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北方四省致病疫霉致病型及拮抗菌复合发酵抑菌作用的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 引言第14-26页
    1.1 致病疫霉的生物学特征第14-15页
    1.2 马铃薯晚疫病发病特征第15-16页
    1.3 致病疫霉表现型和基因型多样性第16-21页
        1.3.1 致病疫霉表现型结构第16-18页
        1.3.2 致病疫霉基因型结构第18-21页
    1.4 马铃薯晚疫病的生物防治研究进展第21-24页
        1.4.1 单一生物制剂第22-23页
        1.4.2 复合生物制剂第23-24页
    1.5 本研究的目的及意义第24-26页
第2章 北方四省致病疫霉生理小种的组成及分布第26-37页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 供试培养基第26-27页
        2.1.2 实验试剂第27页
        2.1.3 实验仪器第27页
    2.2 实验方法第27-29页
        2.2.1 马铃薯晚疫病病害标本的采集第27页
        2.2.2 致病疫霉的分离、纯化及保存第27-28页
        2.2.3 鉴别寄主的种植与管理第28页
        2.2.4 供试菌株的准备第28页
        2.2.5 接种致病疫霉及生理小种的鉴定第28-29页
    2.3 结果与分析第29-34页
        2.3.1 马铃薯晚疫病病害标本的采集第30页
        2.3.2 致病疫霉的分离、纯化及保存第30-32页
        2.3.3 致病疫霉生理小种的组成及分布第32-34页
    2.4 讨论第34-37页
        2.4.1 致病疫霉的分离方法第34-35页
        2.4.2 标本采集时间第35-36页
        2.4.3 致病疫霉的生理小种及优势生理小种第36-37页
第3章 北方四省致病疫霉SSR基因型分析第37-70页
    3.1 实验材料第37-39页
        3.1.1 供试致病疫霉第37页
        3.1.2 实验试剂第37-38页
        3.1.3 实验仪器第38页
        3.1.4 SSR引物第38-39页
    3.2 实验方法第39-46页
        3.2.1 致病疫霉基因组DNA的提取第39-40页
        3.2.2 模板DNA浓度与纯度的检测第40页
        3.2.3 SSR反应体系和扩增程序第40-41页
        3.2.4 PCR产物检测第41-42页
        3.2.5 利用Pi4B和Pi4G两对引物划分致病疫霉的基因型第42-44页
        3.2.6 利用15 对引物划分致病疫霉的基因型第44页
        3.2.7 致病疫霉群体遗传多样性数据的分析第44-46页
    3.3 结果与分析第46-67页
        3.3.1 致病疫霉基因组DNA的提取第46-47页
        3.3.2 模板DNA浓度与纯度的检测第47-48页
        3.3.3 PCR产物检测第48-57页
        3.3.4 利用Pi48和Pi4G两对引物划分致病疫霉的基因型第57-59页
        3.3.5 利用15 对引物划分致病疫霉的基因型第59-60页
        3.3.6 致病疫霉遗传多样性数据处理第60-67页
    3.4 讨论第67-70页
        3.4.1 优势基因型和新基因型的出现第67-68页
        3.4.2 遗传多样性的比较第68-69页
        3.4.3 致病疫霉群体的遗传多样性与地理来源和生理小种的相关性第69-70页
第4章 复配发酵产物对致病疫霉的抑制作用及其机理的研究第70-89页
    4.1 实验材料第70-71页
        4.1.1 供试菌株和植物第70页
        4.1.2 供试培养基第70-71页
        4.1.3 实验药品第71页
        4.1.4 实验仪器第71页
    4.2 实验方法第71-76页
        4.2.1 供试拮抗菌共培养的可行性分析第71页
        4.2.2 拮抗菌发酵液的制备第71-72页
        4.2.3 放线菌单独及复合发酵液的抑菌作用第72页
        4.2.4 真菌发酵液单独的抑菌效果第72页
        4.2.5 拮抗菌培养方式的确定第72页
        4.2.6 复配发酵液的抑菌作用第72-73页
        4.2.7 发酵液抑菌作用的持效时间第73页
        4.2.8 发酵液在离体块茎及试管苗上的防病作用第73-76页
        4.2.9 发酵液对游动孢子释放的影响第76页
        4.2.10 发酵液对菌丝体形态的影响第76页
        4.2.11 超声波破碎对发酵液抑菌效果的影响第76页
    4.3 结果与分析第76-87页
        4.3.1 供试拮抗菌共培养的可行性确定第76-77页
        4.3.2 放线菌单独及复合发酵液的抑菌作用第77-78页
        4.3.3 真菌发酵液单独的抑菌效果第78页
        4.3.4 拮抗菌培养方式的确定第78页
        4.3.5 复配发酵液的抑菌作用第78-80页
        4.3.6 发酵液抑菌作用的持效时间第80页
        4.3.7 发酵液在离体组织及试管苗上的防病作用第80-84页
        4.3.8 发酵液对游动孢子释放的影响第84-85页
        4.3.9 发酵液对菌丝体形态的影响第85页
        4.3.10 超声波破碎对发酵液抑菌效果的影响第85-87页
    4.4 讨论第87-89页
第5章 拮抗菌发酵液处理后马铃薯块茎中抗性相关酶活性变化第89-103页
    5.1 实验材料第89-90页
        5.1.1 供试菌株第90页
        5.1.2 供试培养基第90页
        5.1.3 实验仪器第90页
    5.2 实验方法第90-94页
        5.2.1 马铃薯块茎的处理及取样第90页
        5.2.2 酶液的提取第90-91页
        5.2.3 酶活的测定第91-92页
        5.2.4 丙二醛(MDA)含量的变化第92-93页
        5.2.5 可溶性蛋白的提取及含量测定第93页
        5.2.6 可溶性糖的提取及含量测定第93-94页
    5.3 结果与分析第94-100页
        5.3.1 不同浓度复配发酵液在马铃薯块茎圆片上的病害预防效果第94页
        5.3.2 块茎中抗性相关酶活性的变化第94-98页
        5.3.3 丙二醛含量的变化第98页
        5.3.4 可溶性蛋白含量的变化第98-99页
        5.3.5 可溶性糖含量的变化第99-100页
    5.4 讨论第100-103页
        5.4.1 酶活的变化趋势第100-101页
        5.4.2 防御酶系统可能的作用机制第101-103页
第6章 复配发酵产物理化性质和拮抗物质的初步研究第103-115页
    6.1 实验材料第103页
        6.1.1 供试菌株第103页
        6.1.2 供试培养基第103页
        6.1.3 实验药品及仪器第103页
    6.2 实验方法第103-106页
        6.2.1 复配发酵产物稳定性的研究第103-105页
        6.2.2 复配发酵产物的极性测定第105页
        6.2.3 复配发酵产物不同浓度对致病疫霉的抑制效果的影响第105页
        6.2.4 透析对复配发酵产物抑菌活性的影响第105页
        6.2.5 复配发酵产物中拮抗物质性质的初步分析第105-106页
    6.3 结果与分析第106-113页
        6.3.1 复配发酵产物的稳定性第106-111页
        6.3.2 复配发酵产物的极性测定第111页
        6.3.3 不同浓度复配发酵产物对致病疫霉的抑制效果第111-112页
        6.3.4 透析对复配发酵产物抑菌活性的影响第112-113页
        6.3.5 复配发酵产物拮抗物质性质的初步分析第113页
    6.4 讨论第113-115页
        6.4.1 复配发酵液的稳定性第113页
        6.4.2 复配发酵液中的拮抗物质第113-115页
结论第115-117页
参考文献第117-131页
附录1 DNA提取所用试剂的配制第131-132页
附录2 SSR分析所用试剂的配制第132页
附录3 酶活测定试剂的配制第132-134页
附录4 SSR基因型划分第134-142页
附录5 图版第142-143页
致谢第143-144页
攻读学位期间取得的科研成果第144页

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