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猕猴源肺炎链球菌分离和鉴定及FQ-PCR建立和在阐明其侵染机制研究中的应用

本文创新性研究工作第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-11页
缩略词表第11-12页
前言第12-16页
1 材料与方法第16-25页
   ·试验材料第16-18页
     ·菌株第16页
     ·试验动物第16页
     ·主要试验仪器第16页
     ·主要购买试剂及其它配制试剂第16-18页
   ·猕猴源肺炎链球菌菌株的分离和鉴定第18-19页
     ·猕猴源肺炎链球菌菌株的分离第18页
     ·猕猴源肺炎链球菌菌株的鉴定第18-19页
       ·革兰氏染色镜检第18页
       ·胆汁溶解试验第18页
       ·奥谱托欣敏感试验第18页
       ·小鼠毒力试验第18-19页
   ·肺炎链球菌种特异性常规PCR方法的建立第19-20页
     ·常规PCR引物的设计第19页
     ·细菌培养第19-20页
     ·细菌基因组DNA.的提取第20页
     ·常规PCR反应的建立与优化第20页
     ·常规PCR的特异性试验第20页
   ·肺炎链球菌种特异性FQ-PCR方法的建立第20-23页
     ·定量PCR引物第20-21页
     ·FQ-PCR标准品目的DNA的的制备第21页
     ·定量PCR的建立及反应条件的优化第21页
     ·定量PCR标准品目的DNA模板浓度的测定第21-22页
     ·定量PCR标准曲线的制作第22页
     ·FQ-PCR检测标准品模板的敏感性第22页
     ·FQ-PCR检测细菌数的敏感性第22页
     ·FQ-PCR检测含有外源DNA背景的准确性第22页
     ·FQ-PCR的重复性试验第22-23页
     ·FQ-PCR的特异性试验第23页
     ·细菌分离鉴定、PCR与FQ-PCR的比较第23页
   ·人工疾病模型中病原动态分布规律的定量研究第23-25页
     ·实验小鼠对肺炎链球菌的血清学检测第23页
     ·细菌计数(CFU)第23页
     ·接种方案第23-24页
     ·采样方案第24-25页
     ·样品的处理第25页
     ·样品的定量检测第25页
2 结果第25-38页
   ·猕猴源肺炎链球菌菌株的分离和鉴定第25-27页
     ·猕猴源肺炎链球菌菌株的分离第25页
     ·猕猴源肺炎链球菌菌株的鉴定第25-27页
       ·革兰氏染色镜检第25-26页
       ·胆汁溶解试验第26页
       ·奥谱托欣敏感试验第26页
       ·小鼠毒力试验第26-27页
   ·常规PCR反应条件的优化第27页
   ·特异性试验第27-28页
   ·肺炎链球菌种特异性FQ-PCR引物的设计第28-29页
   ·FQ-PCR反应条件的优化第29页
   ·FQ-PCR标准曲线的制作第29-30页
   ·FQ-PCR检测标准品DNA模板的敏感性第30-31页
   ·FQ-PCR检测细菌数的敏感性第31页
   ·FQ-PCR特异性试验第31-32页
   ·重复性试验第32页
   ·FQ-PCR检测含组织DNA背景的准确性第32-33页
   ·常规细菌分离鉴定、PCR与FQ-PCR的比较第33-34页
   ·肺炎链球菌人工感染动物侵染机制的研究第34-38页
     ·实验动物的ELISA检测结果第34页
     ·肺炎链球菌人工感染动物体内的动态分布情况第34-38页
3 讨论第38-46页
   ·猕猴源肺炎链球菌菌株的分离和鉴定第38页
   ·检测肺炎链球菌种特异性FQ-PCR方法的建立第38-39页
   ·检测肺炎链球菌种特异性FQ-PCR方法与现有检测方法的比较及其意义第39-40页
   ·肺炎链球菌在呼吸道的侵染机制第40-42页
   ·肺炎链球菌在内脏器官中的侵染机制第42-43页
   ·肺炎链球菌在免疫器官中的侵染机制第43-44页
   ·宿主对肺炎链球菌的防御能力第44-45页
   ·肺炎链球菌感染与宿主细胞的关系第45页
   ·肺炎链球菌在呼吸道中多呈潜伏感染的原因分析第45-46页
   ·肺炎链球菌感染与血脑屏障的关系第46页
4 结论第46-48页
参考文献第48-61页
致谢第61-62页
攻读硕士学位期间发表论文情况第62页

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