摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1.引言和文献综述 | 第10-22页 |
1.1 骨骼肌 | 第10-13页 |
1.1.1 骨骼肌的形态构成 | 第10页 |
1.1.2 骨骼肌的胚胎起源 | 第10-11页 |
1.1.3 骨骼肌中的卫星细胞 | 第11-13页 |
1.1.4 骨骼肌损伤、修复的病理生理学 | 第13页 |
1.2 HET1介绍 | 第13-14页 |
1.3 Rho家族介绍 | 第14-16页 |
1.4 PAX7基因介绍 | 第16-17页 |
1.5 成肌调节因子(MRF) | 第17-21页 |
1.5.1 成肌调节因子在胚胎发育中的表达 | 第17-18页 |
1.5.2 成肌调节因子的结构 | 第18页 |
1.5.3 调控成肌调节因子受到的信号途径 | 第18-19页 |
1.5.4 成肌调节因子的生物活性调控 | 第19-20页 |
1.5.5 成肌调节因子的靶标 | 第20页 |
1.5.6 模式动物研究肌调节因子的功能 | 第20-21页 |
1.6 肌细胞增强因子2(Mef2)介绍 | 第21-22页 |
2.材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 生物信息学数据库和主要软件 | 第22页 |
2.1.2 抗体、引物和试剂 | 第22页 |
2.1.3 缓冲液和细胞培养基配置 | 第22-23页 |
2.1.4 主要仪器和实验耗材 | 第23-24页 |
2.1.4.1 实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.4.2 实验耗材 | 第24页 |
2.1.5 实验动物 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 利用心脏毒素构建肌肉损伤模型 | 第24页 |
2.2.2 小鼠基因组DNA提取和鉴定 | 第24-25页 |
2.2.3 Southern Blot | 第25-26页 |
2.2.4 小鼠肌肉损伤后cDNA制备 | 第26-27页 |
2.2.5 逆转录PCR(RT-PCR) | 第27页 |
2.2.6 小鼠骨骼肌组织蛋白质提取 | 第27页 |
2.2.7 蛋白质印迹 | 第27-30页 |
2.2.8 石蜡包埋、切片及HE染色 | 第30-31页 |
2.2.9 肌肉卫星细胞分离、培养,成肌细胞分化和融合成肌管 | 第31-33页 |
3.结果与分析 | 第33-42页 |
3.1 HET全敲小鼠的建立 | 第33-36页 |
3.1.1 PCR鉴定HET全敲小鼠基因型 | 第33-34页 |
3.1.2 southern blot检测HET1全敲小鼠基因中,HET1基因片段缺失 | 第34-35页 |
3.1.3 HET1-null小鼠HET蛋白质表达丧失 | 第35-36页 |
3.2 HET1-NULL小鼠与野生型小鼠各组织形态观察 | 第36-37页 |
3.3 HET1-NULL小鼠和野生型小鼠肌肉再生情况 | 第37-40页 |
3.3.1 心脏毒素诱导骨骼肌损伤模型 | 第37-38页 |
3.3.2 RT-PCR分析小鼠骨骼肌损伤后肌细胞相关因子变化 | 第38-39页 |
3.3.3 HET1-NULL小鼠和野生型小鼠肌肉损伤修复情况 | 第39-40页 |
3.4 肌肉卫星细胞的分离、培养,成肌细胞分化和融合形成肌管 | 第40-42页 |
4.讨论 | 第42-45页 |
结语 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录1 | 第53-54页 |
附录2 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |