前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
英文缩写词 | 第17-18页 |
第1章 绪论 | 第18-20页 |
第2章 文献综述 | 第20-34页 |
2.1 软骨损伤 | 第20-22页 |
2.1.1 软骨的特点 | 第20-21页 |
2.1.2 软骨损伤的特点 | 第21页 |
2.1.3 软骨损伤的治疗 | 第21-22页 |
2.2 间充质干细胞 | 第22-25页 |
2.2.1 间充质干细胞的特点 | 第22-23页 |
2.2.2 间充质干细胞与软骨组织工程 | 第23-24页 |
2.2.3 MSCs与骨骼系统的发育及骨与软骨修复 | 第24页 |
2.2.4 影响间质干细胞分化的因素 | 第24-25页 |
2.3 冲击波 | 第25-29页 |
2.3.1 冲击波的特性 | 第25-26页 |
2.3.2 计量方式 | 第26页 |
2.3.3 冲击波的空化效应 | 第26页 |
2.3.4 冲击波的损伤效应 | 第26-27页 |
2.3.5 冲击波的作用机制 | 第27-28页 |
2.3.6 ESW在肌肉骨骼疾病中的应用 | 第28-29页 |
2.4 腺苷及腺苷受体研究现状 | 第29-34页 |
2.4.1 腺苷的生成与代谢 | 第30-31页 |
2.4.2 腺苷受体 | 第31页 |
2.4.3 腺苷受体在运动系统中的研究 | 第31-32页 |
2.4.4 腺苷受体、炎症与细胞分化 | 第32-34页 |
第3章 实验材料与方法 | 第34-52页 |
3.1 主要器材与试剂 | 第34-37页 |
3.1.1 主要实验器材 | 第34-35页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第35-37页 |
3.2 实验液体及配制方法 | 第37-39页 |
3.3 骨髓MSCs的原代提取及细胞培养 | 第39页 |
3.4 细胞复苏、传代及冻存 | 第39-41页 |
3.5 实验技术 | 第41-52页 |
3.5.1 流式细胞仪检测BMSCs的表面标记 | 第41-42页 |
3.5.2 成骨分化能力的鉴定 | 第42页 |
3.5.3 成软骨分化能力的鉴定 | 第42-43页 |
3.5.4 成脂分化能力的鉴定 | 第43页 |
3.5.5 台盼蓝染色法 | 第43-44页 |
3.5.6 CCK8检测细胞增殖活性 | 第44-45页 |
3.5.7 ELISA测量ESW作用MSCs后细胞外ATP、ADP、AMP、腺苷、HIF-1α及IL-6的含量 | 第45-46页 |
3.5.8 Western Blot检测ESW作用MSCs后细胞腺苷受体蛋白A1AR、A2AAR、A2BAR及A3AR的表达 | 第46-48页 |
3.5.9 RT-PCR | 第48-50页 |
3.5.10 组织化学 | 第50-51页 |
3.5.11 统计学分析 | 第51-52页 |
第4章 实验结果 | 第52-72页 |
4.1 骨髓间充质干细胞的分离、体外培养及鉴定 | 第52-56页 |
4.1.1 骨髓间充质干细胞的光镜下表现 | 第52-53页 |
4.1.2 流式细胞仪检査BMSC细胞表面抗原 | 第53-54页 |
4.1.3 骨髓间充质干细胞的多向分化潜能 | 第54-56页 |
4.2 冲击波对hMSCs细胞增殖活性的作用 | 第56-58页 |
4.2.1 CCK-8检测冲击波作用次数对hMSCs短时程抑制增殖作用 | 第56-57页 |
4.2.2 台盼蓝染色法检测冲击波对hMSCs的杀伤作用 | 第57-58页 |
4.3 冲击波增加骨髓间充质干细胞ATP、ADP、AMP和腺苷的释放 | 第58-59页 |
4.4 冲击波抑制hMSCs细胞团的成软骨分化 | 第59-63页 |
4.4.1 hMSCs细胞团大体形态和湿重 | 第59-60页 |
4.4.2 Real-time PCR检测SOX6,Sox9,COL1A2,COL2A1和ACAN mRNA水平上的表达 | 第60-62页 |
4.4.3 组织切片与染色分析 | 第62-63页 |
4.5 冲击波在三维培养条件下增加hMSCs的A2BAR表达水平 | 第63-64页 |
4.6 冲击波在三维培养条件下增加hMSCs的HIF-1α表达水平 | 第64-65页 |
4.7 冲击波通过腺苷受体A2B抑制hMSCs的成软骨分化 | 第65-68页 |
4.7.1 外源性腺苷的影响 | 第65-66页 |
4.7.2 腺苷A2BAR激动剂影响 | 第66-67页 |
4.7.3 腺苷A2BAR拮抗剂影响 | 第67-68页 |
4.8 IL-6可能与冲击波抑制hMSCs细胞团的成软骨分化的过程相关 | 第68-69页 |
4.9 Runx2可能与冲击波抑制hMSCs细胞团的成软骨分化的过程相关 | 第69-72页 |
第5章 讨论 | 第72-78页 |
第6章 结论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-96页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第96-98页 |
致谢 | 第98页 |