| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 苔藓植物简介 | 第12页 |
| 1.2 干旱胁迫对植物的影响 | 第12-17页 |
| 1.2.1 植物的抗旱性 | 第13页 |
| 1.2.2 植物抗旱基因的研究 | 第13-17页 |
| 1.3 胁迫响应氧化还原蛋白基因、过氧化物酶基因、H~+-ATPase 基因研究 | 第17-19页 |
| 1.3.1 胁迫响应氧化还原蛋白基因的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.2 过氧化物酶基因的研究 | 第18-19页 |
| 1.3.3 H~+-ATPase 基因的研究 | 第19页 |
| 1.4 苔藓植物国内外研究现状 | 第19-21页 |
| 1.4.1 苔藓植物国内研究现状 | 第20页 |
| 1.4.2 苔藓植物国外研究现状 | 第20-21页 |
| 1.5 本文研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 2 毛尖紫萼藓 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因 3'RACE 克隆 | 第23-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 总 RNA 的提取与纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.2 cDNA 第一链的合成 | 第26页 |
| 2.2.3 3'RACE 引物设计 | 第26-27页 |
| 2.2.4 3'RACE 反应 | 第27页 |
| 2.2.5 PCR 凝胶产物回收 | 第27-28页 |
| 2.2.6 目的基因与 pMD-18T simple 载体连接 | 第28页 |
| 2.2.7 大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.8 连接产物的转化 | 第29页 |
| 2.2.9 测序 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.3.1 总 RNA 的提取结果 | 第29-30页 |
| 2.3.2 反转录成 cDNA 结果 | 第30-31页 |
| 2.3.3 3'RACE 结果 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 3 毛尖紫萼藓 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因克隆及生物信息学分析 | 第33-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第33页 |
| 3.2.2 总 RNA 的提取与纯化 | 第33页 |
| 3.2.3 cDNA 的合成 | 第33-34页 |
| 3.2.4 PCR 扩增 | 第34页 |
| 3.2.5 PCR 产物回收 | 第34页 |
| 3.2.6 目的基因与 pMD-18T simple 载体连接 | 第34页 |
| 3.2.7 大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 3.2.8 连接产物的转化 | 第35页 |
| 3.2.9 克隆质粒的提取 | 第35页 |
| 3.2.10 重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.11 测序 | 第36页 |
| 3.3 毛尖紫萼藓 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因的生物信息学分析 | 第36页 |
| 3.4 结果与分析 | 第36-52页 |
| 3.4.1 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因的 cDNA 扩增 | 第36-37页 |
| 3.4.2 重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.4.3 测序结果分析 | 第38-40页 |
| 3.4.4 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因的生物信息学分析 | 第40-52页 |
| 3.5 讨论 | 第52-55页 |
| 4 毛尖紫萼藓 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因的表达分析 | 第55-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 4.2.1 荧光定量 PCR 引物设计 | 第55页 |
| 4.2.2 PCR 扩增 | 第55-56页 |
| 4.2.3 标准样品的制备 | 第56页 |
| 4.2.4 荧光定量 PCR 的反应体系及程序 | 第56页 |
| 4.2.5 2~(-△△Ct)法分析数据 | 第56-57页 |
| 4.3 结果与分析 | 第57-59页 |
| 4.3.1 引物特异性检测 | 第57-58页 |
| 4.3.2 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因表达分析 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-60页 |
| 5 毛尖紫萼藓 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因表达载体的构建 | 第60-68页 |
| 5.1 材料 | 第60页 |
| 5.2 方法 | 第60-62页 |
| 5.2.1 提取表达载体 pRI101-AN 质粒 | 第60页 |
| 5.2.2 双酶切 | 第60页 |
| 5.2.3 GpSRORP、GpPOD、GpMCMF 基因与表达载体 pRI101-AN 的连接 | 第60页 |
| 5.2.4 重组质粒的鉴定 | 第60-61页 |
| 5.2.5 测序 | 第61页 |
| 5.2.6 根癌农杆菌 EHA105 感受态细胞的制备 | 第61页 |
| 5.2.7 重组质粒的农杆菌转化 | 第61页 |
| 5.2.8 农杆菌转化子的 PCR 鉴定 | 第61-62页 |
| 5.2.9 侵染烟草 | 第62页 |
| 5.3 结果与分析 | 第62-66页 |
| 5.3.1 表达载体 pRI101-AN 的双酶切 | 第62-63页 |
| 5.3.2 重组质粒的鉴定 | 第63-65页 |
| 5.3.3 农杆菌转化子的 PCR 鉴定 | 第65-66页 |
| 5.3.4 侵染烟草 | 第66页 |
| 5.4 讨论 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
