目次 | 第6-9页 |
致谢 | 第9-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
插图和附表清单 | 第14-16页 |
缩略词和术语表 | 第16-17页 |
第1章 绪论 | 第17-30页 |
1.1 研究背景 | 第17-28页 |
1.1.1 卤虫概况 | 第17-20页 |
1.1.2 休眠卵发育过程中线粒体的成熟 | 第20页 |
1.1.3 卤虫休眠卵发育过程中卵黄颗粒的降解 | 第20-21页 |
1.1.4 PHB1的结构 | 第21-23页 |
1.1.5 PHB1在线粒体中的功能 | 第23-24页 |
1.1.6 PHB1在细胞核中的功能 | 第24页 |
1.1.7 PHB1与能量代谢调控的关系 | 第24-25页 |
1.1.8 PHB1与细胞分化的关系 | 第25页 |
1.1.9 PHB1在Ras-Raf-MEK信号通路中的作用 | 第25-26页 |
1.1.10 PHB1与疾病的关系 | 第26-28页 |
1.1.11 展望 | 第28页 |
1.2 研究目的,方法和意义 | 第28-30页 |
第2章 PHB1在卤虫胚胎发育过程中的表达及调控 | 第30-55页 |
摘要 | 第30页 |
2.1 引言 | 第30-31页 |
2.2 材料 | 第31-32页 |
2.2.1 实验材料 | 第31页 |
2.2.2 主要试剂 | 第31-32页 |
2.2.3 主要仪器 | 第32页 |
2.3 方法 | 第32-47页 |
2.3.1 总RNA提取及cDNA合成 | 第32-33页 |
2.3.2 PHB1的克隆 | 第33-38页 |
2.3.3 氨基酸序列比对及进化分析 | 第38页 |
2.3.4 Northern Blotting | 第38-41页 |
2.3.5 Western Blotting | 第41-43页 |
2.3.6 细胞核抽提 | 第43页 |
2.3.7 免疫荧光 | 第43-44页 |
2.3.8 原核表达及蛋白质纯化 | 第44-45页 |
2.3.9 样品包埋石蜡切片及处理 | 第45-47页 |
2.4 结果 | 第47-54页 |
2.4.1 ArPHB1的序列分析 | 第47-49页 |
2.4.2 ArPHB1 mRNA在休眠卵发育过程中的表达 | 第49-50页 |
2.4.3 ArPHB1蛋白及其磷酸化在休眠卵发育过程中的变化 | 第50-52页 |
2.4.4 ArPHB1的细胞核定位变化 | 第52-53页 |
2.4.5 ArPHB1主要分布在线粒体中 | 第53-54页 |
2.5 小结与讨论 | 第54-55页 |
第3章 PHB1在卤虫休眠卵发育中的功能分析 | 第55-74页 |
摘要 | 第55页 |
3.1 引言 | 第55-56页 |
3.2 材料 | 第56-57页 |
3.2.1 实验材料 | 第56-57页 |
3.2.2 主要试剂 | 第57页 |
3.2.3 主要仪器 | 第57页 |
3.3 方法 | 第57-63页 |
3.3.1 双链RNA的制备 | 第58-60页 |
3.3.2 卤虫的显微注射 | 第60-61页 |
3.3.3 干涉效率检测 | 第61页 |
3.3.4 免疫沉淀 | 第61页 |
3.3.5 实时荧光定量PCR | 第61-63页 |
3.4 结果 | 第63-72页 |
3.4.1 ArPHB1的干涉导致了幼虫的能量胁迫 | 第63-65页 |
3.4.2 干涉ArPHB1引起线粒体功能异常 | 第65-66页 |
3.4.3 干涉ArPHB1引起卵黄颗粒代谢异常 | 第66-68页 |
3.4.4 ArPHB1被泛素化降解 | 第68-69页 |
3.4.5 在卤虫卵重启胚胎发育的过程中ArPHBl通过溶酶体被降解 | 第69-70页 |
3.4.6 AMPK能促进卵黄蛋白的降解 | 第70页 |
3.4.7 ArPHB 1控制着胚胎发育过程中MEK/ERK信号通路的激活 | 第70-72页 |
3.5 小结与讨论 | 第72-74页 |
结论与展望 | 第74-76页 |
1 结论 | 第74-75页 |
2 展望 | 第75-76页 |
参考书目 | 第76-88页 |
附录一 常用试剂配制一览表 | 第88-94页 |
附录二 PCR实验中使用的引物列表 | 第94-95页 |
附录三 在序列比比对及进化分析中使用用的序列及物种 | 第95-96页 |
附录四 博士期间发表的论文 | 第96页 |