中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
·干扰素的研究背景 | 第8-12页 |
·干扰素的发现 | 第8-9页 |
·干扰素的产生及其分类 | 第9-10页 |
·干扰素的治病原理 | 第10-12页 |
·蛋白质的聚乙二醇修饰 | 第12-15页 |
·聚乙二醇的性质 | 第12-13页 |
·PEG修饰蛋白的应用原理 | 第13-14页 |
·聚乙二醇的活化 | 第14-15页 |
·IFN-α修饰的研究进展 | 第15-17页 |
·PEG-干扰素-α2a (Pegasys) | 第15页 |
·PEG-干扰素-α26 (PEG-Intron) | 第15-16页 |
·PEG-干扰素-α2(位点特异的PEG化) | 第16-17页 |
第二章 干扰素-α的表达及表达条件优化 | 第17-29页 |
·干扰素-α的表达 | 第17-19页 |
·几种常用启动子和诱导调控表达系统 | 第17-18页 |
·材料 | 第18页 |
·仪器 | 第18-19页 |
·操作步骤 | 第19页 |
·SDS-PAGE | 第19-22页 |
·材料及试剂配制 | 第19-22页 |
·蛋白表达条件的优化 | 第22页 |
·SDS-PAGE分析蛋白表达产物 | 第22-24页 |
·材料及试剂配制 | 第23-24页 |
·仪器 | 第24页 |
·操作步骤 | 第24页 |
·实验结果及讨论 | 第24-28页 |
·干扰素-α的表达 | 第24-25页 |
·蛋白表达条件优化 | 第25-27页 |
·SDS-PAGE分析蛋白表达产物 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-29页 |
第三章 粗提干扰素 | 第29-39页 |
·包涵体的溶解复性 | 第29-31页 |
·材料及试剂配制 | 第30页 |
·实验操作 | 第30-31页 |
·阳离子交换层析 | 第31-33页 |
·材料试剂及主要仪器 | 第32页 |
·操作步骤 | 第32-33页 |
·蛋白复性条件优化 | 第33页 |
·蛋白质含量测定 | 第33-35页 |
·材料试剂及主要仪器 | 第34页 |
·操作步骤 | 第34-35页 |
·实验结果及讨论 | 第35-38页 |
·包涵体的溶解复性 | 第35页 |
·阳离子交换层析 | 第35-37页 |
·蛋白复性条件优化 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第四章 疏水相互作用层析 | 第39-52页 |
·疏水层析作用原理 | 第39-40页 |
·疏水层析作用影响因素 | 第40-41页 |
·疏水层析方法 | 第41-42页 |
·材料试剂及主要仪器 | 第41页 |
·操作步骤 | 第41-42页 |
·疏水层析介质选择 | 第42页 |
·硫酸铵浓度优化 | 第42页 |
·分离度的优化 | 第42页 |
·实验结果及讨论 | 第42-51页 |
·疏水层析介质选择 | 第42-44页 |
·硫酸铵浓度优化 | 第44-46页 |
·分离度的优化 | 第46-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
第五章 蛋白活性测定 | 第52-56页 |
·材料与试剂配置 | 第52-53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·悬浮培养的细胞传代 | 第53页 |
·悬浮细胞的冻存 | 第53页 |
·悬浮细胞解冻与复苏 | 第53-54页 |
·活细胞计数 | 第54页 |
·细胞活性实验操作步骤 | 第54-55页 |
·实验结果及讨论 | 第55页 |
·小结 | 第55-56页 |
第六章 总结及展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
发表论文和科研情况说明 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |