| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 白桦的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.1 白桦三萜化合物 | 第11页 |
| 1.1.2 白桦三萜合成途径及关键酶基因 | 第11-12页 |
| 1.2 植物次生代谢途径的调控 | 第12-13页 |
| 1.3 RNA沉默现象 | 第13-16页 |
| 1.3.1 RNA干扰的原理 | 第14-15页 |
| 1.3.2 RNA干扰在植物中的应用 | 第15-16页 |
| 1.4 RNA干扰载体的构建方法 | 第16-21页 |
| 1.4.1 传统的酶切-连接方法 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Gateway技术构建RNAi载体 | 第17-18页 |
| 1.4.3 DA-ihpRNA方法 | 第18页 |
| 1.4.4 植物RNA干扰载体ihpRNA | 第18-20页 |
| 1.4.5 RNA干扰载体pGRNA | 第20页 |
| 1.4.6 RNAi载体pRNAi-GG | 第20-21页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 白桦OSC BpDS基因克隆及生物信息学分析 | 第22-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2 结果分析 | 第25-40页 |
| 2.2.1 白桦BpDS基因克隆 | 第25-30页 |
| 2.2.2 白桦BpDS基因的生物信息学分析 | 第30-40页 |
| 2.3 讨论 | 第40页 |
| 2.4 小结 | 第40-42页 |
| 3 白桦植株中BpDS基因表达特性 | 第42-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-43页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 试验方法 | 第42-43页 |
| 3.2 实验结果 | 第43-46页 |
| 3.2.1 白桦RNA完整性和纯度检测 | 第43-44页 |
| 3.2.2 白桦BpDS基因在不同月份的表达特性 | 第44页 |
| 3.2.3 BpDS基因在白桦组培苗各部位的表达差异 | 第44-45页 |
| 3.2.4 ABA和乙烯处理对白桦丛生苗BpDS基因表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4 小结 | 第47-49页 |
| 4 白桦BpDS单基因及BpDS、CAS双基因RNAi载体构建 | 第49-61页 |
| 4.1 白桦BpDS单基因RNAi载体构建 | 第49-54页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 4.1.3 试验方法 | 第49-54页 |
| 4.2 实验结果 | 第54-59页 |
| 4.2.1 BpDS基因RNAi载体构建 | 第54-56页 |
| 4.2.2 白桦BpDS、CAS双基因干扰载体构建 | 第56-59页 |
| 4.2.3 BpDS、CAS双基因干扰载体工程农杆菌菌株获得 | 第59页 |
| 4.3 讨论 | 第59页 |
| 4.4 小结 | 第59-61页 |
| 5 白桦BpDSRNAi遗传转化 | 第61-73页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第61页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第61页 |
| 5.2 试验方法 | 第61-66页 |
| 5.2.1 白桦种子诱导组培苗 | 第61页 |
| 5.2.2 工程菌液制备 | 第61-62页 |
| 5.2.3 pBI1303-BpDS农杆菌介导侵染白桦组培苗 | 第62页 |
| 5.2.4 转基因白桦DNA提取 | 第62-63页 |
| 5.2.5 转基因白桦PCR鉴定 | 第63页 |
| 5.2.6 BpDS RNAi转基因白桦三萜合成相关基因表达检测 | 第63-66页 |
| 5.3 实验结果 | 第66-71页 |
| 5.3.1 白桦BpDS基因RNAi遗传转化 | 第66-67页 |
| 5.3.2 转基因白桦的鉴定 | 第67-68页 |
| 5.3.3 Southern杂交印迹鉴定转基因白桦 | 第68页 |
| 5.3.4 转基因白桦愈伤组织GFP荧光检测 | 第68-70页 |
| 5.3.5 转基因白桦三萜合成相关基因表达检测 | 第70-71页 |
| 5.4 讨论 | 第71-72页 |
| 5.5 小结 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
