| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 引言 | 第15-39页 |
| 1.1 配体门控离子通道(Ligand-gated ion channel) | 第15-16页 |
| 1.2 Cys loop受体家族 | 第16-20页 |
| 1.3 GABA_A受体 | 第20-33页 |
| 1.3.1 GABA | 第20-21页 |
| 1.3.2 GABA_A受体 | 第21页 |
| 1.3.3 GABA_A受体的基因组成 | 第21-22页 |
| 1.3.4 GABA_A受体的结构 | 第22-23页 |
| 1.3.5 GABA_A受体的亚型 | 第23-24页 |
| 1.3.6 GABA_A受体的分布与定位 | 第24-26页 |
| 1.3.7 GABA_A受体的底物与调节 | 第26-29页 |
| 1.3.8 GABA_A受体的其他配体 | 第29-32页 |
| 1.3.9 GABA_A受体的功能 | 第32-33页 |
| 1.4 单颗粒冷冻电镜技术 | 第33-38页 |
| 1.4.1 冷冻样品制备 | 第35-36页 |
| 1.4.2 透射电子显微镜及图像收集 | 第36页 |
| 1.4.3 图像数据处理和三维结构重构 | 第36-38页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第38-39页 |
| 2 实验材料与方法 | 第39-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-42页 |
| 2.1.1 基因及载体 | 第39页 |
| 2.1.2 菌株、细胞系 | 第39页 |
| 2.1.3 试剂与耗材 | 第39-40页 |
| 2.1.4 仪器与工具 | 第40-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-61页 |
| 2.2.1 载体的构建 | 第42-48页 |
| 2.2.2 杆状病毒的制备 | 第48-51页 |
| 2.2.3 蛋白质表达与纯化 | 第51-57页 |
| 2.2.4 冷冻样品的制备 | 第57-59页 |
| 2.2.5 冷冻样品数据收集 | 第59页 |
| 2.2.6 冷冻电镜数据处理 | 第59-60页 |
| 2.2.7 原子模型搭建 | 第60-61页 |
| 3 实验结论与分析 | 第61-89页 |
| 3.1 表达条件及组合的筛选 | 第61-62页 |
| 3.1.1 表达条件的优化 | 第61页 |
| 3.1.2 亚基组合的筛选 | 第61-62页 |
| 3.2 蛋白的表达与纯化 | 第62-65页 |
| 3.2.1 Nb25的表达与纯化 | 第62-63页 |
| 3.2.2 α5β3 GABA_A受体异源五聚体的纯化 | 第63-65页 |
| 3.3 冷冻样品的制备 | 第65-69页 |
| 3.3.1 负染检查 | 第65-66页 |
| 3.3.2 冷冻样品的检查 | 第66-69页 |
| 3.4 冷冻电镜数据处理 | 第69-73页 |
| 3.4.1 200 kV数据处理 | 第69-70页 |
| 3.4.2 300 kV数据处理 | 第70-73页 |
| 3.5 α5β3 GABA_A受体的结构分析 | 第73-89页 |
| 3.5.1 α5β3 GABA_A受体的整体结构 | 第73-75页 |
| 3.5.2 N-糖基化修饰 | 第75-79页 |
| 3.5.3 神经递质结合位点 | 第79-81页 |
| 3.5.4 跨膜区结构域(TMD)的不对称性 | 第81-82页 |
| 3.5.5 离子孔道的形状与大小 | 第82-83页 |
| 3.5.6 胞外区结构域(ECD)的构象变化 | 第83-85页 |
| 3.5.7 跨膜螺旋结构域(TMD)的构象变化 | 第85-86页 |
| 3.5.8 疾病相关位点分析 | 第86-89页 |
| 4. 总结与展望 | 第89-92页 |
| 4.1 总结 | 第89-90页 |
| 4.2 展望 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-102页 |
| 作者简历及科研成果 | 第102页 |