致谢 | 第1-11页 |
表格索引 | 第11-12页 |
图片索引 | 第12-14页 |
缩略语表 | 第14-15页 |
摘要 | 第15-17页 |
Abstract | 第17-19页 |
第一章 引言 | 第19-33页 |
·虫害的生物防治 | 第19-21页 |
·利用其他动物治虫 | 第20页 |
·利用昆虫激素治虫 | 第20页 |
·以病原微生物治虫 | 第20-21页 |
·NPV病毒制剂的研究进展 | 第21-22页 |
·整合外源基因的重组NPV病毒 | 第21-22页 |
·改造内源基因的重组NPV病毒 | 第22页 |
·RNAi技术的研究进展 | 第22-25页 |
·RNAi的作用机制 | 第22-23页 |
·RNAi技术的应用 | 第23-25页 |
·RNAi技术在抗人体病毒研究中的应用 | 第23-24页 |
·RNAi技术在肿瘤治疗研究中的应用 | 第24页 |
·RNAi技术在植物研究中的应用 | 第24页 |
·RNAi技术在昆虫研究中的应用 | 第24-25页 |
·昆虫几丁质合成酶的研究进展 | 第25-31页 |
·几丁质合成酶组织和细胞定位及主要特性 | 第27-28页 |
·几丁质合成酶组织和细胞定位 | 第27页 |
·昆虫几丁质合成酶主要特性 | 第27-28页 |
·几丁质合成酶基因克隆研究 | 第28页 |
·几丁质合成酶基因表达研究进展 | 第28-31页 |
·几丁质合成酶基因组织特异性表达 | 第28-29页 |
·几丁质合成酶基因发育阶段特异性表达 | 第29-30页 |
·几丁质合成酶的调节 | 第30-31页 |
·本研究背景及主要研究内容 | 第31-33页 |
第二章 茶尺蠖几丁质合成酶CS基因的克隆 | 第33-53页 |
·材料与方法 | 第33-38页 |
·茶尺蠖 | 第33页 |
·试剂 | 第33页 |
·总RNA提取 | 第33-34页 |
·茶尺蠖CS基因中间片断克隆 | 第34页 |
·反转录合成一链cDNA | 第34页 |
·PCR克隆CS基因中间片断 | 第34页 |
·RACE反应 | 第34-36页 |
·3'RACE | 第35页 |
·5'RACE | 第35-36页 |
·目标基因片断克隆及测序 | 第36-38页 |
·目标产物纯化 | 第36-37页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第37页 |
·目标片段插入T载体 | 第37页 |
·阳性克隆验证 | 第37页 |
·序列拼接 | 第37-38页 |
·CS基因表达分析 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-53页 |
·茶尺蠖CS基因的克隆 | 第38-50页 |
·CS1全基因序列 | 第39-49页 |
·茶尺蠖CS2部分基因序列克隆 | 第49-50页 |
·茶尺蠖CS基因的表达分析 | 第50-53页 |
第三章 包含CS基因双链干涉序列的重组病毒构建 | 第53-72页 |
·材料与方法 | 第53-58页 |
·实验材料及试剂 | 第53页 |
·双链干涉中间载体构建 | 第53-55页 |
·pMD18-T-CS~(1+/2+)质粒提取 | 第54页 |
·CS基因片段正向插入pFGC5941中间载体 | 第54-55页 |
·CS基因片段反向插入pFGC5941-CS | 第55页 |
·中间载体酶切和测序验证 | 第55页 |
·双链干涉穿梭载体构建 | 第55-56页 |
·外源CS双链干涉序列转化野生NPV DNA | 第56页 |
·重组病毒DNA转染sf9细胞 | 第56-58页 |
·sf9细胞株培养 | 第56-57页 |
·重组病毒DNA转染sf9细胞 | 第57页 |
·重组病毒收集和验证 | 第57-58页 |
·重组二代病毒的扩增 | 第58页 |
·重组病毒对sf9细胞CS基因表达的影响 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-72页 |
·CS双链干涉载体构建 | 第58-64页 |
·CS链干涉序列转化野生病毒 | 第64-69页 |
·重组病毒繁殖和酶切验证 | 第69-70页 |
·重组病毒对sf9细胞CS基因表达的影响 | 第70-72页 |
第四章 重组病毒毒力评价 | 第72-89页 |
·材料和方法 | 第72-73页 |
·茶尺蠖、蚕和石榴尺蠖 | 第72页 |
·注射病毒对茶尺蠖生长等的影响 | 第72页 |
·饲喂病毒对茶尺蠖生长等的影响 | 第72页 |
·重组病毒安全性评价 | 第72-73页 |
·注射病毒对蚕生长发育的影响 | 第72-73页 |
·饲喂病毒对蚕生长发育的影响 | 第73页 |
·饲喂病毒对石榴尺蠖生长发育的影响 | 第73页 |
·结果与分析 | 第73-89页 |
·注射病毒对茶尺蠖生长等的影响 | 第73-79页 |
·饲喂病毒对茶尺蠖生长等的影响 | 第79-83页 |
·重组病毒的杀虫范围分析 | 第83-89页 |
·注射病毒对蚕生长发育的影响 | 第83-85页 |
·饲喂病毒对蚕生长发育的影响 | 第85-87页 |
·重组病毒对石榴尺蠖生长的影响 | 第87-89页 |
第五章 茶尺蠖部分生理功能基因克隆 | 第89-103页 |
·材料与方法 | 第89页 |
·茶尺蠖 | 第89页 |
·试剂 | 第89页 |
·茶尺蠖部分生理功能基因的克隆 | 第89页 |
·结果与分析 | 第89-103页 |
·茶尺蠖神经突触小泡蛋白基因svp克隆 | 第89-91页 |
·茶尺蠖卵黄蛋白原基因vtg克隆 | 第91-93页 |
·茶尺蠖基质金属蛋白酶基因片段克隆 | 第93-94页 |
·茶尺蠖转座子tpa和反转录转座子rtp基因片段克隆 | 第94-97页 |
·茶尺蠖乙醛脱氢酶基因adh片段克隆 | 第97-98页 |
·茶尺蠖雷帕霉素靶蛋白tor基因 | 第98-100页 |
·茶尺蠖自身抗原基因aag、18s RNA和28sRNA | 第100-103页 |
第六章 结论与展望 | 第103-107页 |
·结论 | 第103-105页 |
·展望和今后的研究方向 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-115页 |