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茶小绿叶蝉Empoasca onukii Matsuda对短期高低温的响应及分子机制研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第14-30页
    1.1 茶小绿叶蝉研究概况第14-19页
        1.1.1 分布与为害第14-15页
        1.1.2 生物学及行为学习性第15-16页
        1.1.3 人工饲养技术第16页
        1.1.4 无公害防治技术第16-19页
    1.2 温度对昆虫的影响第19-23页
        1.2.1 低温胁迫对昆虫的影响第20-21页
        1.2.2 高温胁迫对昆虫的影响第21-23页
    1.3 保护酶系在昆虫抵御温度胁迫中的作用第23-25页
    1.4 热激蛋白在昆虫抵御温度胁迫中的作用第25-28页
        1.4.1 热激蛋白的发现及分类第25页
        1.4.2 热激蛋白的分子结构特征第25-26页
        1.4.3 热激蛋白基因的表达调控第26页
        1.4.4 热激蛋白的功能第26-28页
    1.5 选题依据、目的及意义第28-30页
第二章 不同温度下茶小绿叶蝉实验种群生命表研究第30-37页
    2.1 材料与方法第30-31页
        2.1.1 供试虫源第30页
        2.1.2 供试仪器第30页
        2.1.3 温度处理第30-31页
        2.1.4 繁殖力观测第31页
    2.2 分析方法第31页
    2.3 数据处理第31-32页
    2.4 结果与分析第32-35页
        2.4.1 温度对发育历期的影响第32-33页
        2.4.2 发育起点温度与有效积温第33页
        2.4.3 温度对成虫寿命的影响第33-34页
        2.4.4 不同温度处理下的生命表参数比较第34页
        2.4.5 温度对各龄期存活率的影响第34-35页
    2.5 结论与讨论第35-37页
第三章 短期高低温胁迫对茶小绿叶蝉成虫适应性的影响第37-43页
    3.1 试验材料第37-38页
        3.1.1 主要器材第37页
        3.1.2 试虫第37-38页
    3.2 试验方法第38页
        3.2.1 温度处理后成虫存活率的测定第38页
        3.2.2 短期高低温胁迫对成虫的影响第38页
        3.2.3 数据处理第38页
    3.3 结果与分析第38-41页
        3.3.1 温度处理对成虫存活率的影响第38-39页
        3.3.2 高低温胁迫对成虫寿命的影响第39-41页
        3.3.3 高低温胁迫对成虫产卵量的影响第41页
    3.4 小结与讨论第41-43页
第四章 茶小绿叶蝉成虫对不同温度的生理生化响应第43-53页
    4.1 试验材料第43-44页
        4.1.1 供试虫源第43-44页
        4.1.2 供试试剂第44页
        4.1.3 供试仪器第44页
    4.2 试验方法第44-48页
        4.2.1 温度处理第44页
        4.2.2 酶液提取及保护酶活性的测定第44-48页
    4.3 数据处理第48页
    4.4 结果与分析第48-52页
        4.4.1 不同温度对SOD和CuZn-SOD的影响第48-49页
        4.4.2 不同温度对POD的影响第49-50页
        4.4.3 不同温度对CAT的影响第50页
        4.4.4 不同温度对T-AOC的影响第50-51页
        4.4.5 不同温度对总蛋白含量的影响第51-52页
    4.5 讨论第52-53页
第五章 茶小绿叶蝉热激蛋白和内参基因的cDNA克隆及序列分析第53-82页
    5.1 试验材料第53-56页
        5.1.1 主要仪器设备第53-54页
        5.1.2 主要试剂第54-55页
        5.1.3 主要试剂的配制第55-56页
        5.1.4 供试虫源第56页
    5.2 试验方法第56-69页
        5.2.1 简并引物设计第56-57页
        5.2.2 总RNA提取第57页
        5.2.3 总RNA浓度测定第57页
        5.2.4 总RNA质量检测第57-58页
        5.2.5 合成cDNA第一链第58页
        5.2.6 PCR扩增反应及结果检测第58-59页
        5.2.7 PCR产物纯化第59-60页
        5.2.8 产物连接第60页
        5.2.9 连接产物转化第60页
        5.2.10 蓝白斑筛选第60页
        5.2.11 菌液PCR及结果检测第60-61页
        5.2.12 测序第61页
        5.2.13 cDNA3’末端扩增(3’RACE)第61-64页
        5.2.14 cDNA 5’末端扩增(5’RACE)第64-67页
        5.2.15 Hsp70 和Hsp90 的全长序列验证第67-68页
        5.2.16 序列分析第68-69页
    5.3 结果与分析第69-81页
        5.3.1 总RNA提取第69页
        5.3.2 cDNA片段扩增第69-72页
        5.3.3 基因 3’RACE扩增第72-73页
        5.3.4 基因 5’RACE扩增第73-74页
        5.3.5 基因全长序列验证第74页
        5.3.6 序列分析第74-81页
    5.4 小结与讨论第81-82页
第六章 高低温胁迫下Eohsp70 和Eohsp90 的mRNA表达第82-97页
    6.1 试验材料第82-84页
        6.1.1 主要器材和试剂第82-83页
        6.1.2 试虫第83-84页
    6.2 试验方法第84-87页
        6.2.1 高低温胁迫处理第84页
        6.2.2 总RNA提取第84页
        6.2.3 去除基因组DNA第84-85页
        6.2.4 反转录第85页
        6.2.5 qPCR第85-86页
        6.2.6 标准曲线的构建第86-87页
        6.2.7 数据处理第87页
    6.3 结果与分析第87-94页
        6.3.1 定量引物稳定性分析第87页
        6.3.2 定量引物质量检测第87-90页
        6.3.3 不同温度处理下的热激蛋白表达量第90-91页
        6.3.4 41℃不同时间处理下的热激蛋白表达量第91-93页
        6.3.5 0℃不同时间处理下的热激蛋白表达量第93-94页
    6.4 小结与讨论第94-97页
第七章 结论与创新第97-98页
    7.1 结论第97页
    7.2 本研究的创新点第97页
    7.3 展望第97-98页
参考文献第98-114页
致谢第114-115页
个人简介第115页

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