摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 引言 | 第14-26页 |
1.1 致病疫霉的生物学特征 | 第14-15页 |
1.2 马铃薯晚疫病发病特征 | 第15-16页 |
1.3 致病疫霉表现型和基因型多样性 | 第16-21页 |
1.3.1 致病疫霉表现型结构 | 第16-18页 |
1.3.2 致病疫霉基因型结构 | 第18-21页 |
1.4 马铃薯晚疫病的生物防治研究进展 | 第21-24页 |
1.4.1 单一生物制剂 | 第22-23页 |
1.4.2 复合生物制剂 | 第23-24页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
第2章 北方四省致病疫霉生理小种的组成及分布 | 第26-37页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 供试培养基 | 第26-27页 |
2.1.2 实验试剂 | 第27页 |
2.1.3 实验仪器 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-29页 |
2.2.1 马铃薯晚疫病病害标本的采集 | 第27页 |
2.2.2 致病疫霉的分离、纯化及保存 | 第27-28页 |
2.2.3 鉴别寄主的种植与管理 | 第28页 |
2.2.4 供试菌株的准备 | 第28页 |
2.2.5 接种致病疫霉及生理小种的鉴定 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
2.3.1 马铃薯晚疫病病害标本的采集 | 第30页 |
2.3.2 致病疫霉的分离、纯化及保存 | 第30-32页 |
2.3.3 致病疫霉生理小种的组成及分布 | 第32-34页 |
2.4 讨论 | 第34-37页 |
2.4.1 致病疫霉的分离方法 | 第34-35页 |
2.4.2 标本采集时间 | 第35-36页 |
2.4.3 致病疫霉的生理小种及优势生理小种 | 第36-37页 |
第3章 北方四省致病疫霉SSR基因型分析 | 第37-70页 |
3.1 实验材料 | 第37-39页 |
3.1.1 供试致病疫霉 | 第37页 |
3.1.2 实验试剂 | 第37-38页 |
3.1.3 实验仪器 | 第38页 |
3.1.4 SSR引物 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-46页 |
3.2.1 致病疫霉基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
3.2.2 模板DNA浓度与纯度的检测 | 第40页 |
3.2.3 SSR反应体系和扩增程序 | 第40-41页 |
3.2.4 PCR产物检测 | 第41-42页 |
3.2.5 利用Pi4B和Pi4G两对引物划分致病疫霉的基因型 | 第42-44页 |
3.2.6 利用15 对引物划分致病疫霉的基因型 | 第44页 |
3.2.7 致病疫霉群体遗传多样性数据的分析 | 第44-46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-67页 |
3.3.1 致病疫霉基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
3.3.2 模板DNA浓度与纯度的检测 | 第47-48页 |
3.3.3 PCR产物检测 | 第48-57页 |
3.3.4 利用Pi48和Pi4G两对引物划分致病疫霉的基因型 | 第57-59页 |
3.3.5 利用15 对引物划分致病疫霉的基因型 | 第59-60页 |
3.3.6 致病疫霉遗传多样性数据处理 | 第60-67页 |
3.4 讨论 | 第67-70页 |
3.4.1 优势基因型和新基因型的出现 | 第67-68页 |
3.4.2 遗传多样性的比较 | 第68-69页 |
3.4.3 致病疫霉群体的遗传多样性与地理来源和生理小种的相关性 | 第69-70页 |
第4章 复配发酵产物对致病疫霉的抑制作用及其机理的研究 | 第70-89页 |
4.1 实验材料 | 第70-71页 |
4.1.1 供试菌株和植物 | 第70页 |
4.1.2 供试培养基 | 第70-71页 |
4.1.3 实验药品 | 第71页 |
4.1.4 实验仪器 | 第71页 |
4.2 实验方法 | 第71-76页 |
4.2.1 供试拮抗菌共培养的可行性分析 | 第71页 |
4.2.2 拮抗菌发酵液的制备 | 第71-72页 |
4.2.3 放线菌单独及复合发酵液的抑菌作用 | 第72页 |
4.2.4 真菌发酵液单独的抑菌效果 | 第72页 |
4.2.5 拮抗菌培养方式的确定 | 第72页 |
4.2.6 复配发酵液的抑菌作用 | 第72-73页 |
4.2.7 发酵液抑菌作用的持效时间 | 第73页 |
4.2.8 发酵液在离体块茎及试管苗上的防病作用 | 第73-76页 |
4.2.9 发酵液对游动孢子释放的影响 | 第76页 |
4.2.10 发酵液对菌丝体形态的影响 | 第76页 |
4.2.11 超声波破碎对发酵液抑菌效果的影响 | 第76页 |
4.3 结果与分析 | 第76-87页 |
4.3.1 供试拮抗菌共培养的可行性确定 | 第76-77页 |
4.3.2 放线菌单独及复合发酵液的抑菌作用 | 第77-78页 |
4.3.3 真菌发酵液单独的抑菌效果 | 第78页 |
4.3.4 拮抗菌培养方式的确定 | 第78页 |
4.3.5 复配发酵液的抑菌作用 | 第78-80页 |
4.3.6 发酵液抑菌作用的持效时间 | 第80页 |
4.3.7 发酵液在离体组织及试管苗上的防病作用 | 第80-84页 |
4.3.8 发酵液对游动孢子释放的影响 | 第84-85页 |
4.3.9 发酵液对菌丝体形态的影响 | 第85页 |
4.3.10 超声波破碎对发酵液抑菌效果的影响 | 第85-87页 |
4.4 讨论 | 第87-89页 |
第5章 拮抗菌发酵液处理后马铃薯块茎中抗性相关酶活性变化 | 第89-103页 |
5.1 实验材料 | 第89-90页 |
5.1.1 供试菌株 | 第90页 |
5.1.2 供试培养基 | 第90页 |
5.1.3 实验仪器 | 第90页 |
5.2 实验方法 | 第90-94页 |
5.2.1 马铃薯块茎的处理及取样 | 第90页 |
5.2.2 酶液的提取 | 第90-91页 |
5.2.3 酶活的测定 | 第91-92页 |
5.2.4 丙二醛(MDA)含量的变化 | 第92-93页 |
5.2.5 可溶性蛋白的提取及含量测定 | 第93页 |
5.2.6 可溶性糖的提取及含量测定 | 第93-94页 |
5.3 结果与分析 | 第94-100页 |
5.3.1 不同浓度复配发酵液在马铃薯块茎圆片上的病害预防效果 | 第94页 |
5.3.2 块茎中抗性相关酶活性的变化 | 第94-98页 |
5.3.3 丙二醛含量的变化 | 第98页 |
5.3.4 可溶性蛋白含量的变化 | 第98-99页 |
5.3.5 可溶性糖含量的变化 | 第99-100页 |
5.4 讨论 | 第100-103页 |
5.4.1 酶活的变化趋势 | 第100-101页 |
5.4.2 防御酶系统可能的作用机制 | 第101-103页 |
第6章 复配发酵产物理化性质和拮抗物质的初步研究 | 第103-115页 |
6.1 实验材料 | 第103页 |
6.1.1 供试菌株 | 第103页 |
6.1.2 供试培养基 | 第103页 |
6.1.3 实验药品及仪器 | 第103页 |
6.2 实验方法 | 第103-106页 |
6.2.1 复配发酵产物稳定性的研究 | 第103-105页 |
6.2.2 复配发酵产物的极性测定 | 第105页 |
6.2.3 复配发酵产物不同浓度对致病疫霉的抑制效果的影响 | 第105页 |
6.2.4 透析对复配发酵产物抑菌活性的影响 | 第105页 |
6.2.5 复配发酵产物中拮抗物质性质的初步分析 | 第105-106页 |
6.3 结果与分析 | 第106-113页 |
6.3.1 复配发酵产物的稳定性 | 第106-111页 |
6.3.2 复配发酵产物的极性测定 | 第111页 |
6.3.3 不同浓度复配发酵产物对致病疫霉的抑制效果 | 第111-112页 |
6.3.4 透析对复配发酵产物抑菌活性的影响 | 第112-113页 |
6.3.5 复配发酵产物拮抗物质性质的初步分析 | 第113页 |
6.4 讨论 | 第113-115页 |
6.4.1 复配发酵液的稳定性 | 第113页 |
6.4.2 复配发酵液中的拮抗物质 | 第113-115页 |
结论 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-131页 |
附录1 DNA提取所用试剂的配制 | 第131-132页 |
附录2 SSR分析所用试剂的配制 | 第132页 |
附录3 酶活测定试剂的配制 | 第132-134页 |
附录4 SSR基因型划分 | 第134-142页 |
附录5 图版 | 第142-143页 |
致谢 | 第143-144页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第144页 |