摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1. 前言 | 第10-20页 |
1.1 蔗糖转化酶 | 第10-12页 |
1.1.1 蔗糖转化酶INV的特征和分类 | 第10页 |
1.1.2 细胞壁转化酶CWI的作用及其调控 | 第10-12页 |
1.2 启动子的研究进展 | 第12-15页 |
1.2.1 启动子的结构和特点 | 第13页 |
1.2.2 启动子的分类 | 第13-15页 |
1.3 转录因子的研究进展 | 第15-17页 |
1.3.1 转录因子概述 | 第15页 |
1.3.2 AT-hook转录因子 | 第15-17页 |
1.4 酵母单杂交系统 | 第17-18页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
1.6 技术路线 | 第19-20页 |
2. 实验材料与方法 | 第20-38页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第20-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 质粒载体和菌株 | 第20页 |
2.1.3 主要药品试剂及培养基 | 第20-22页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第22页 |
2.1.5 引物和测序 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-38页 |
2.2.1 酵母单杂交筛选MeCWINV6基因启动子的转录因子 | 第23-31页 |
2.2.2 MeCWINV6启动子与MeAHL31相互作用的初步验证 | 第31-35页 |
2.2.3 MeAHL31基因的表达模式分析 | 第35-36页 |
2.2.4 木薯AT-hook基因家族的生物信息学分析 | 第36-38页 |
3. 结果与分析 | 第38-67页 |
3.1 木薯MeCWINV6基因启动子的互作转录因子的筛选 | 第38-43页 |
3.1.1 酵母单杂交诱饵载体pAbAi-pCW6的构建 | 第38-39页 |
3.1.2 诱饵酵母菌株的鉴定 | 第39页 |
3.1.3 抑制Y1HGold [pAbAi-pCW6]生长的最低抗生素AbA浓度 | 第39-40页 |
3.1.4 酵母单杂交cDNA文库的构建 | 第40-41页 |
3.1.5 酵母单杂交cDNA文库筛选及库容量计算 | 第41-42页 |
3.1.6 分离纯化和鉴定分析阳性文库质粒 | 第42-43页 |
3.1.7 测序结果的BLAST同源性比对分析 | 第43页 |
3.2 MeCWINV6启动子与MeAHL31相互作用的初步验证 | 第43-47页 |
3.2.1 木薯MeCWINV6启动子的生物信息学分析 | 第43-44页 |
3.2.2 木薯MeAHL31的克隆 | 第44-45页 |
3.2.3 双荧光素酶表达载体的构建 | 第45-46页 |
3.2.4 双荧光素酶活性的测定 | 第46-47页 |
3.3 MeAHL31基因响应逆境胁迫的表达模式分析 | 第47-49页 |
3.3.1 木薯总RNA的提取 | 第47-48页 |
3.3.2 MeAHL31基因实时荧光定量PCR结果 | 第48-49页 |
3.4 木薯AT-hook基因家族的生物信息学分析 | 第49-67页 |
3.4.1 木薯AT-hook基因家族成员、及其保守结构域和基因结构的分析 | 第50-56页 |
3.4.2 木薯AT-hook基因在染色体上的定位 | 第56页 |
3.4.3 木薯AT-hook家族基因系统进化分析 | 第56-58页 |
3.4.4 木薯AHL家族蛋白的保守基序分析 | 第58-62页 |
3.4.5 AT-hook基因家族在两种木薯品种块根中的表达模式分析 | 第62-67页 |
4. 讨论 | 第67-72页 |
4.1 酵母单杂交初步筛选与木薯MeCWINV6基因启动子结合的转录调控因子 | 第67页 |
4.2 MeCWINV6启动子与MeAHL31相互作用的初步验证 | 第67-68页 |
4.3 MeAHL31基因表达对逆境胁迫的响应 | 第68-69页 |
4.4 木薯AT-hook基因家族的生物信息学分析结果 | 第69-72页 |
5. 结论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-83页 |
附录 | 第83页 |
个人简历 | 第83-84页 |
硕士在读期间撰写及发表的论文 | 第84-85页 |
致谢 | 第85页 |