| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述和研究背景 | 第14-25页 |
| ·真菌遗传转化的主要方法 | 第15-16页 |
| ·真菌对DMIs类杀菌剂的抗性分子机制 | 第16-24页 |
| ·CYP51基因家族 | 第17-18页 |
| ·真菌对DMIs类杀菌剂的抗性分子机制研究 | 第18-19页 |
| ·转录因子对DMIs类杀菌剂抗性的影响 | 第19-20页 |
| ·ABC运输蛋白在DMIs杀菌剂抗性中的作用 | 第20-22页 |
| ·MFS运输蛋白在DMIs杀菌剂抗性中的作用 | 第22-24页 |
| ·本研究的目的意义和主要研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 根癌农杆菌介导的柑橘绿霉菌遗传转化 | 第25-39页 |
| ·前言 | 第25-26页 |
| ·材料与方法 | 第26-32页 |
| ·实验菌株、质粒、药剂与培养条件 | 第26-27页 |
| ·基因组总DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·潮霉素B敏感性分析 | 第28页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化 | 第28-29页 |
| ·转化子的遗传稳定 | 第29-30页 |
| ·转化子分析 | 第30-31页 |
| ·外源T-DNA插入的随机性分析 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-38页 |
| ·柑橘绿霉菌对潮霉素B的敏感性分析 | 第32-33页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化 | 第33-35页 |
| ·转化子分析 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 一种新的抑霉唑抗性类型发现及其抗性分子机制 | 第39-59页 |
| ·前言 | 第39-42页 |
| ·材料与方法 | 第42-46页 |
| ·菌株来源和引物序列 | 第42页 |
| ·真菌基因组DNA与RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·真菌反转录反应 | 第43页 |
| ·柑橘绿霉菌菌株对抑霉唑的敏感性测定 | 第43-44页 |
| ·PdCYP51基因及其上游序列的克隆 | 第44页 |
| ·构建柑橘绿霉菌菌株EST数据库 | 第44页 |
| ·PdCYP51B和PdCYP51C基因的克隆 | 第44-45页 |
| ·Real-Time RT-PCR分析PdCYP51基因的表达 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-56页 |
| ·柑橘绿霉菌对抑霉唑的抗性水平 | 第46页 |
| ·抑霉唑抗性和PdCYP51基因及其上游启动子区突变的关系 | 第46-51页 |
| ·PdCYP51B和PdCYP51C基因的克隆 | 第51页 |
| ·PdCYP51、PdCYP51B和PdCYP51C基因同源性比较 | 第51-54页 |
| ·抑霉唑抗性与三个PdCYP51基因表达的相关性分析 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 柑橘绿霉菌促扩散超家族基因PdMfs1的功能研究 | 第59-93页 |
| ·前言 | 第59-61页 |
| ·材料与方法 | 第61-72页 |
| ·真菌菌株、培养条件和实验药品 | 第61-62页 |
| ·真菌基因组DNA与RNA的提取 | 第62页 |
| ·真菌反转录反应 | 第62页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第62-63页 |
| ·PdMfs1基因的克隆 | 第63-64页 |
| ·PdMfs1基因的异源表达 | 第64-66页 |
| ·Real-Time RT-PCR分析PdMfs1基因的表达 | 第66-67页 |
| ·PdMfs1基因敲除质粒的构建 | 第67-68页 |
| ·PdMfs1基因过表达与互补质粒的构建 | 第68-70页 |
| ·柑橘绿霉菌的转化以及转化子的分析 | 第70-71页 |
| ·生长速率分析 | 第71页 |
| ·杀菌剂敏感性分析 | 第71-72页 |
| ·致病性分析 | 第72页 |
| ·产酸量分析 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-89页 |
| ·PdMfs1基因克隆 | 第72-78页 |
| ·PdMfs1基因在酿酒酵母中异源表达与酵母转化子的DMIs类杀菌剂敏感性分析 | 第78-80页 |
| ·PdMfs1基因在抑霉唑抗性水平不同菌株中的表达分析 | 第80-81页 |
| ·DMIs类杀菌剂等毒性化合物对PdMfs1基因的表达影响分析 | 第81-83页 |
| ·PdMfs1基因敲除、过表达、互补突变体的分析 | 第83-85页 |
| ·柑橘绿霉菌突变体生长速率分析 | 第85页 |
| ·柑橘绿霉菌突变体的DMIs类杀菌剂敏感性分析 | 第85-88页 |
| ·致病性分析 | 第88页 |
| ·产酸量分析 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-93页 |
| 第五章 全文总结和有待研究问题 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-103页 |
