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卤虫中PHB1分子表达特征及其在线粒体及卵黄颗粒代谢中的功能研究

目次第6-9页
致谢第9-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-13页
插图和附表清单第14-16页
缩略词和术语表第16-17页
第1章 绪论第17-30页
    1.1 研究背景第17-28页
        1.1.1 卤虫概况第17-20页
        1.1.2 休眠卵发育过程中线粒体的成熟第20页
        1.1.3 卤虫休眠卵发育过程中卵黄颗粒的降解第20-21页
        1.1.4 PHB1的结构第21-23页
        1.1.5 PHB1在线粒体中的功能第23-24页
        1.1.6 PHB1在细胞核中的功能第24页
        1.1.7 PHB1与能量代谢调控的关系第24-25页
        1.1.8 PHB1与细胞分化的关系第25页
        1.1.9 PHB1在Ras-Raf-MEK信号通路中的作用第25-26页
        1.1.10 PHB1与疾病的关系第26-28页
        1.1.11 展望第28页
    1.2 研究目的,方法和意义第28-30页
第2章 PHB1在卤虫胚胎发育过程中的表达及调控第30-55页
    摘要第30页
    2.1 引言第30-31页
    2.2 材料第31-32页
        2.2.1 实验材料第31页
        2.2.2 主要试剂第31-32页
        2.2.3 主要仪器第32页
    2.3 方法第32-47页
        2.3.1 总RNA提取及cDNA合成第32-33页
        2.3.2 PHB1的克隆第33-38页
        2.3.3 氨基酸序列比对及进化分析第38页
        2.3.4 Northern Blotting第38-41页
        2.3.5 Western Blotting第41-43页
        2.3.6 细胞核抽提第43页
        2.3.7 免疫荧光第43-44页
        2.3.8 原核表达及蛋白质纯化第44-45页
        2.3.9 样品包埋石蜡切片及处理第45-47页
    2.4 结果第47-54页
        2.4.1 ArPHB1的序列分析第47-49页
        2.4.2 ArPHB1 mRNA在休眠卵发育过程中的表达第49-50页
        2.4.3 ArPHB1蛋白及其磷酸化在休眠卵发育过程中的变化第50-52页
        2.4.4 ArPHB1的细胞核定位变化第52-53页
        2.4.5 ArPHB1主要分布在线粒体中第53-54页
    2.5 小结与讨论第54-55页
第3章 PHB1在卤虫休眠卵发育中的功能分析第55-74页
    摘要第55页
    3.1 引言第55-56页
    3.2 材料第56-57页
        3.2.1 实验材料第56-57页
        3.2.2 主要试剂第57页
        3.2.3 主要仪器第57页
    3.3 方法第57-63页
        3.3.1 双链RNA的制备第58-60页
        3.3.2 卤虫的显微注射第60-61页
        3.3.3 干涉效率检测第61页
        3.3.4 免疫沉淀第61页
        3.3.5 实时荧光定量PCR第61-63页
    3.4 结果第63-72页
        3.4.1 ArPHB1的干涉导致了幼虫的能量胁迫第63-65页
        3.4.2 干涉ArPHB1引起线粒体功能异常第65-66页
        3.4.3 干涉ArPHB1引起卵黄颗粒代谢异常第66-68页
        3.4.4 ArPHB1被泛素化降解第68-69页
        3.4.5 在卤虫卵重启胚胎发育的过程中ArPHBl通过溶酶体被降解第69-70页
        3.4.6 AMPK能促进卵黄蛋白的降解第70页
        3.4.7 ArPHB 1控制着胚胎发育过程中MEK/ERK信号通路的激活第70-72页
    3.5 小结与讨论第72-74页
结论与展望第74-76页
    1 结论第74-75页
    2 展望第75-76页
参考书目第76-88页
附录一 常用试剂配制一览表第88-94页
附录二 PCR实验中使用的引物列表第94-95页
附录三 在序列比比对及进化分析中使用用的序列及物种第95-96页
附录四 博士期间发表的论文第96页

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