中文摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第7-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 综述 | 第11-27页 |
1 空肠弯曲菌病概述 | 第11-13页 |
1.1 病原学 | 第11-12页 |
1.2 流行病学 | 第12页 |
1.3 临床症状 | 第12-13页 |
1.4 临床治疗 | 第13页 |
2 空肠弯曲菌感染动物模型研究进展 | 第13-17页 |
2.1 灵长类动物 | 第13-14页 |
2.2 雪貂(Mustela Pulourius Furo) | 第14页 |
2.3 仔猪(Piglet) | 第14页 |
2.4 兔(Rabbit) | 第14-15页 |
2.5 啮齿类动物 | 第15-16页 |
2.6 鸡 | 第16-17页 |
2.7 展望 | 第17页 |
3 细菌体内毒力基因表达技术 | 第17-22页 |
3.1 差异显示RT-PCR(DD-RT-PCR) | 第18页 |
3.2 差异荧光诱导(DFI) | 第18页 |
3.3 DNA芯片技术(DNA chip technique) | 第18-19页 |
3.4 代表性差异分析技术(RDA) | 第19页 |
3.5 体内表达技术(IVET) | 第19-20页 |
3.6 体内诱导抗原技术(IVIAT) | 第20页 |
3.7 信号标签诱变技术(STM) | 第20页 |
3.8 抑制消减杂交技术(SSH) | 第20页 |
3.9 选择性抗原捕获转录序列(SCOTS) | 第20-22页 |
3.10 展望 | 第22页 |
参考文献 | 第22-27页 |
第二章 空肠弯曲菌致仔兔腹泻模型的建立 | 第27-42页 |
1 材料 | 第27-28页 |
1.1 菌株及实验动物 | 第27页 |
1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
1.3 主要仪器 | 第28页 |
2 方法 | 第28-31页 |
2.1 菌株复苏和传代培养 | 第28页 |
2.2 攻毒方式 | 第28页 |
2.3 评价指标 | 第28-29页 |
2.4 实验动物Cj感染率分析 | 第29页 |
2.5 攻毒剂量的确定 | 第29页 |
2.6 实验仔兔体重的影响 | 第29页 |
2.7 感染仔兔模型的建立 | 第29-30页 |
2.7.1 临床观察和样品的采集 | 第29-30页 |
2.7.2 感染动物菌株分离与鉴定 | 第30页 |
2.8 组织病理切片分析 | 第30页 |
2.9 剂量反应实验 | 第30-31页 |
2.10 不同来源空肠弯曲菌分离株对仔兔模型致病性评价 | 第31页 |
3 结果 | 第31-38页 |
3.0 实验动物Cj感染率本底调查 | 第31页 |
3.1 接种剂量 | 第31页 |
3.2 仔兔体重 | 第31-32页 |
3.3 临床症状 | 第32页 |
3.4 病理变化 | 第32-33页 |
3.5 各脏器细菌的分离鉴定 | 第33-36页 |
3.6 剂量反应实验 | 第36-37页 |
3.7 不同来源空肠弯曲菌分离株对仔兔模型致病性评价 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第三章 空肠弯曲菌仔兔体内感染动态分析 | 第42-54页 |
1 材料 | 第42-43页 |
1.1 菌株及实验动物 | 第42页 |
1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
1.3 主要仪器 | 第43页 |
2 方法 | 第43-46页 |
2.1 动物接种 | 第43页 |
2.2 样品采集和处理办法 | 第43页 |
2.3 细菌组织分布动态检测 | 第43-44页 |
2.3.1 细菌在实质性器官和血液中消长规律 | 第43页 |
2.3.2 细菌在肠道中消长规律 | 第43-44页 |
2.4 电子显微镜检测 | 第44页 |
2.4.1 扫描电子显微镜的观察 | 第44页 |
2.4.2 透射电子显微镜观察 | 第44页 |
2.5 感染后肠组织细胞因子分泌动态变化分析 | 第44-46页 |
2.5.1 样品RNA提取 | 第44-46页 |
2.5.2 荧光定量PCR | 第46页 |
3 结果 | 第46-50页 |
3.1 感染组织中空肠弯曲菌的动态分布 | 第46-48页 |
3.2 空肠弯曲菌感染肠道扫描电镜、透射电镜观察 | 第48-50页 |
3.3 空肠弯曲菌感染宿主天然免疫应答 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-54页 |
第四章 选择性捕获空肠弯曲菌仔兔体内转录序列 | 第54-69页 |
1 材料 | 第54-56页 |
1.0 菌株和质粒 | 第54页 |
1.1 实验动物和动物试验 | 第54-55页 |
1.2 主要试剂 | 第55页 |
1.3 主要仪器 | 第55页 |
1.4 引物 | 第55-56页 |
2 方法 | 第56-62页 |
2.1 空肠弯曲菌基因组DNA的提取 | 第56页 |
2.2 空肠弯曲菌rDNA的克隆与鉴定 | 第56-58页 |
2.3 RNA的分离、cDNA的合成、PCR扩增 | 第58-60页 |
2.3.1 RNA的提取与纯化 | 第58-59页 |
2.3.2 cDNA第一链的合成 | 第59页 |
2.3.3 cDNA第二链的合成 | 第59页 |
2.3.4 PCR反应 | 第59-60页 |
2.4 选择性捕获转录序列 | 第60-61页 |
2.4.1 基因组DNA的生物素标记和超声波处理 | 第60页 |
2.4.2 样品杂交 | 第60-61页 |
2.4.3 转录序列的捕获 | 第61页 |
2.5 SCOTS克隆的PCR鉴定和测序 | 第61-62页 |
2.6 Real-time RT-PCR验证差异表达基因 | 第62页 |
3 结果 | 第62-65页 |
3.1 细菌基因组DNA的定量 | 第62页 |
3.2 空肠弯曲菌rDNA的克隆与重组质粒的鉴定 | 第62页 |
3.3 生物素标记的11168菌株基因组及rDNA重组质粒的破碎 | 第62-63页 |
3.4 RNA的测定 | 第63-64页 |
3.5 SCOTS结果 | 第64页 |
3.6 感染相关基因的功能注释 | 第64页 |
3.7 筛选基因的Real-time RT-PCR验证 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-69页 |
附录 | 第69-71页 |
攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |