| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-27页 |
| ·家蚕基因组的研究进展 | 第13页 |
| ·家蚕后基因组(Post-genomics)研究 | 第13-17页 |
| ·cDNA微阵列与基因芯片法 | 第14页 |
| ·表达序列标签(EST) | 第14-15页 |
| ·蛋白质组学(Proteomics) | 第15页 |
| ·反向遗传学(Reverse genetics) | 第15-16页 |
| ·转基因技术 | 第16-17页 |
| ·基因陷阱(Gene trap)在基因功能研究中的作用 | 第17-25页 |
| ·增强子陷阱 | 第17-21页 |
| ·启动子陷阱 | 第21页 |
| ·基因陷阱 | 第21-22页 |
| ·蛋白N端捕获陷阱 | 第22-24页 |
| ·快速高通量的实现 | 第24-25页 |
| ·IRES元件的作用 | 第25-27页 |
| 第2章 转座子臂长与转基因效率的关系 | 第27-37页 |
| ·引言 | 第27-28页 |
| ·研究目的 | 第28页 |
| ·研究内容 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-31页 |
| ·生物材料 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·构建质粒 | 第29-30页 |
| ·细胞转染和筛选的GFP阳性细胞 | 第30-31页 |
| ·显微注射和转基因蚕的筛选 | 第31页 |
| ·结论 | 第31-35页 |
| ·转座酶质粒对于绿色荧光蛋白表达率的剂量效应 | 第31-32页 |
| ·不同ID序列长度对转座子效率的影响 | 第32-33页 |
| ·家蚕转基因 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第3章 家蚕hsp70启动子和IRES的克隆及功能研究 | 第37-57页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·研究目的 | 第38页 |
| ·研究内容 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-46页 |
| ·生物材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-56页 |
| ·构建了带有家蚕hsp70启动子的双荧光质粒和转基因载体质粒 | 第46-47页 |
| ·家蚕hsp70基因上游的HSE元件分析 | 第47-49页 |
| ·家蚕hsp70基因上游片段的热激活性分析 | 第49-50页 |
| ·家蚕hsp70基因上游片段的热激累积效应 | 第50-51页 |
| ·长度不同的上游片段之间的活性比较 | 第51-52页 |
| ·长度不同的家蚕hsp70上游片段之间的HSE元件比较 | 第52页 |
| ·家蚕转基因及在家蚕个体中hsp70-305的热激活性 | 第52-54页 |
| ·IRES功能分析 | 第54-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第4章 启动子陷阱在家蚕基因功能研究应用中的技术探讨 | 第57-73页 |
| ·引言 | 第57-58页 |
| ·材料与方法 | 第58-61页 |
| ·家蚕品种、菌种和质粒 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58页 |
| ·RT-PCR | 第58页 |
| ·Realtime-PCR | 第58-59页 |
| ·转基因载体pBHSP70PIG3×P3EGFP的构建 | 第59-60页 |
| ·转基因载体pBA3transposase3xP3EGFP的构建 | 第60页 |
| ·转基因载体pBIRESEGFP3xP3RFP的构建 | 第60页 |
| ·显微注射及阳性个体筛选 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-69页 |
| ·pBIRESEGFP3xP3RFP启动子陷阱载体的设计和转基因实验 | 第61-64页 |
| ·转基因载体pBhsp70transposase3xP3EGFP和pBA3transposase3xP3EGFP | 第64-66页 |
| ·pBhsp70transposase3xP3EGFP的杂交检测 | 第66-67页 |
| ·pBA3transposase3xP3EGFP的转基因实验和杂交检测 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-73页 |
| 第5章 piggyBac转座子插入位点特性的分析 | 第73-87页 |
| ·引言 | 第73-74页 |
| ·材料与方法 | 第74-77页 |
| ·生物材料 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74页 |
| ·家蚕DNA的抽提 | 第74-75页 |
| ·插入位点分析 | 第75-77页 |
| ·TA克隆 | 第77页 |
| ·数据来源与分析方法 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-83页 |
| ·插入位点的侧翼序列 | 第77-83页 |
| ·piggyBac转座元件在基因组的分布 | 第83页 |
| ·讨论 | 第83-87页 |
| 总结及问题 | 第87-88页 |
| 创新点 | 第88-89页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
