| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 符号说明 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论组织居留NK细胞的诱导发育与功能 | 第16-34页 |
| 1.1 引言 | 第16-18页 |
| 1.1.1 NK细胞是重要的天然免疫细胞 | 第16页 |
| 1.1.2 传统NK细胞 | 第16-18页 |
| 1.1.3 NK细胞新亚群的划分 | 第18页 |
| 1.2 组织居留NK细胞的分类 | 第18-22页 |
| 1.2.1 肝脏组织居留NK细胞 | 第18-19页 |
| 1.2.2 子宫组织居留NK细胞 | 第19页 |
| 1.2.3 肠道组织居留NK细胞 | 第19-20页 |
| 1.2.4 脂肪组织居留NK细胞 | 第20页 |
| 1.2.5 唾液腺组织居留NK细胞 | 第20-21页 |
| 1.2.6 皮肤组织居留NK细胞 | 第21页 |
| 1.2.7 肾脏组织居留NK细胞 | 第21-22页 |
| 1.3 组织居留NK细胞的发育及调控 | 第22-29页 |
| 1.3.1 组织居留NK细胞的前体细胞和来源 | 第22-23页 |
| 1.3.2 调控组织居留NK细胞发育的转录因子 | 第23-26页 |
| 1.3.3 调控组织居留NK细胞发育的细胞因子 | 第26页 |
| 1.3.4 组织居留NK细胞的体外诱导发育 | 第26-28页 |
| 1.3.5 cNK、组织居留NK细胞和ILC的相互转化 | 第28-29页 |
| 1.4 组织居留NK细胞的功能 | 第29-34页 |
| 1.4.1 抵御外源病原体入侵和抗肿瘤 | 第29-31页 |
| 1.4.2 介导炎症反应和免疫记忆 | 第31页 |
| 1.4.3 促进组织生长发育 | 第31-32页 |
| 1.4.4 免疫负调维持稳态 | 第32-34页 |
| 第二章 引言 | 第34-36页 |
| 第三章 材料与方法 | 第36-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-42页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第36页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第36-41页 |
| 3.1.3 实验器材 | 第41-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-52页 |
| 3.2.1 CD49a~+ NK细胞诱导流程 | 第42-43页 |
| 3.2.2 小鼠淋巴细胞分离 | 第43-46页 |
| 3.2.3 MACS纯化Lineage~-细胞 | 第46页 |
| 3.2.4 MACS纯化NKp46~+NK细胞 | 第46-47页 |
| 3.2.5 流式细胞术细胞表面分子标记 | 第47页 |
| 3.2.6 流式细胞术检测转录因子 | 第47-48页 |
| 3.2.7 流式细胞术检测细胞因子 | 第48页 |
| 3.2.8 Zombie NIR~(TM) Fixable Viability Kit标记死细胞 | 第48页 |
| 3.2.9 流式细胞数分选NK细胞 | 第48-49页 |
| 3.2.10 细胞计数 | 第49页 |
| 3.2.11 IL-4刺激细胞 | 第49页 |
| 3.2.12 RNA提取 | 第49-50页 |
| 3.2.13 RNA逆转录为cDNA | 第50页 |
| 3.2.14 荧光定量PCR | 第50页 |
| 3.2.15 细胞转输 | 第50页 |
| 3.2.16 细胞杀伤 | 第50-51页 |
| 3.2.17 统计分析 | 第51-52页 |
| 第四章 实验结果 | 第52-76页 |
| 4.1 细胞因子组合将骨髓造血前体细胞诱导为CD49a~+ NK细胞 | 第52-56页 |
| 4.1.1 构建一种诱导骨髓造血前体细胞为CD3~-CD19~-CD49a~+NK1.1~+细胞的培养方案 | 第52-54页 |
| 4.1.2 诱导的CD49a~+NK1.1~+细胞具有组织居留NK细胞的表型 | 第54-55页 |
| 4.1.3 诱导的CD49a~+NK1.1~+细胞发育依赖转录因子E4BP4而部分依赖T-bet | 第55-56页 |
| 4.2 诱导的CD49a~+NK细胞的发育和维持需要IL-15 | 第56-59页 |
| 4.2.1 IMDM培养基比RPMI 1640培养基更适合诱导CD49a~+NK细胞 | 第56页 |
| 4.2.2 诱导的CD49a~+NK细胞的发育需要IL-15 | 第56-58页 |
| 4.2.3 诱导的CD49a~+NK细胞的维持需要IL-15和IL-2 | 第58-59页 |
| 4.3 诱导的CD49a~+Eomes~- NK细胞与肝脏居留NK细胞表型相似 | 第59-62页 |
| 4.4 IL-4将诱导的CD49a~+Eomes~- NK细胞转变为CD49a~+Eomes~+NK细胞 | 第62-66页 |
| 4.4.1 IL-4上调诱导的CD49a~+Eomes~- NK细胞表达Eomes | 第62-64页 |
| 4.4.2 IL-4刺激基本不改变诱导的CD49a~+NK细胞的表型 | 第64-65页 |
| 4.4.3 诱导的CD49a~+NK细胞在IL-4作用下发生功能重编程 | 第65-66页 |
| 4.5 IL-4刺激后的CD49a~+EOMES~+NK细胞类似子宫组织居留NK细胞 | 第66-69页 |
| 4.6 IL-4/STAT6轴对于诱导CD49a~+EOMES~+NK细胞必不可少 | 第69-71页 |
| 4.6.1 CD49a~+NK细胞的诱导依赖IL-4Rα | 第69页 |
| 4.6.2 CD49a~+NK细胞的存活以及IL-4刺激的Eomes上调依赖STAT6 | 第69-70页 |
| 4.6.3 IL-4信号部分影响肝脏和子宫组织居留NK细胞的稳态 | 第70-71页 |
| 4.7 诱导的CD49a~+Eomes~+NK细胞表达促生长因子并迁移到蜕膜局部 | 第71-72页 |
| 4.8 转输诱导的CD49a~+Eomes~+NK细胞逆转胚胎生长受限 | 第72-76页 |
| 第五章 结果讨论 | 第76-80页 |
| 第六章 参考文献 | 第80-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 攻读博士期间的主要研究成果 | 第98-99页 |
| 附件 | 第99页 |
