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腺苷及腺苷A2B受体在冲击波影响人类骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化中的作用及机制研究

前言第4-6页
中文摘要第6-10页
Abstract第10-13页
英文缩写词第17-18页
第1章 绪论第18-20页
第2章 文献综述第20-34页
    2.1 软骨损伤第20-22页
        2.1.1 软骨的特点第20-21页
        2.1.2 软骨损伤的特点第21页
        2.1.3 软骨损伤的治疗第21-22页
    2.2 间充质干细胞第22-25页
        2.2.1 间充质干细胞的特点第22-23页
        2.2.2 间充质干细胞与软骨组织工程第23-24页
        2.2.3 MSCs与骨骼系统的发育及骨与软骨修复第24页
        2.2.4 影响间质干细胞分化的因素第24-25页
    2.3 冲击波第25-29页
        2.3.1 冲击波的特性第25-26页
        2.3.2 计量方式第26页
        2.3.3 冲击波的空化效应第26页
        2.3.4 冲击波的损伤效应第26-27页
        2.3.5 冲击波的作用机制第27-28页
        2.3.6 ESW在肌肉骨骼疾病中的应用第28-29页
    2.4 腺苷及腺苷受体研究现状第29-34页
        2.4.1 腺苷的生成与代谢第30-31页
        2.4.2 腺苷受体第31页
        2.4.3 腺苷受体在运动系统中的研究第31-32页
        2.4.4 腺苷受体、炎症与细胞分化第32-34页
第3章 实验材料与方法第34-52页
    3.1 主要器材与试剂第34-37页
        3.1.1 主要实验器材第34-35页
        3.1.2 主要实验试剂第35-37页
    3.2 实验液体及配制方法第37-39页
    3.3 骨髓MSCs的原代提取及细胞培养第39页
    3.4 细胞复苏、传代及冻存第39-41页
    3.5 实验技术第41-52页
        3.5.1 流式细胞仪检测BMSCs的表面标记第41-42页
        3.5.2 成骨分化能力的鉴定第42页
        3.5.3 成软骨分化能力的鉴定第42-43页
        3.5.4 成脂分化能力的鉴定第43页
        3.5.5 台盼蓝染色法第43-44页
        3.5.6 CCK8检测细胞增殖活性第44-45页
        3.5.7 ELISA测量ESW作用MSCs后细胞外ATP、ADP、AMP、腺苷、HIF-1α及IL-6的含量第45-46页
        3.5.8 Western Blot检测ESW作用MSCs后细胞腺苷受体蛋白A1AR、A2AAR、A2BAR及A3AR的表达第46-48页
        3.5.9 RT-PCR第48-50页
        3.5.10 组织化学第50-51页
        3.5.11 统计学分析第51-52页
第4章 实验结果第52-72页
    4.1 骨髓间充质干细胞的分离、体外培养及鉴定第52-56页
        4.1.1 骨髓间充质干细胞的光镜下表现第52-53页
        4.1.2 流式细胞仪检査BMSC细胞表面抗原第53-54页
        4.1.3 骨髓间充质干细胞的多向分化潜能第54-56页
    4.2 冲击波对hMSCs细胞增殖活性的作用第56-58页
        4.2.1 CCK-8检测冲击波作用次数对hMSCs短时程抑制增殖作用第56-57页
        4.2.2 台盼蓝染色法检测冲击波对hMSCs的杀伤作用第57-58页
    4.3 冲击波增加骨髓间充质干细胞ATP、ADP、AMP和腺苷的释放第58-59页
    4.4 冲击波抑制hMSCs细胞团的成软骨分化第59-63页
        4.4.1 hMSCs细胞团大体形态和湿重第59-60页
        4.4.2 Real-time PCR检测SOX6,Sox9,COL1A2,COL2A1和ACAN mRNA水平上的表达第60-62页
        4.4.3 组织切片与染色分析第62-63页
    4.5 冲击波在三维培养条件下增加hMSCs的A2BAR表达水平第63-64页
    4.6 冲击波在三维培养条件下增加hMSCs的HIF-1α表达水平第64-65页
    4.7 冲击波通过腺苷受体A2B抑制hMSCs的成软骨分化第65-68页
        4.7.1 外源性腺苷的影响第65-66页
        4.7.2 腺苷A2BAR激动剂影响第66-67页
        4.7.3 腺苷A2BAR拮抗剂影响第67-68页
    4.8 IL-6可能与冲击波抑制hMSCs细胞团的成软骨分化的过程相关第68-69页
    4.9 Runx2可能与冲击波抑制hMSCs细胞团的成软骨分化的过程相关第69-72页
第5章 讨论第72-78页
第6章 结论第78-80页
参考文献第80-96页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第96-98页
致谢第98页

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