| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1.1 植原体病害 | 第14-22页 |
| 1.1.1 植原体的危害 | 第14页 |
| 1.1.2 植原体引起的植物的症状 | 第14-15页 |
| 1.1.3 植原体的检测 | 第15-16页 |
| 1.1.4 植原体的分类 | 第16-17页 |
| 1.1.5 植原体在寄主体内的运动 | 第17-19页 |
| 1.1.6 植原体的基因组及对寄主的致病性 | 第19-22页 |
| 1.2 小麦蓝矮病 | 第22-25页 |
| 1.2.1 小麦蓝矮病的症状及危害 | 第22-23页 |
| 1.2.2 小麦蓝矮病的病原及其寄主范围 | 第23-24页 |
| 1.2.3 小麦蓝矮植原体的基因组 | 第24-25页 |
| 1.3 植物与植原体的互作研究 | 第25-27页 |
| 1.3.1 长春花为植原体的实验寄主 | 第25页 |
| 1.3.2 植物产生的生理生化变化 | 第25-27页 |
| 1.4 cDNA-AFLP技术分离差异表达基因 | 第27-30页 |
| 1.4.1 cDNA-AFLP技术的原理与方法 | 第28页 |
| 1.4.2 cDNA-AFLP技术特点 | 第28-29页 |
| 1.4.3 差异表达基因的分离技术在植物与植原体互作中的应用 | 第29-30页 |
| 1.5 植物PR蛋白研究进展 | 第30-33页 |
| 1.5.1 PR蛋白的分类和功能 | 第31-32页 |
| 1.5.2 PR蛋白的分布 | 第32-33页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 第二章 长春花与小麦蓝矮植原体互作过程中的差异基因表达谱分析 | 第34-60页 |
| 2.0 引言 | 第34页 |
| 2.1 材料、仪器和试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.1 材料 | 第34页 |
| 2.1.2 仪器和试剂 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-47页 |
| 2.2.1 小麦蓝矮植原体的接种与样品采集 | 第35页 |
| 2.2.2 总RNA的提取与纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.3 cDNA-AFLP表达谱分析 | 第36-41页 |
| 2.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-43页 |
| 2.2.5 差异条带的回收和纯化 | 第43-44页 |
| 2.2.6 差异条带的连接和转化 | 第44页 |
| 2.2.7 cDNA回收片段的测序及功能分析 | 第44-45页 |
| 2.2.8 cDNA回收片段的功能分析 | 第45页 |
| 2.2.9 qRT-PCR验证cDNA-AFLP的差异表达基因 | 第45-47页 |
| 2.3 结果与分析 | 第47-55页 |
| 2.3.1 长春花的症状表现 | 第47-48页 |
| 2.3.2 长春花花的总RNA提取 | 第48-49页 |
| 2.3.3 cDNA-AFLP表达谱分析 | 第49-54页 |
| 2.3.4 部分差异表达基因的qRT-PCR分析 | 第54-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-60页 |
| 2.4.1 WBD植原体引起的花绿变 | 第56-57页 |
| 2.4.2 植原体侵染后寄主植物的代谢 | 第57页 |
| 2.4.3 植原体侵染后防御相关基因的表达 | 第57-60页 |
| 第三章 长春花感染WBD植原体后体内内参基因的筛选 | 第60-71页 |
| 3.0 引言 | 第60页 |
| 3.1 材料和仪器 | 第60-61页 |
| 3.2 实验方法 | 第61-64页 |
| 3.2.1 长春花样品采集 | 第61页 |
| 3.2.2 总RNA的提取 | 第61页 |
| 3.2.3 长春花cDNA的合成 | 第61页 |
| 3.2.4 内参基因的筛选 | 第61-62页 |
| 3.2.5 qRT-PCR引物设计与检验 | 第62-63页 |
| 3.2.6 定量引物的扩增 | 第63页 |
| 3.2.7 候选内参基因表达稳定性的评价 | 第63页 |
| 3.2.8 感病长春花中CrDEF表达谱分析 | 第63-64页 |
| 3.3 结果与分析 | 第64-69页 |
| 3.3.1 定量引物的特异性检测与PCR扩增效率 | 第64页 |
| 3.3.2 内参基因的表达量 | 第64-66页 |
| 3.3.3 geNorm结果分析 | 第66-68页 |
| 3.3.4 NormFinder结果分析 | 第68页 |
| 3.3.5 内参基因的验证 | 第68-69页 |
| 3.4 讨论 | 第69-71页 |
| 第四章 长春花CrPR5 和CrPR6 基因全长的克隆与表达分析 | 第71-88页 |
| 4.0 引言 | 第71-72页 |
| 4.1 材料、仪器和试剂 | 第72页 |
| 4.2 实验方法 | 第72-76页 |
| 4.2.1 长春花样品采集 | 第72页 |
| 4.2.2 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第72页 |
| 4.2.3 CrPR5 和CrPR6 基因全长的克隆与分析 | 第72-75页 |
| 4.2.4 PR基因的表达谱分析 | 第75-76页 |
| 4.3 结果与分析 | 第76-86页 |
| 4.3.1 长春花感染JWB植原体后的症状表现 | 第76-77页 |
| 4.3.2 CrPR5 和CrPR6 基因的克隆 | 第77-79页 |
| 4.3.3 CrPR5 和CrPR6 基因序列分析 | 第79-84页 |
| 4.3.4 PR蛋白基因的表达谱分析 | 第84-86页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第86-88页 |
| 第五章 长春花CrCBSX3 基因的克隆与分析 | 第88-103页 |
| 5.0 引言 | 第88-89页 |
| 5.1 材料、仪器和试剂 | 第89页 |
| 5.2 实验方法 | 第89-95页 |
| 5.2.1 长春花样品采集 | 第89页 |
| 5.2.2 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第89页 |
| 5.2.3 CrCBSX3 基因全长的克隆与分析 | 第89-90页 |
| 5.2.4 Southern Blot | 第90-93页 |
| 5.2.5 qRT-PCR分析表达量的变化 | 第93页 |
| 5.2.6 CrCBSX3 的亚细胞定位分析 | 第93-95页 |
| 5.2.7 CrCBSX3 基因在本氏烟中超表达 | 第95页 |
| 5.3 结果与分析 | 第95-102页 |
| 5.3.1 CrCBSX3 基因的全长克隆 | 第95-96页 |
| 5.3.2 CrCBSX3 蛋白的序列分析 | 第96-98页 |
| 5.3.3 CrCBSX3 基因在长春花基因组中的拷贝数分析 | 第98-99页 |
| 5.3.4 CrCBSX3 基因的表达谱分析 | 第99页 |
| 5.3.5 CrCBSX3 的亚细胞定位分析 | 第99-101页 |
| 5.3.6 CrCBSX3 基因超表达抑制BAX诱导的细胞坏死 | 第101-102页 |
| 5.4 结论与讨论 | 第102-103页 |
| 第六章 结论和创新点 | 第103-105页 |
| 6.1 结论 | 第103-104页 |
| 6.2 创新点 | 第104页 |
| 6.3 进一步研究设想 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-120页 |
| 附件 | 第120-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
| 作者简介 | 第136页 |
