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多头带绦虫四川株六钩蚴Tm45W基因的克隆与原核表达

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-23页
 1.动物脑多头蚴病的研究进展第10-17页
   ·流行病学第10-11页
   ·生物学第11页
     ·虫卵的生物学特性第11页
     ·脑多头蚴细胞系第11页
   ·致病作用与临床症状第11-12页
   ·病理变化第12-13页
   ·免疫学第13-14页
     ·抗原成份分析第13页
     ·不同抗原成份免疫原性第13-14页
   ·分子生物学第14-16页
     ·分子分类第14页
     ·抗原基因第14-16页
   ·诊断与防治第16-17页
 2.带科绦虫45W基因的研究进展第17-22页
   ·45W基因的来源第17页
   ·45W基因的结构及特征第17-19页
   ·带科绦虫45W蛋白第19页
   ·带科绦虫45W疫苗及其免疫应答特点第19-22页
   ·展望第22页
 3.实验目的和意义第22-23页
第二章 多头带绦虫六钩蚴基因Tm45W的克隆与原核表达第23-58页
 1.材料与方法第23-37页
   ·试验材料第23-26页
     ·试验样品第23页
     ·主要试剂第23页
     ·菌株及质粒载体第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·培养基和常用溶液的配制第24-26页
     ·主要生物信息学数据库和计算机软件第26页
   ·试验方法第26-37页
     ·多头带绦虫六钩蚴的孵化与激活第26页
     ·多头带绦虫六钩蚴基因Tm45W的克隆第26-29页
     ·多头带绦虫六钩蚴基因Tm45W的原核表达载体构建第29-32页
     ·重组pET-32a(+)-Tm45W质粒在大肠杆菌中的诱导表达第32-36页
     ·重组pET-32a(+)-Tm45W质粒表达产物的免疫原性分析第36-37页
 2.试验结果第37-54页
   ·多带绦虫六钩蚴Tm45W基因的克隆第37-43页
     ·六钩蚴Tm45W基因的PCR扩增第37-38页
     ·重组克隆质粒的PCR鉴定第38页
     ·重组克隆质粒的序列鉴定第38页
     ·重组克隆质粒的序列分析第38-40页
     ·Tm45W基因片断的蛋白质生物信息学分析第40-43页
   ·Tm45W基因的亚克隆第43-44页
     ·加酶切位点引物的PCR扩增第43页
     ·重组质粒的PCR与酶切鉴定第43-44页
   ·Tm45W基因重组表达质粒的构建与鉴定第44-45页
     ·重组表达质粒的双酶切鉴定第44-45页
     ·重组表达质粒的序列鉴定第45页
   ·重组表达质粒的诱导表达第45-46页
   ·重组质粒表达条件的优化第46-48页
     ·IPTG浓度的优化第46页
     ·诱导时间的优化第46-47页
     ·诱导温度的优化第47-48页
   ·重组表达蛋白可溶性分析第48页
   ·融合蛋白表达产物Western-Blotting检测第48-49页
   ·免疫前后小鼠血清抗体的ELISA检测结果第49-54页
     ·小鼠血清中IgG、IgG1和IgG2a的检测结果第49-52页
     ·小鼠血清中IgM和IgE的检测结果第52-54页
 3.讨论第54-58页
   ·关于多头带绦虫六钩蚴总RNA的抽提第54页
   ·Tm45W基因的扩增第54-55页
   ·Tm45W基因在原核表达系统pET-32a(+)中的表达第55页
   ·包涵体的形成及纯化第55-56页
   ·表达产物的小鼠免疫及其抗体的检测第56-58页
第三章 结论与创新点第58-59页
 1 结论第58页
 2 创新点第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间发表的学术论文第67页

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