摘要 | 第3-6页 |
引言 | 第6-9页 |
1 IL-37 慢病毒表达载体的转化及慢病毒包装 | 第9-23页 |
1.1 材料 | 第9-10页 |
1.1.1 载体和菌株 | 第9页 |
1.1.2 主要试剂 | 第9页 |
1.1.3 主要仪器 | 第9-10页 |
1.1.4 主要培养基配置 | 第10页 |
1.2 方法 | 第10-18页 |
1.2.1 引物的设计与合成 | 第10-11页 |
1.2.2 制备感受态细胞 | 第11页 |
1.2.3 转化 | 第11-12页 |
1.2.4 菌落PCR鉴定 | 第12页 |
1.2.5 质粒小量提取 | 第12-13页 |
1.2.6 双酶切鉴定 | 第13页 |
1.2.7 无内毒素质粒的提取 | 第13-15页 |
1.2.8 细胞的复苏和培养 | 第15页 |
1.2.9 IL-37 慢病毒包装 | 第15-16页 |
1.2.10 慢病毒滴度测定 | 第16页 |
1.2.11 慢病毒活性检测 | 第16-18页 |
1.3 结果 | 第18-22页 |
1.3.1 IL-37 慢病毒表达载体的转化鉴定 | 第18-19页 |
1.3.2 慢病毒包装 | 第19-20页 |
1.3.3 慢病毒滴度测定 | 第20-21页 |
1.3.4 慢病毒表达检测 | 第21-22页 |
1.4 小结 | 第22-23页 |
2 IL-37 在香烟烟雾诱导小鼠肺部炎症中的作用 | 第23-37页 |
2.1 材料 | 第23-26页 |
2.1.1 实验动物 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂及溶液配置 | 第23-25页 |
2.1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-30页 |
2.2.1 动物模型的建立 | 第26页 |
2.2.2 小鼠组织标本的收集 | 第26-27页 |
2.2.3 BALF细胞计数 | 第27页 |
2.2.4 RT-PCR检测肺组织中细胞因子的表达情况 | 第27-28页 |
2.2.5 ELISA检测细胞因子的变化 | 第28页 |
2.2.6 检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的变化 | 第28页 |
2.2.7 HE染色 | 第28-29页 |
2.2.8 PAS染色 | 第29页 |
2.2.9 Western blot检测NF-κB p65的表达 | 第29-30页 |
2.2.10 统计学分析 | 第30页 |
2.3 结果 | 第30-36页 |
2.3.1 小鼠体重变化 | 第30页 |
2.3.2 细胞计数 | 第30-31页 |
2.3.3 RT-PCR检测肺组织中细胞因子的变化 | 第31-32页 |
2.3.4 BALF和肺组织细胞因子浓度的检测 | 第32-33页 |
2.3.5 检测肺组织和血清中MPO浓度变化情况 | 第33-34页 |
2.3.6 病理切片分析 | 第34-35页 |
2.3.7 Western blot检测NF-κB p65的表达 | 第35-36页 |
2.4 小结 | 第36-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-41页 |
附录A 综述 | 第41-52页 |
参考文献(References) | 第48-52页 |
在学研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
Abstract | 第54-55页 |