| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 第一节 叶色突变体的鉴定 | 第14-15页 |
| 1 水稻叶色突变体的来源 | 第14-15页 |
| 2 水稻叶色突变体的分类 | 第15页 |
| 第二节 叶色突变体的分子机制研究 | 第15-27页 |
| 1 叶绿素生物合成相关基因的克隆和研究 | 第16-20页 |
| 2 叶绿素生物降解相关基因的克隆和研究 | 第20-21页 |
| 3 叶绿体发育及相关基因的克隆和研究 | 第21-25页 |
| 3.1 质体基因组 | 第21-22页 |
| 3.2 叶片发育过程和叶绿体发育过程 | 第22页 |
| 3.3 核基因对叶绿体发育过程的调控及相关基因的克隆和研究 | 第22-23页 |
| 3.4 质-核互作对叶绿体发育过程的调控及相关基因的克隆和研究 | 第23-24页 |
| 3.5 蛋白运输对叶绿体发育过程的调控及相关基因的克隆和研究 | 第24-25页 |
| 3.6 蛋白平衡对叶绿体发育过程的调控及相关基因的克隆和研究 | 第25页 |
| 4 其它导致叶色表型的相关基因的克隆和研究 | 第25-27页 |
| 第三节 叶色突变体的应用 | 第27-28页 |
| 1 叶色突变体应用于基础研究 | 第27页 |
| 1.1 作为植物生理研究材料 | 第27页 |
| 1.2 作为植物功能基因组研究材料 | 第27页 |
| 2 叶色突变体应用于生产实践 | 第27-28页 |
| 2.1 品种改良过程中的叶色突变体的应用 | 第27-28页 |
| 2.2 杂交育种过程中叶色突变体的应用 | 第28页 |
| 第四节 低温胁迫对植物的影响 | 第28-30页 |
| 1 低温对植物生长发育的影响 | 第28-29页 |
| 2 低温对植物生理生化过程的影响 | 第29页 |
| 3 低温对叶绿体发育的影响 | 第29-30页 |
| 第五节 PEP(Plastid-encoded RNA Polymerase)的研究进展 | 第30-33页 |
| 1 质体转录复合体的分离和纯化 | 第30页 |
| 2 RNA 转录复合体的组成 | 第30-32页 |
| 3 质体发育过程中转录复合体的检查点模型 | 第32页 |
| 4 RNA 转录复合体各成员之间的相互作用 | 第32-33页 |
| 第六节 本研究的目的和意义 | 第33-36页 |
| 第二章 低温白化致死突变体tsv的表型观察及精细定位 | 第36-48页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 1.1 实验材料与种植条件 | 第36-37页 |
| 1.2 叶绿素含量的测定 | 第37页 |
| 1.3 叶绿体透射电镜观察 | 第37页 |
| 1.4 tsv的遗传分析 | 第37页 |
| 1.5 TSV的基因定位 | 第37-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-45页 |
| 2.1 tsv突变体苗期表型观察 | 第39-41页 |
| 2.2 tsv突变体的温度敏感性检测 | 第41-42页 |
| 2.3 tsv突变体对低温十分敏感 | 第42页 |
| 2.4 tsv叶绿体的超微结构观察 | 第42-44页 |
| 2.5 不同温度下tsv突变体的光合能力测定 | 第44页 |
| 2.6 tsv突变体的遗传分析 | 第44-45页 |
| 2.7 TSV基因的精细定位定位 | 第45页 |
| 3 讨论和总结 | 第45-48页 |
| 第三章 TSV基因的克隆和转基因验证 | 第48-58页 |
| 1 材料与方法 | 第48-52页 |
| 1.1 实验材料与种植条件 | 第48页 |
| 1.2 RNA提取及反转录 | 第48-49页 |
| 1.3 Real-Time PCR分析 | 第49-50页 |
| 1.4 候选基因的扩增和测序 | 第50-51页 |
| 1.5 互补载体的构建 | 第51页 |
| 1.6 干扰载体的构建 | 第51页 |
| 1.7 水稻转基因转化和转基因植株的鉴定 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-56页 |
| 2.1 突变基因tsv的确定 | 第52-53页 |
| 2.2 TSV和ATSV蛋白的次级结构和三级结构比较 | 第53页 |
| 2.3 tsv的转基因互补 | 第53-55页 |
| 2.4 TSV基因的干扰验证 | 第55-56页 |
| 3 讨论和总结 | 第56-58页 |
| 第四章 TSV 的功能分析 | 第58-84页 |
| 1 材料与方法 | 第58-68页 |
| 1.1 实验材料与种植条件 | 第58-59页 |
| 1.2 RNA提取及反转录 | 第59-60页 |
| 1.3 Real-Time PCR分析 | 第60页 |
| 1.4 GUS活性的组织化学染色分析 | 第60-61页 |
| 1.5 水稻原生质体分离及亚细胞定位 | 第61-62页 |
| 1.6 烟草细胞中的亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 1.7 同源性分析 | 第63页 |
| 1.8 酵母双杂交实验 | 第63-64页 |
| 1.9 体外蛋白的原核表达 | 第64-65页 |
| 1.10 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第65-66页 |
| 1.11 Western-Blot分析 | 第66-67页 |
| 1.12 植物蛋白提取 | 第67页 |
| 1.13 Pull-down分析 | 第67-68页 |
| 1.14 荧光双分子互补(BiFC) | 第68页 |
| 1.15 叶绿体rRNA分析 | 第68页 |
| 1.16 过表达载体的构建 | 第68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-81页 |
| 2.1 TSV的组织表达模式 | 第68-70页 |
| 2.2 TSV的表达量受到光照和低温的诱导 | 第70-71页 |
| 2.3 TSV蛋白的亚细胞定位 | 第71-72页 |
| 2.4 TSV的同源性分析和进化树分析 | 第72-73页 |
| 2.5 叶绿素合成途径基因的表达量分析 | 第73-74页 |
| 2.6 PEP复合物活性分析 | 第74-76页 |
| 2.7 质体核糖体rRNA的分析 | 第76页 |
| 2.8 TSV与OsTrxZ的互作 | 第76-78页 |
| 2.9 TSV在低温下保护OsTrxZ的蛋白稳定性 | 第78-80页 |
| 2.10 过表达TSV基因可能会增强水稻秧苗对冷胁迫的耐受性 | 第80-81页 |
| 3 讨论和总结 | 第81-84页 |
| 第五章 全文总结和创新点 | 第84-88页 |
| 1 tsv是一个新的低温超敏感的转绿型突变体 | 第84-85页 |
| 2 TSV参与水稻叶绿素合成和叶绿体发育 | 第85页 |
| 3 TSV是一个在绿色组织中组成性表达的基因 | 第85-86页 |
| 4 TSV与OsTrxZ互作并保护OsTrxZ蛋白的稳定性 | 第86页 |
| 5 本研究的创新之处 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 附录 | 第98-112页 |
| 附图1 本研究中使用的部分载体 | 第98-101页 |
| 附录1 GUS染液配方 | 第101-102页 |
| 附录2 分离原生质体试剂配方 | 第102-104页 |
| 附录3 BiFC的操作方法 | 第104-105页 |
| 附录4 SDS-PAGE凝胶电泳工作液配方 | 第105-106页 |
| 附录5 引物索引表 | 第106-107页 |
| 附表2 定量分析引物 | 第107-108页 |
| 附表3 本研究中载体构建所用引物 | 第108-112页 |
| 在读期间发表的论文 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
