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Het1基因在肌肉再生中的作用

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1.引言和文献综述第10-22页
    1.1 骨骼肌第10-13页
        1.1.1 骨骼肌的形态构成第10页
        1.1.2 骨骼肌的胚胎起源第10-11页
        1.1.3 骨骼肌中的卫星细胞第11-13页
        1.1.4 骨骼肌损伤、修复的病理生理学第13页
    1.2 HET1介绍第13-14页
    1.3 Rho家族介绍第14-16页
    1.4 PAX7基因介绍第16-17页
    1.5 成肌调节因子(MRF)第17-21页
        1.5.1 成肌调节因子在胚胎发育中的表达第17-18页
        1.5.2 成肌调节因子的结构第18页
        1.5.3 调控成肌调节因子受到的信号途径第18-19页
        1.5.4 成肌调节因子的生物活性调控第19-20页
        1.5.5 成肌调节因子的靶标第20页
        1.5.6 模式动物研究肌调节因子的功能第20-21页
    1.6 肌细胞增强因子2(Mef2)介绍第21-22页
2.材料与方法第22-33页
    2.1 材料第22-24页
        2.1.1 生物信息学数据库和主要软件第22页
        2.1.2 抗体、引物和试剂第22页
        2.1.3 缓冲液和细胞培养基配置第22-23页
        2.1.4 主要仪器和实验耗材第23-24页
            2.1.4.1 实验仪器第23-24页
            2.1.4.2 实验耗材第24页
        2.1.5 实验动物第24页
    2.2 实验方法第24-33页
        2.2.1 利用心脏毒素构建肌肉损伤模型第24页
        2.2.2 小鼠基因组DNA提取和鉴定第24-25页
        2.2.3 Southern Blot第25-26页
        2.2.4 小鼠肌肉损伤后cDNA制备第26-27页
        2.2.5 逆转录PCR(RT-PCR)第27页
        2.2.6 小鼠骨骼肌组织蛋白质提取第27页
        2.2.7 蛋白质印迹第27-30页
        2.2.8 石蜡包埋、切片及HE染色第30-31页
        2.2.9 肌肉卫星细胞分离、培养,成肌细胞分化和融合成肌管第31-33页
3.结果与分析第33-42页
    3.1 HET全敲小鼠的建立第33-36页
        3.1.1 PCR鉴定HET全敲小鼠基因型第33-34页
        3.1.2 southern blot检测HET1全敲小鼠基因中,HET1基因片段缺失第34-35页
        3.1.3 HET1-null小鼠HET蛋白质表达丧失第35-36页
    3.2 HET1-NULL小鼠与野生型小鼠各组织形态观察第36-37页
    3.3 HET1-NULL小鼠和野生型小鼠肌肉再生情况第37-40页
        3.3.1 心脏毒素诱导骨骼肌损伤模型第37-38页
        3.3.2 RT-PCR分析小鼠骨骼肌损伤后肌细胞相关因子变化第38-39页
        3.3.3 HET1-NULL小鼠和野生型小鼠肌肉损伤修复情况第39-40页
    3.4 肌肉卫星细胞的分离、培养,成肌细胞分化和融合形成肌管第40-42页
4.讨论第42-45页
结语第45-46页
参考文献第46-53页
附录1第53-54页
附录2第54-55页
致谢第55-56页

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