摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
1 绪论 | 第20-48页 |
1.1 鲜切果蔬 | 第20-25页 |
1.1.1 鲜切果蔬的发展 | 第20页 |
1.1.2 鲜切果蔬的生理变化 | 第20-22页 |
1.1.3 鲜切果蔬的微生物污染 | 第22-23页 |
1.1.4 鲜切果蔬的卫生管理与监控 | 第23-25页 |
1.2 食源性病原微生物及危害 | 第25-32页 |
1.2.1 食源性病原微生物 | 第25-30页 |
1.2.2 食源性疾病暴发 | 第30-32页 |
1.3 食源性病原微生物检测技术研究进展 | 第32-43页 |
1.3.1 分子生物学检测技术 | 第32-39页 |
1.3.2 免疫学检测技术 | 第39-41页 |
1.3.3 生物传感器检测技术 | 第41-42页 |
1.3.4 红外光谱检测技术 | 第42-43页 |
1.3.5 全自动微生物分析检测系统 | 第43页 |
1.4 食源性病原微生物检测中假阳性排除技术的研究进展 | 第43-45页 |
1.4.1 mRNA排除假阳性的活菌检测 | 第43-44页 |
1.4.2 叠氮溴化丙锭排除假阳性的活菌检测 | 第44-45页 |
1.5 论文的研究意义及内容 | 第45-48页 |
1.5.1 本论文研究目的及意义 | 第45-46页 |
1.5.2 论文研究主要内容 | 第46-48页 |
2 食源性病原微生物在鲜切水果中的生长状况 | 第48-59页 |
2.1 引言 | 第48页 |
2.2 实验材料与方法 | 第48-51页 |
2.2.1 实验仪器 | 第48-49页 |
2.2.2 实验试剂 | 第49页 |
2.2.3 实验菌株 | 第49-50页 |
2.2.4 实验方法 | 第50-51页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第51-58页 |
2.3.1 单核增生性李斯特菌在鲜切水果中的生长 | 第51-53页 |
2.3.2 金黄色葡萄球菌在鲜切水果中的生长 | 第53-55页 |
2.3.3 大肠杆菌O157:H7在鲜切水果中的生长 | 第55-56页 |
2.3.4 鼠伤寒沙门氏菌在鲜切水果中的生长 | 第56-58页 |
2.4 本章小结 | 第58-59页 |
3 鲜切果蔬中食源性病原微生物多重PCR快速检测技术 | 第59-80页 |
3.1 引言 | 第59页 |
3.2 实验材料与方法 | 第59-67页 |
3.2.1 实验仪器 | 第59-60页 |
3.2.2 实验试剂 | 第60-61页 |
3.2.3 实验菌种 | 第61-62页 |
3.2.4 实验方法 | 第62-67页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第67-79页 |
3.3.1 单一PCR扩增结果 | 第67-69页 |
3.3.2 多重PCR引物浓度优化结果 | 第69-70页 |
3.3.3 多重PCR反应液浓度优化结果 | 第70-72页 |
3.3.4 多重PCR退火温度优化结果 | 第72页 |
3.3.5 多重PCR延伸时间优化结果 | 第72-73页 |
3.3.6 多重PCR引物间特异性验证 | 第73-74页 |
3.3.7 多重PCR菌间特异性验证 | 第74-76页 |
3.3.8 多重PCR检出限验证结果 | 第76-77页 |
3.3.9 食源性病原微生物预富集多重PCR验证结果 | 第77-78页 |
3.3.10 人工污染鲜切果蔬样品验证结果 | 第78-79页 |
3.4 本章小结 | 第79-80页 |
4 鲜切果蔬中食源性病原微生物PMA-MqPCR快速检测技术 | 第80-108页 |
4.1 引言 | 第80页 |
4.2 实验材料与方法 | 第80-87页 |
4.2.1 实验仪器 | 第80-81页 |
4.2.2 实验试剂 | 第81页 |
4.2.3 实验菌种 | 第81-82页 |
4.2.4 实验方法 | 第82-87页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第87-107页 |
4.3.1 单一荧光定量PCR扩增结果 | 第87-89页 |
4.3.2 单一荧光定量PCR特异性验证结果 | 第89-91页 |
4.3.3 单一荧光定量PCR检出限验证结果 | 第91-93页 |
4.3.4 多重荧光定量PCR引物浓度优化 | 第93-94页 |
4.3.5 多重荧光定量PCR探针浓度优化 | 第94-96页 |
4.3.6 多重荧光定量PCR反应液浓度优化 | 第96-97页 |
4.3.7 多重荧光定量PCR退火温度优化 | 第97-98页 |
4.3.8 多重荧光定量PCR特异性验证结果 | 第98-99页 |
4.3.9 多重荧光定量PCR检出限验证结果 | 第99-100页 |
4.3.10 多重荧光定量PCR在鲜切果蔬中检出限验证结果 | 第100-101页 |
4.3.11 食源性病原微生物预富集 | 第101-104页 |
4.3.12 叠氮溴化丙锭(PMA)处理 | 第104-105页 |
4.3.13 人工污染鲜切哈密瓜和莴苣的活菌检出限验证 | 第105-107页 |
4.4 本章小结 | 第107-108页 |
5 鲜切果蔬中食源性病原微生物原位合成基因芯片快速检测技术 | 第108-125页 |
5.1 引言 | 第108-109页 |
5.2 实验材料与方法 | 第109-113页 |
5.2.1 实验仪器 | 第109页 |
5.2.2 实验材料和试剂 | 第109-110页 |
5.2.3 实验方法 | 第110-113页 |
5.3 实验结果与分析 | 第113-124页 |
5.3.1 多重PCR扩增结果 | 第113-114页 |
5.3.2 芯片清洗温度优化 | 第114-115页 |
5.3.3 探针初步筛选 | 第115-117页 |
5.3.4 筛选探针菌间验证 | 第117-119页 |
5.3.5 鲜切果蔬中人工染菌验证结果 | 第119-124页 |
5.4 本章小结 | 第124-125页 |
6 结论、创新点与展望 | 第125-128页 |
6.1 结论 | 第125页 |
6.2 创新点 | 第125-126页 |
6.3 展望 | 第126-128页 |
参考文献 | 第128-145页 |
附录A 病原菌及基因序列 | 第145-147页 |
作者简介 | 第147页 |
攻读博士学位期间参与的科研项目及科研成果 | 第147-150页 |
致谢 | 第150-151页 |