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用于肝组织工程三维多孔活性支架的构建研究

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第一章 绪论第10-25页
   ·肝脏第10-11页
   ·生物人工肝第11-19页
     ·研究现状第11-12页
     ·肝细胞来源第12-13页
     ·肝细胞培养第13-14页
     ·细胞外基质材料第14-17页
     ·细胞与基质材料的相互作用第17-18页
     ·细胞培养条件的优化第18-19页
   ·生长因子及其控制释放体系第19-21页
     ·生长因子的特点和功能第19-20页
     ·生长因子的控制释放体系第20-21页
   ·基因转染在组织工程中的应用第21-24页
     ·基因传递的途径第21-22页
     ·基因传递的载体第22-24页
   ·课题提出第24-25页
第二章 壳聚糖-半乳糖化透明质酸三维多孔支架的制备研究第25-45页
   ·引言第25-26页
   ·实验部分第26-30页
     ·实验材料第26-27页
     ·实验设备第27-28页
     ·半乳糖化透明质酸的合成和性能表征第28页
     ·壳聚糖-半乳糖化透明质酸支架的制备第28-29页
     ·三维支架的红外光谱第29页
     ·三维支架的X射线光电子能谱分析(XPS)第29页
     ·三维支架的扫描电镜观察(SEM)第29页
     ·三维支架的孔隙率的测定第29页
     ·静态接触角的测定第29-30页
     ·三维支架机械性能的测定第30页
   ·结果与讨论第30-44页
     ·半乳糖化透明质酸的合成和表征第30-33页
     ·壳聚糖-半乳糖化透明质酸支架第33-38页
     ·红外光谱第38-39页
     ·X射线光电子能谱分析第39-42页
     ·静态接触角的测定第42-43页
     ·支架的机械性能测定第43-44页
   ·小结第44-45页
第三章 原代大鼠肝细胞的体外培养研究第45-66页
   ·引言第45-46页
   ·实验部分第46-51页
     ·实验材料第46-47页
     ·实验设备第47页
     ·实验试剂配制第47-48页
     ·原代大鼠肝细胞的分离第48-49页
     ·原代大鼠肝细胞的贴附实验第49页
     ·原代大鼠肝细胞在支架中的培养第49-50页
     ·扫描电镜观察细胞在支架中的生长第50页
     ·支架切片观察第50页
     ·细胞活性测定第50-51页
     ·原代肝细胞的动态培养第51页
   ·结果与讨论第51-65页
     ·原代大鼠肝细胞的分离第51-52页
     ·原代大鼠肝细胞在材料上的贴附第52-55页
     ·原代大鼠肝细胞在支架中的培养第55-57页
     ·原代肝细胞活性的测定第57-59页
     ·肝实质细胞与非实质细胞的共同培养第59-61页
     ·原代肝细胞的动态培养第61-65页
   ·小结第65-66页
第四章 基于壳聚糖-GHA支架的生长因子控制释放体系的研究第66-83页
   ·引言第66-67页
   ·实验部分第67-70页
     ·实验材料第67-68页
     ·实验设备第68页
     ·壳聚糖-GHA支架的制备第68页
     ·支架肝素化实验第68-69页
     ·肝素复合支架的表征第69页
     ·肝素复合支架的肝素释放实验第69页
     ·甲苯胺蓝方法检测肝素第69-70页
     ·肝素复合支架结合EGF和EGF的释放实验第70页
   ·结果与讨论第70-81页
     ·甲苯胺蓝方法检测肝素第70-71页
     ·壳聚糖-GHA支架的肝素化第71-74页
     ·肝素从复合支架上的释放第74-75页
     ·肝素复合支架的表征第75-80页
     ·肝素-EGF复合支架的EGF释放第80-81页
   ·小结第81-83页
第五章 基于高分子多糖支架的基因转染研究第83-107页
   ·引言第83-84页
   ·实验部分第84-90页
     ·实验材料第84-85页
     ·实验设备第85页
     ·质粒的制备第85-87页
     ·细胞系的培养第87-88页
     ·PEI的细胞毒性实验第88页
     ·PEI/DNA转染最佳N/P比的选择实验第88-89页
     ·PEI/DNA转染最佳DNA加入量的选择实验第89页
     ·不同类型细胞系间的转染差异第89页
     ·二维培养的原代肝实质细胞的转染第89页
     ·三维支架中的细胞转染第89-90页
     ·PEI/DNA复合物的Zeta电势和颗粒粒径第90页
     ·海藻酸对PEI/DNA转染体系的影响第90页
   ·结果与讨论第90-106页
     ·质粒的制备第90-91页
     ·PEI的细胞毒性实验第91-92页
     ·PEI/DNA转染的最佳N/P比第92-94页
     ·PEI/DNA转染的最佳DNA加入量第94-97页
     ·不同细胞系细胞间的转染差异实验第97页
     ·大鼠原代肝实质细胞的二维转染第97-100页
     ·三维支架中的细胞转染第100-101页
     ·动态光散射测定PEI/DNA复合物的Zeta电势和粒径第101-104页
     ·海藻酸对PEI/DNA转染体系的影响第104-106页
   ·小结第106-107页
第六章 全文总结和创新点第107-109页
参考文献第109-121页
发表论文和科研情况说明第121-122页
致谢第122页

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