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新一代长效干扰素的研发—干扰素-α的表达纯化及活性测定

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·干扰素的研究背景第8-12页
     ·干扰素的发现第8-9页
     ·干扰素的产生及其分类第9-10页
     ·干扰素的治病原理第10-12页
   ·蛋白质的聚乙二醇修饰第12-15页
     ·聚乙二醇的性质第12-13页
     ·PEG修饰蛋白的应用原理第13-14页
     ·聚乙二醇的活化第14-15页
   ·IFN-α修饰的研究进展第15-17页
     ·PEG-干扰素-α2a (Pegasys)第15页
     ·PEG-干扰素-α26 (PEG-Intron)第15-16页
     ·PEG-干扰素-α2(位点特异的PEG化)第16-17页
第二章 干扰素-α的表达及表达条件优化第17-29页
   ·干扰素-α的表达第17-19页
     ·几种常用启动子和诱导调控表达系统第17-18页
     ·材料第18页
     ·仪器第18-19页
     ·操作步骤第19页
   ·SDS-PAGE第19-22页
     ·材料及试剂配制第19-22页
   ·蛋白表达条件的优化第22页
   ·SDS-PAGE分析蛋白表达产物第22-24页
     ·材料及试剂配制第23-24页
     ·仪器第24页
     ·操作步骤第24页
   ·实验结果及讨论第24-28页
     ·干扰素-α的表达第24-25页
     ·蛋白表达条件优化第25-27页
     ·SDS-PAGE分析蛋白表达产物第27-28页
   ·小结第28-29页
第三章 粗提干扰素第29-39页
   ·包涵体的溶解复性第29-31页
     ·材料及试剂配制第30页
     ·实验操作第30-31页
   ·阳离子交换层析第31-33页
     ·材料试剂及主要仪器第32页
     ·操作步骤第32-33页
   ·蛋白复性条件优化第33页
   ·蛋白质含量测定第33-35页
     ·材料试剂及主要仪器第34页
     ·操作步骤第34-35页
   ·实验结果及讨论第35-38页
     ·包涵体的溶解复性第35页
     ·阳离子交换层析第35-37页
     ·蛋白复性条件优化第37-38页
   ·小结第38-39页
第四章 疏水相互作用层析第39-52页
   ·疏水层析作用原理第39-40页
   ·疏水层析作用影响因素第40-41页
   ·疏水层析方法第41-42页
     ·材料试剂及主要仪器第41页
     ·操作步骤第41-42页
   ·疏水层析介质选择第42页
   ·硫酸铵浓度优化第42页
   ·分离度的优化第42页
   ·实验结果及讨论第42-51页
     ·疏水层析介质选择第42-44页
     ·硫酸铵浓度优化第44-46页
     ·分离度的优化第46-51页
   ·小结第51-52页
第五章 蛋白活性测定第52-56页
   ·材料与试剂配置第52-53页
   ·主要仪器第53页
   ·悬浮培养的细胞传代第53页
   ·悬浮细胞的冻存第53页
   ·悬浮细胞解冻与复苏第53-54页
   ·活细胞计数第54页
   ·细胞活性实验操作步骤第54-55页
   ·实验结果及讨论第55页
   ·小结第55-56页
第六章 总结及展望第56-57页
参考文献第57-59页
发表论文和科研情况说明第59-60页
致谢第60页

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