量测定 | 第111页 |
| ·数据处理分析 | 第111页 |
| ·结果与分析 | 第111-120页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的克隆与序列分析 | 第111-114页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的原核表达研究 | 第114-116页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的组织特异性表达 | 第116-117页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的低温胁迫响应 | 第117-118页 |
| ·苹果MdP5CDH 转正反义基因愈伤组织获得及其基因表达检测 | 第118-119页 |
| ·苹果MdP5CDH 转正反义基因愈伤组织生长曲线及其内源脯氨酸含量分析 | 第119-120页 |
| ·讨论 | 第120-123页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的克隆与序列分析 | 第120-121页 |
| ·P5CDH 基因的组织特异性表达具有物种差异 | 第121页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因受低温胁迫诱导表达提高 | 第121页 |
| ·苹果MdP5CDH 基因的过量表达和反义表达均影响了细胞内脯氨酸水平 | 第121-123页 |
| 第四章 结论与创新点 | 第123-124页 |
| ·结论 | 第123页 |
| ·创新点 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-145页 |
| 附录 | 第145-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 攻读学位期间完成的学术论文 | 第152页 |
