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木薯中与MeCWINV6基因启动子互作的转录因子筛选及生物信息学分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1. 前言第10-20页
    1.1 蔗糖转化酶第10-12页
        1.1.1 蔗糖转化酶INV的特征和分类第10页
        1.1.2 细胞壁转化酶CWI的作用及其调控第10-12页
    1.2 启动子的研究进展第12-15页
        1.2.1 启动子的结构和特点第13页
        1.2.2 启动子的分类第13-15页
    1.3 转录因子的研究进展第15-17页
        1.3.1 转录因子概述第15页
        1.3.2 AT-hook转录因子第15-17页
    1.4 酵母单杂交系统第17-18页
    1.5 本研究的目的和意义第18-19页
    1.6 技术路线第19-20页
2. 实验材料与方法第20-38页
    2.1 实验材料与试剂第20-23页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 质粒载体和菌株第20页
        2.1.3 主要药品试剂及培养基第20-22页
        2.1.4 主要仪器设备第22页
        2.1.5 引物和测序第22-23页
    2.2 实验方法第23-38页
        2.2.1 酵母单杂交筛选MeCWINV6基因启动子的转录因子第23-31页
        2.2.2 MeCWINV6启动子与MeAHL31相互作用的初步验证第31-35页
        2.2.3 MeAHL31基因的表达模式分析第35-36页
        2.2.4 木薯AT-hook基因家族的生物信息学分析第36-38页
3. 结果与分析第38-67页
    3.1 木薯MeCWINV6基因启动子的互作转录因子的筛选第38-43页
        3.1.1 酵母单杂交诱饵载体pAbAi-pCW6的构建第38-39页
        3.1.2 诱饵酵母菌株的鉴定第39页
        3.1.3 抑制Y1HGold [pAbAi-pCW6]生长的最低抗生素AbA浓度第39-40页
        3.1.4 酵母单杂交cDNA文库的构建第40-41页
        3.1.5 酵母单杂交cDNA文库筛选及库容量计算第41-42页
        3.1.6 分离纯化和鉴定分析阳性文库质粒第42-43页
        3.1.7 测序结果的BLAST同源性比对分析第43页
    3.2 MeCWINV6启动子与MeAHL31相互作用的初步验证第43-47页
        3.2.1 木薯MeCWINV6启动子的生物信息学分析第43-44页
        3.2.2 木薯MeAHL31的克隆第44-45页
        3.2.3 双荧光素酶表达载体的构建第45-46页
        3.2.4 双荧光素酶活性的测定第46-47页
    3.3 MeAHL31基因响应逆境胁迫的表达模式分析第47-49页
        3.3.1 木薯总RNA的提取第47-48页
        3.3.2 MeAHL31基因实时荧光定量PCR结果第48-49页
    3.4 木薯AT-hook基因家族的生物信息学分析第49-67页
        3.4.1 木薯AT-hook基因家族成员、及其保守结构域和基因结构的分析第50-56页
        3.4.2 木薯AT-hook基因在染色体上的定位第56页
        3.4.3 木薯AT-hook家族基因系统进化分析第56-58页
        3.4.4 木薯AHL家族蛋白的保守基序分析第58-62页
        3.4.5 AT-hook基因家族在两种木薯品种块根中的表达模式分析第62-67页
4. 讨论第67-72页
    4.1 酵母单杂交初步筛选与木薯MeCWINV6基因启动子结合的转录调控因子第67页
    4.2 MeCWINV6启动子与MeAHL31相互作用的初步验证第67-68页
    4.3 MeAHL31基因表达对逆境胁迫的响应第68-69页
    4.4 木薯AT-hook基因家族的生物信息学分析结果第69-72页
5. 结论第72-74页
参考文献第74-83页
附录第83页
个人简历第83-84页
硕士在读期间撰写及发表的论文第84-85页
致谢第85页

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