摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-10页 |
英文缩写索引 | 第13-14页 |
1 绪论 | 第14-20页 |
1.1 伤寒沙门菌简介 | 第14-15页 |
1.2 细菌的生物膜 | 第15-16页 |
1.3 细菌的鞭毛 | 第16-17页 |
1.4 细菌中的小RNA | 第17-18页 |
1.5 伤寒沙门菌sRNASbfR的研究现状 | 第18-20页 |
2 研究目的、研究内容、技术路线、材料方法 | 第20-47页 |
2.1 研究目的 | 第20页 |
2.2 研究内容 | 第20页 |
2.3 技术路线 | 第20-23页 |
2.3.1 基因芯片分析探寻sRNASbfR对S.Typhi转录组的影响 | 第20-21页 |
2.3.2 不同温度下SbfR对S.Typhi生长能力的影响 | 第21页 |
2.3.3 SbfR对S.Typhi动力的调节作用 | 第21-22页 |
2.3.4 SbfR对S.Typhi上皮细胞侵袭力的调节作用 | 第22页 |
2.3.5 SbfR对S.Typhi生物膜的调节作用 | 第22-23页 |
2.3.6 SbfR片段分部回补株构建及相关表型分析 | 第23页 |
2.4 实验材料 | 第23-32页 |
2.4.1 菌株和质粒 | 第23-24页 |
2.4.2 主要试剂和材料 | 第24-25页 |
2.4.3 主要溶液及配制 | 第25-32页 |
2.4.4 主要仪器 | 第32页 |
2.5 实验方法 | 第32-47页 |
2.5.1 细菌基因转录组分析 | 第32-36页 |
2.5.2 细菌生长曲线测定 | 第36页 |
2.5.3 细菌动力实验 | 第36-37页 |
2.5.4 细菌对HeLa细胞侵袭实验 | 第37-38页 |
2.5.5 细菌生物膜形成实验 | 第38页 |
2.5.6 Western-blot实验 | 第38-40页 |
2.5.7 SbfR片段分部回补株构建 | 第40-43页 |
2.5.8 qRT-PCR实验 | 第43-47页 |
3 实验结果 | 第47-64页 |
3.1 基因芯片 | 第47-52页 |
3.1.1 SbfR缺陷株与SbfR回补株双色荧光叠加图 | 第47-48页 |
3.1.2 TSB条件下缺陷株和回补株基因表达谱表达差异分析 | 第48-52页 |
3.2 qRT-PCR验证基因芯片的结果 | 第52页 |
3.3 SbfR对S.Typhi生长情况的影响 | 第52-54页 |
3.3.1 生长曲线测定 | 第52-53页 |
3.3.2 qRT-PCR测定 | 第53-54页 |
3.4 SbfR对S.Typhi鞭毛的影响 | 第54-57页 |
3.4.1 半固体平板动力实验 | 第54-55页 |
3.4.2 qRT-PCR实验 | 第55-56页 |
3.4.3 Western-blot实验分析鞭毛蛋白FljB表达差异 | 第56-57页 |
3.5 SbfR对S.Typhi侵袭力的影响 | 第57-58页 |
3.5.1 SbfR影响S.Typhi侵袭HeLa细胞 | 第57页 |
3.5.2 qRT-PCR实验 | 第57-58页 |
3.6 SbfR对S.Typhi生物膜的影响 | 第58-60页 |
3.6.1 结晶紫染色的生物膜形成实验 | 第58-59页 |
3.6.2 形成生物膜六个要素相关基因的qRT-PCR实验 | 第59-60页 |
3.7 SbfR片段分部回补株的构建 | 第60-62页 |
3.7.1 构建携带部分SbfR片段的重组质粒 | 第60-61页 |
3.7.2 阳性重组质粒电转到ΔSbfR后的PCR鉴定 | 第61-62页 |
3.8 部分SbfR片段对S.Typhi动力的影响 | 第62-63页 |
3.9 部分SbfR片段对伤寒沙门菌生物膜的影响 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-69页 |
5 主要结论及展望 | 第69-70页 |
5.1 主要结论 | 第69页 |
5.2 展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第80页 |