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桑细菌性枯萎病病原的定名、分子检测及肠杆菌基因水平转移的研究

致谢第1-12页
摘要第12-14页
ABSTRACT第14-16页
1 文献综述第16-41页
   ·已报道的一些桑树细菌病害第16-18页
     ·国内已报道的桑树细菌病害第16-18页
       ·桑青枯病(Mulberry Bacterial Wilt)第16-17页
       ·桑疫病(Mulberry Bacterial Blight)第17页
       ·桑树植原体病害(Mulberry Mycoplasmas Disease)第17-18页
     ·国外已报道的几种桑细菌病害第18页
   ·肠杆菌属的分类第18-24页
     ·与动物相关的肠杆菌第19-21页
       ·产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)第19页
       ·河生肠杆菌(Enterobacter amnigenus)第19页
       ·阴沟肠杆菌阴沟亚种(Enterobacter cloacae subsp.cloacae)第19页
       ·日沟维肠杆菌(Enterobacter gergoviae)第19-20页
       ·霍米奇肠杆菌(Enterobacter hormaechei)第20页
       ·神户肠杆菌(Enterobacter kobei)第20页
       ·坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)第20页
       ·泰洛肠杆菌(Enterobacter taylorae)第20-21页
     ·与植物相关的肠杆菌第21-23页
       ·成团肠杆菌(Enterobacter agglomerans)第21页
       ·阿式肠杆菌(Enterobacter asburiae)第21页
       ·生癌肠杆菌(Enterobacter cancerogenus)第21页
       ·阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)第21-22页
       ·阴沟肠杆菌溶解亚种(Enterobacter cloacae subsp.dissolvens)第22页
       ·溶解肠杆菌(Enterobacter dissolvens)第22页
       ·中间肠杆菌(Enterobacter intermedius)第22页
       ·Enterobacter ludwigii第22-23页
       ·超压肠杆菌(Enterobacter nimipressuralis)第23页
       ·水稻肠杆菌(Enterobacter oryzae)第23页
       ·梨形肠杆菌(Enterobacter pyrinus)第23页
       ·Enterobacter radicincitans第23页
     ·与环境相关的肠杆菌第23-24页
       ·Enterobacter cowanii第23页
       ·瑞典肠杆菌(Enterobacter helveticus)第23-24页
       ·粉尘肠杆菌(Enterobacter pulveris)第24页
       ·苏黎世肠杆菌(Enterobacter turicensis)第24页
   ·确定肠杆菌常用的一些手段第24-28页
     ·形态和生长条件的测定第24页
     ·生理生化等指标的测定第24-25页
     ·系统发育树分类特征测定第25页
     ·DNA-DNA同源性测定第25-27页
     ·致病性第27-28页
   ·植物病原细菌及其肠杆菌的主要检测方法研究第28-31页
     ·产地检疫检测第28页
     ·分离检测第28页
     ·选择性培养基检测第28页
     ·致病性的测定第28-29页
     ·PCR技术在植物病原细菌的分子生物学检测的应用第29-31页
       ·特异性基因用来检测和鉴定病原菌第29-30页
       ·保守基因用来检测和鉴定病原菌第30页
       ·质粒基因在检测中的应用第30-31页
     ·分子检测在肠杆菌中的应用第31页
   ·细菌水平转移(HORIZONTAL GENE TRANSFER,HGT)的研究第31-39页
     ·水平转移的机制第32-35页
       ·自然转化第32-34页
       ·转导第34-35页
       ·接合第35页
     ·可动遗传因子(MGEs)在农业环境中的细菌种群的分布第35-36页
       ·MGEs在土壤及植物相关细菌中的流行第35-36页
       ·影响土壤中水平转移的因素第36页
     ·MGEs增加了土壤及植物互生细菌的多样性第36-37页
     ·水平转移检测的一些手段及方法第37-39页
       ·序列组成分析法第37-38页
       ·基因有无矩阵法第38页
       ·系统发育树构建法第38-39页
   ·本研究的背景及研究内容与目的第39-41页
     ·研究的背景第39-40页
     ·研究的内容与目的第40-41页
2 桑树细菌性枯萎病病原的鉴定与命名第41-61页
   ·材料与方法第42-45页
     ·标准菌株第42页
     ·病原细菌的分离第42页
     ·病原的常规细菌学及过敏性反应与致病性测定第42-43页
     ·病原细菌的电镜观察第43页
     ·病原的Biolog鉴定第43页
     ·病原的脂肪酸(FAME)鉴定第43页
     ·ERIC-PCR鉴定第43-44页
     ·病原的16S rRNA及rpoB序列的鉴定及系统发育分析第44页
     ·DNA-DNA同源性分析第44-45页
   ·结果与分析第45-58页
     ·病原细菌的细胞形态与菌落培养性状第45-46页
     ·病原细菌的过敏性反应及致病性第46-47页
     ·病原细菌Biolog鉴定结果第47-48页
     ·病原细菌的FAMEs鉴定结果第48-49页
     ·病原细菌的ERIC-PCR分析第49页
     ·生理生化反应及碳源利用第49-53页
     ·病原菌的16SrRNA序列及rpoB序列的比较分析及系统发育分析第53页
     ·DNA-DNA同源性的测定第53-57页
     ·对Enterobacter morus的描述第57-58页
   ·讨论第58-59页
   ·本章小结第59-61页
3 桑树细菌性枯萎病病菌的检测第61-73页
   ·材料与方法第61-67页
     ·菌株的来源第61-62页
     ·桑枯萎病样本采集第62页
     ·DNA的提取及纯化第62页
     ·桑树采集样本直接PCR的模板制备第62页
     ·菌悬液的制备第62页
     ·测序及引物的设计第62-66页
     ·PCR及RT-PCR检测桑枯萎病菌E.morus的参数设定第66页
     ·桑枯萎菌PCR检测的灵敏性测定第66-67页
   ·结果第67-71页
     ·PCR反应的特异性第67页
     ·PCR反应的灵敏度第67页
     ·PCR反应结果的验证第67-71页
   ·讨论第71-72页
   ·本章小结第72-73页
4 肠杆菌科细菌水平转移的研究第73-100页
   ·材料与方法第74-78页
     ·序列的获得第74-75页
     ·同源基因的获得第75页
     ·物种树的构建第75-76页
     ·基因获得与丢失的最大似然法检验第76-77页
     ·水平转移所获得基因的来源分析第77页
     ·水平转移所获得基因的功能分类第77页
     ·正向选择的分析第77-78页
   ·结果与讨论第78-99页
     ·系统发育树的构建第78-79页
     ·基因分布类型情况第79-81页
     ·水平转移获得基因的功能分类第81-85页
     ·核心基因(core genome)和泛基因(pan genome)的计算第85-88页
     ·基因获得与丢失在肠杆菌科细菌进化历史中的重建第88-91页
     ·正向选择的结果第91-92页
     ·水平转移所获得的基因的来源分析第92-99页
   ·本章小结第99-100页
5. 结论与展望第100-102页
   ·结论第100-101页
   ·展望第101-102页
参考文献第102-110页
附录-1 梨火疫病病原菌(Erwinia amylovora)Ⅲ型分泌系统的鉴定及Erwinia spp.HrpA的分析第110-119页
附录-2 培养基和试剂配方第119-120页
附录-3 图片与表格第120-123页
博士期间申报的专利和发表研究论文第123页

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