中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-23页 |
1.动物脑多头蚴病的研究进展 | 第10-17页 |
·流行病学 | 第10-11页 |
·生物学 | 第11页 |
·虫卵的生物学特性 | 第11页 |
·脑多头蚴细胞系 | 第11页 |
·致病作用与临床症状 | 第11-12页 |
·病理变化 | 第12-13页 |
·免疫学 | 第13-14页 |
·抗原成份分析 | 第13页 |
·不同抗原成份免疫原性 | 第13-14页 |
·分子生物学 | 第14-16页 |
·分子分类 | 第14页 |
·抗原基因 | 第14-16页 |
·诊断与防治 | 第16-17页 |
2.带科绦虫45W基因的研究进展 | 第17-22页 |
·45W基因的来源 | 第17页 |
·45W基因的结构及特征 | 第17-19页 |
·带科绦虫45W蛋白 | 第19页 |
·带科绦虫45W疫苗及其免疫应答特点 | 第19-22页 |
·展望 | 第22页 |
3.实验目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 多头带绦虫六钩蚴基因Tm45W的克隆与原核表达 | 第23-58页 |
1.材料与方法 | 第23-37页 |
·试验材料 | 第23-26页 |
·试验样品 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·菌株及质粒载体 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·培养基和常用溶液的配制 | 第24-26页 |
·主要生物信息学数据库和计算机软件 | 第26页 |
·试验方法 | 第26-37页 |
·多头带绦虫六钩蚴的孵化与激活 | 第26页 |
·多头带绦虫六钩蚴基因Tm45W的克隆 | 第26-29页 |
·多头带绦虫六钩蚴基因Tm45W的原核表达载体构建 | 第29-32页 |
·重组pET-32a(+)-Tm45W质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第32-36页 |
·重组pET-32a(+)-Tm45W质粒表达产物的免疫原性分析 | 第36-37页 |
2.试验结果 | 第37-54页 |
·多带绦虫六钩蚴Tm45W基因的克隆 | 第37-43页 |
·六钩蚴Tm45W基因的PCR扩增 | 第37-38页 |
·重组克隆质粒的PCR鉴定 | 第38页 |
·重组克隆质粒的序列鉴定 | 第38页 |
·重组克隆质粒的序列分析 | 第38-40页 |
·Tm45W基因片断的蛋白质生物信息学分析 | 第40-43页 |
·Tm45W基因的亚克隆 | 第43-44页 |
·加酶切位点引物的PCR扩增 | 第43页 |
·重组质粒的PCR与酶切鉴定 | 第43-44页 |
·Tm45W基因重组表达质粒的构建与鉴定 | 第44-45页 |
·重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第44-45页 |
·重组表达质粒的序列鉴定 | 第45页 |
·重组表达质粒的诱导表达 | 第45-46页 |
·重组质粒表达条件的优化 | 第46-48页 |
·IPTG浓度的优化 | 第46页 |
·诱导时间的优化 | 第46-47页 |
·诱导温度的优化 | 第47-48页 |
·重组表达蛋白可溶性分析 | 第48页 |
·融合蛋白表达产物Western-Blotting检测 | 第48-49页 |
·免疫前后小鼠血清抗体的ELISA检测结果 | 第49-54页 |
·小鼠血清中IgG、IgG1和IgG2a的检测结果 | 第49-52页 |
·小鼠血清中IgM和IgE的检测结果 | 第52-54页 |
3.讨论 | 第54-58页 |
·关于多头带绦虫六钩蚴总RNA的抽提 | 第54页 |
·Tm45W基因的扩增 | 第54-55页 |
·Tm45W基因在原核表达系统pET-32a(+)中的表达 | 第55页 |
·包涵体的形成及纯化 | 第55-56页 |
·表达产物的小鼠免疫及其抗体的检测 | 第56-58页 |
第三章 结论与创新点 | 第58-59页 |
1 结论 | 第58页 |
2 创新点 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第67页 |