致谢 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
第一章 肾形线虫研究进展 | 第16-33页 |
1 肾状属分类学地位 | 第16-17页 |
2 肾形线虫的形态学特征 | 第17页 |
3 肾状属分类研究概况 | 第17-25页 |
·肾状属分类发展简史 | 第17-18页 |
·肾形线虫形态学分类鉴定方法 | 第18-25页 |
4 分布和寄主 | 第25-26页 |
·分布 | 第25-26页 |
·寄主范围 | 第26页 |
5 肾形线虫生活史 | 第26-28页 |
6 危害 | 第28页 |
7 传播方式 | 第28-30页 |
8 肾形线虫的防治 | 第30页 |
9 线虫的分子鉴定及分类方法概述 | 第30-31页 |
10 我国肾形线虫研究现状 | 第31-33页 |
第二章 肾形肾状线虫形态学鉴定研究 | 第33-64页 |
1 材料 | 第33-35页 |
·供试线虫 | 第33-35页 |
·试剂与仪器 | 第35页 |
2 方法 | 第35-37页 |
·线虫的分离 | 第35页 |
·线虫的杀死、固定及制片 | 第35-37页 |
·线虫临时玻片的制作 | 第35页 |
·线虫永久玻片的制作 | 第35-36页 |
·电镜样品的制作 | 第36-37页 |
·形态学观察及主要形态测量值 | 第37页 |
3 研究结果 | 第37-61页 |
·肾形肾状线虫形态学特征 | 第37-38页 |
·形态测量值 | 第38-60页 |
·扫描电镜观察 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-64页 |
第三章 肾形肾状线虫分子特性研究 | 第64-88页 |
第一节 肾形肾状线虫不同地理群体ITS区差异性研究 | 第64-81页 |
1 材料与方法 | 第64-69页 |
·材料 | 第64-65页 |
·供试线虫群体 | 第64页 |
·试剂及仪器 | 第64-65页 |
·方法 | 第65-69页 |
·线虫DNA的提取 | 第65页 |
·PCR扩增 | 第65页 |
·ITS区引物及扩增程序 | 第65-66页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第66页 |
·PCR产物纯化 | 第66页 |
·PCR纯化产物酶切 | 第66-67页 |
·DNA克隆 | 第67页 |
·大肠杆菌DH 5α感受态细胞的制备(CaCl_2) | 第67页 |
·转化 | 第67-68页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第68页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第68页 |
·DNA序列测定与分析 | 第68-69页 |
2 结果 | 第69-80页 |
·肾形肾状线虫ITS区PCR扩增 | 第69-70页 |
·ITS PCR-RFLP分析 | 第70页 |
·各群体PCR扩增产物的序列比较及同源性分析 | 第70-80页 |
3 讨论 | 第80-81页 |
第二节 肾形肾状线虫28S RNA基因中D2D3区特性 | 第81-88页 |
1 材料和方法 | 第81-83页 |
·材料 | 第81页 |
·虫源 | 第81页 |
·试剂与仪器 | 第81页 |
·方法 | 第81-83页 |
·线虫DNA的提取 | 第81页 |
·D2D3区引物及扩增程序 | 第81-82页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第82页 |
·PCR产物的纯化 | 第82页 |
·DNA克隆 | 第82页 |
·大肠杆菌DH 5α感受态细胞的制备(CaCl_2) | 第82页 |
·转化 | 第82页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第82页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第82页 |
·DNA序列测定与分析 | 第82-83页 |
2 结果 | 第83-84页 |
·28S RNA基因中D2D3区PCR扩增结果 | 第83-84页 |
·28S RNA基因中D2D3区序列分析 | 第84页 |
3 讨论 | 第84-88页 |
第四章 肾形肾状线虫生物学特性研究 | 第88-107页 |
第一节 肾形肾状线虫生活史及繁殖力的研究 | 第88-94页 |
1 材料和方法 | 第88-90页 |
·标本采集和肾形肾状线虫二龄幼虫的获得 | 第88页 |
·大豆的种植 | 第88-89页 |
·催芽 | 第88页 |
·播种 | 第88-89页 |
·线虫接种 | 第89页 |
·取样和线虫的分离及染色 | 第89-90页 |
·取样和线虫的分离 | 第89页 |
·次氯酸钠-酸性品红染色方法 | 第89-90页 |
·数据分析 | 第90页 |
2 结果与分析 | 第90-92页 |
·肾形肾状线虫的生活史 | 第90-91页 |
·不同肾形肾状线虫接种密度下80d后的繁殖状况 | 第91页 |
·肾形肾状线虫的危害 | 第91-92页 |
3 讨论 | 第92-94页 |
第二节 肾形肾状线虫对三种不同作物致病性研究 | 第94-107页 |
1 材料和方法 | 第94-95页 |
·种植材料 | 第94页 |
·育苗 | 第94页 |
·种子处理 | 第94页 |
·播种 | 第94页 |
·供试肾形肾状线虫 | 第94-95页 |
·肾形肾状线虫的分离 | 第94页 |
·肾形肾状线虫悬浮液的制备 | 第94-95页 |
·线虫接种 | 第95页 |
·结果调查 | 第95页 |
·次氯酸钠-酸性品红染色方法 | 第95页 |
·土壤及大豆根中肾形肾状线虫的分离、染色及统计 | 第95页 |
·植株受害计测 | 第95页 |
·数据分析 | 第95页 |
2 结果 | 第95-104页 |
·烟草受害状况 | 第95-98页 |
·番茄受害状况 | 第98-101页 |
·黄瓜受害状 | 第101-104页 |
3 讨论 | 第104-107页 |
参考文献 | 第107-114页 |
附录A:常用试剂与仪器 | 第114-115页 |
常用试剂 | 第114页 |
常用仪器 | 第114-115页 |
附录B:常用试剂与缓冲液的配制 | 第115-118页 |
1 常用试剂配制 | 第115-116页 |
2 常用缓冲液配制 | 第116-118页 |