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空肠弯曲菌感染仔兔模型的建立及动物体内诱导基因的筛选

中文摘要第2-4页
Abstract第4-6页
目录第7-10页
符号说明第10-11页
第一章 综述第11-27页
    1 空肠弯曲菌病概述第11-13页
        1.1 病原学第11-12页
        1.2 流行病学第12页
        1.3 临床症状第12-13页
        1.4 临床治疗第13页
    2 空肠弯曲菌感染动物模型研究进展第13-17页
        2.1 灵长类动物第13-14页
        2.2 雪貂(Mustela Pulourius Furo)第14页
        2.3 仔猪(Piglet)第14页
        2.4 兔(Rabbit)第14-15页
        2.5 啮齿类动物第15-16页
        2.6 鸡第16-17页
        2.7 展望第17页
    3 细菌体内毒力基因表达技术第17-22页
        3.1 差异显示RT-PCR(DD-RT-PCR)第18页
        3.2 差异荧光诱导(DFI)第18页
        3.3 DNA芯片技术(DNA chip technique)第18-19页
        3.4 代表性差异分析技术(RDA)第19页
        3.5 体内表达技术(IVET)第19-20页
        3.6 体内诱导抗原技术(IVIAT)第20页
        3.7 信号标签诱变技术(STM)第20页
        3.8 抑制消减杂交技术(SSH)第20页
        3.9 选择性抗原捕获转录序列(SCOTS)第20-22页
        3.10 展望第22页
    参考文献第22-27页
第二章 空肠弯曲菌致仔兔腹泻模型的建立第27-42页
    1 材料第27-28页
        1.1 菌株及实验动物第27页
        1.2 主要试剂第27-28页
        1.3 主要仪器第28页
    2 方法第28-31页
        2.1 菌株复苏和传代培养第28页
        2.2 攻毒方式第28页
        2.3 评价指标第28-29页
        2.4 实验动物Cj感染率分析第29页
        2.5 攻毒剂量的确定第29页
        2.6 实验仔兔体重的影响第29页
        2.7 感染仔兔模型的建立第29-30页
            2.7.1 临床观察和样品的采集第29-30页
            2.7.2 感染动物菌株分离与鉴定第30页
        2.8 组织病理切片分析第30页
        2.9 剂量反应实验第30-31页
        2.10 不同来源空肠弯曲菌分离株对仔兔模型致病性评价第31页
    3 结果第31-38页
        3.0 实验动物Cj感染率本底调查第31页
        3.1 接种剂量第31页
        3.2 仔兔体重第31-32页
        3.3 临床症状第32页
        3.4 病理变化第32-33页
        3.5 各脏器细菌的分离鉴定第33-36页
        3.6 剂量反应实验第36-37页
        3.7 不同来源空肠弯曲菌分离株对仔兔模型致病性评价第37-38页
    4 讨论第38-40页
    参考文献第40-42页
第三章 空肠弯曲菌仔兔体内感染动态分析第42-54页
    1 材料第42-43页
        1.1 菌株及实验动物第42页
        1.2 主要试剂第42-43页
        1.3 主要仪器第43页
    2 方法第43-46页
        2.1 动物接种第43页
        2.2 样品采集和处理办法第43页
        2.3 细菌组织分布动态检测第43-44页
            2.3.1 细菌在实质性器官和血液中消长规律第43页
            2.3.2 细菌在肠道中消长规律第43-44页
        2.4 电子显微镜检测第44页
            2.4.1 扫描电子显微镜的观察第44页
            2.4.2 透射电子显微镜观察第44页
        2.5 感染后肠组织细胞因子分泌动态变化分析第44-46页
            2.5.1 样品RNA提取第44-46页
            2.5.2 荧光定量PCR第46页
    3 结果第46-50页
        3.1 感染组织中空肠弯曲菌的动态分布第46-48页
        3.2 空肠弯曲菌感染肠道扫描电镜、透射电镜观察第48-50页
        3.3 空肠弯曲菌感染宿主天然免疫应答第50页
    4 讨论第50-52页
    参考文献第52-54页
第四章 选择性捕获空肠弯曲菌仔兔体内转录序列第54-69页
    1 材料第54-56页
        1.0 菌株和质粒第54页
        1.1 实验动物和动物试验第54-55页
        1.2 主要试剂第55页
        1.3 主要仪器第55页
        1.4 引物第55-56页
    2 方法第56-62页
        2.1 空肠弯曲菌基因组DNA的提取第56页
        2.2 空肠弯曲菌rDNA的克隆与鉴定第56-58页
        2.3 RNA的分离、cDNA的合成、PCR扩增第58-60页
            2.3.1 RNA的提取与纯化第58-59页
            2.3.2 cDNA第一链的合成第59页
            2.3.3 cDNA第二链的合成第59页
            2.3.4 PCR反应第59-60页
        2.4 选择性捕获转录序列第60-61页
            2.4.1 基因组DNA的生物素标记和超声波处理第60页
            2.4.2 样品杂交第60-61页
            2.4.3 转录序列的捕获第61页
        2.5 SCOTS克隆的PCR鉴定和测序第61-62页
        2.6 Real-time RT-PCR验证差异表达基因第62页
    3 结果第62-65页
        3.1 细菌基因组DNA的定量第62页
        3.2 空肠弯曲菌rDNA的克隆与重组质粒的鉴定第62页
        3.3 生物素标记的11168菌株基因组及rDNA重组质粒的破碎第62-63页
        3.4 RNA的测定第63-64页
        3.5 SCOTS结果第64页
        3.6 感染相关基因的功能注释第64页
        3.7 筛选基因的Real-time RT-PCR验证第64-65页
    4 讨论第65-67页
    参考文献第67-69页
附录第69-71页
攻读硕士学位期间发表论文目录第71-72页
致谢第72-73页

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