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伤寒沙门菌小RNA SbfR相关功能研究

摘要第5-8页
abstract第8-10页
英文缩写索引第13-14页
1 绪论第14-20页
    1.1 伤寒沙门菌简介第14-15页
    1.2 细菌的生物膜第15-16页
    1.3 细菌的鞭毛第16-17页
    1.4 细菌中的小RNA第17-18页
    1.5 伤寒沙门菌sRNASbfR的研究现状第18-20页
2 研究目的、研究内容、技术路线、材料方法第20-47页
    2.1 研究目的第20页
    2.2 研究内容第20页
    2.3 技术路线第20-23页
        2.3.1 基因芯片分析探寻sRNASbfR对S.Typhi转录组的影响第20-21页
        2.3.2 不同温度下SbfR对S.Typhi生长能力的影响第21页
        2.3.3 SbfR对S.Typhi动力的调节作用第21-22页
        2.3.4 SbfR对S.Typhi上皮细胞侵袭力的调节作用第22页
        2.3.5 SbfR对S.Typhi生物膜的调节作用第22-23页
        2.3.6 SbfR片段分部回补株构建及相关表型分析第23页
    2.4 实验材料第23-32页
        2.4.1 菌株和质粒第23-24页
        2.4.2 主要试剂和材料第24-25页
        2.4.3 主要溶液及配制第25-32页
        2.4.4 主要仪器第32页
    2.5 实验方法第32-47页
        2.5.1 细菌基因转录组分析第32-36页
        2.5.2 细菌生长曲线测定第36页
        2.5.3 细菌动力实验第36-37页
        2.5.4 细菌对HeLa细胞侵袭实验第37-38页
        2.5.5 细菌生物膜形成实验第38页
        2.5.6 Western-blot实验第38-40页
        2.5.7 SbfR片段分部回补株构建第40-43页
        2.5.8 qRT-PCR实验第43-47页
3 实验结果第47-64页
    3.1 基因芯片第47-52页
        3.1.1 SbfR缺陷株与SbfR回补株双色荧光叠加图第47-48页
        3.1.2 TSB条件下缺陷株和回补株基因表达谱表达差异分析第48-52页
    3.2 qRT-PCR验证基因芯片的结果第52页
    3.3 SbfR对S.Typhi生长情况的影响第52-54页
        3.3.1 生长曲线测定第52-53页
        3.3.2 qRT-PCR测定第53-54页
    3.4 SbfR对S.Typhi鞭毛的影响第54-57页
        3.4.1 半固体平板动力实验第54-55页
        3.4.2 qRT-PCR实验第55-56页
        3.4.3 Western-blot实验分析鞭毛蛋白FljB表达差异第56-57页
    3.5 SbfR对S.Typhi侵袭力的影响第57-58页
        3.5.1 SbfR影响S.Typhi侵袭HeLa细胞第57页
        3.5.2 qRT-PCR实验第57-58页
    3.6 SbfR对S.Typhi生物膜的影响第58-60页
        3.6.1 结晶紫染色的生物膜形成实验第58-59页
        3.6.2 形成生物膜六个要素相关基因的qRT-PCR实验第59-60页
    3.7 SbfR片段分部回补株的构建第60-62页
        3.7.1 构建携带部分SbfR片段的重组质粒第60-61页
        3.7.2 阳性重组质粒电转到ΔSbfR后的PCR鉴定第61-62页
    3.8 部分SbfR片段对S.Typhi动力的影响第62-63页
    3.9 部分SbfR片段对伤寒沙门菌生物膜的影响第63-64页
4 讨论第64-69页
5 主要结论及展望第69-70页
    5.1 主要结论第69页
    5.2 展望第69-70页
参考文献第70-79页
致谢第79-80页
攻读硕士学位期间发表的文章第80页

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