| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表（Abbreviation） | 第11-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1.1 抗病毒天然免疫概述 | 第14-24页 |
| 1.1.1 抗病毒天然免疫简介 | 第14页 |
| 1.1.2 天然免疫的模式识别受体 | 第14-17页 |
| 1.1.3 病毒诱导Ⅰ型干扰素产生的信号通路 | 第17-20页 |
| 1.1.4 Ⅰ型干扰素诱导的信号转导 | 第20-22页 |
| 1.1.5 Ⅰ型干扰素及干扰素刺激基因的转录激活机制 | 第22-24页 |
| 1.2 病毒蛋白拮抗干扰素应答的机制 | 第24-27页 |
| 1.2.1 病毒蛋白拮抗Ⅰ型干扰素产生 | 第24-26页 |
| 1.2.2 病毒蛋白拮抗Ⅰ型干扰素信号转导 | 第26-27页 |
| 1.2.3 病毒蛋白的亚细胞定位与其干扰素应答拮抗 | 第27页 |
| 1.3 猪博卡病毒的研究进展 | 第27-31页 |
| 1.3.1 猪博卡病毒分类 | 第28页 |
| 1.3.2 博卡病毒基因组结构和复制 | 第28-29页 |
| 1.3.3 博卡病毒分子致病机制及免疫保护 | 第29页 |
| 1.3.4 猪博卡病毒的流行性 | 第29-30页 |
| 1.3.5 猪博卡病毒的致病性 | 第30-31页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第31-32页 |
| 第3章 材料与方法 | 第32-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-37页 |
| 3.1.1 毒株与菌株 | 第32页 |
| 3.1.2 细胞及转染相关材料 | 第32页 |
| 3.1.3 载体与质粒 | 第32-33页 |
| 3.1.4 工具酶、抗体及主要化学试剂 | 第33-34页 |
| 3.1.5 细胞培养基及其配置 | 第34-35页 |
| 3.1.6 主要缓冲液及其配置 | 第35-36页 |
| 3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第36页 |
| 3.1.8 分子生物学分析软件 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-45页 |
| 3.2.1 表达质粒构建 | 第37-39页 |
| 3.2.2 VSV-GFP和仙台病毒的增殖 | 第39页 |
| 3.2.3 RNA的提取及实时荧光定量RT-PCR | 第39-41页 |
| 3.2.4 双荧光素酶检测实验 | 第41页 |
| 3.2.5 Western blot及Co-IP实验 | 第41-43页 |
| 3.2.6 间接免疫荧光实验与激光共聚焦显微镜观察 | 第43页 |
| 3.2.7 染色质免疫共沉淀（Ch-IP） | 第43-44页 |
| 3.2.8 蛋白表达与纯化 | 第44页 |
| 3.2.9 噬菌体表面展示筛选技术 | 第44页 |
| 3.2.10 统计学方法 | 第44-45页 |
| 第4章 结果与分析 | 第45-69页 |
| 4.1 PBo V NP1拮抗Ⅰ型干扰素的产生 | 第45-50页 |
| 4.1.1 PBo V NP1抑制IFN-β 启动子激活 | 第45页 |
| 4.1.2 PBo V NP1抑制Ⅰ型干扰素表达 | 第45-47页 |
| 4.1.3 PBo V NP1蛋白通过IRF3介导的信号通路抑制IFN-I的产生 | 第47-48页 |
| 4.1.4 PBo V NP1抑制IRF3的启动子结合活性 | 第48-50页 |
| 4.2 PBo V NP1负调控Ⅰ型干扰素信号转导 | 第50-55页 |
| 4.2.1 PBo V NP1抑制ISRE启动子激活 | 第50页 |
| 4.2.2 PBo V NP1抑制ISG的表达 | 第50-51页 |
| 4.2.3 PBo V NP1不影响STAT1/STAT2磷酸化及转核 | 第51-53页 |
| 4.2.4 PBo V NP1抑制ISGF3的DNA结合活性 | 第53-55页 |
| 4.3 PBo V NP1蛋白拮抗IRF3及ISGF3 DNA结合的分子机制 | 第55-58页 |
| 4.3.1 PBo V NP1与IRF3及IRF9相互作用 | 第55-56页 |
| 4.3.2 PBo V NP1与IRF3及IRF9的DNA结合域相互作用 | 第56页 |
| 4.3.3 IRF3及IRF9的DNA结合界面直接参与和PBo V NP1的互作 | 第56-58页 |
| 4.4 PBo V NP1调控NF-κB活性及其机制 | 第58-60页 |
| 4.4.1 PBo V NP1诱导NF-κB激活 | 第58-59页 |
| 4.4.2 PBo V NP1诱导NF-κB激活机制 | 第59-60页 |
| 4.5 PBo V NP1蛋白免疫调控功能相关区域研究 | 第60-66页 |
| 4.5.1 PBo V NP1 N-端区域介导核定位 | 第60-63页 |
| 4.5.2 PBo V NP1N-端氨基酸区域发挥干扰素拮抗功能 | 第63-64页 |
| 4.5.3 PBo V NP1通过C-端区域激活NF-κB | 第64-66页 |
| 4.6 噬菌体展示筛选与PBo V NP1相互作用的宿主蛋白 | 第66-69页 |
| 4.6.1 pET-28a-NP1原核表达及蛋白纯化 | 第66-67页 |
| 4.6.2 噬菌体筛选及鉴定 | 第67-68页 |
| 4.6.3 筛选蛋白分析 | 第68-69页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第69-78页 |
| 5.1 讨论 | 第69-76页 |
| 5.1.1 PBo V NP1拮抗Ⅰ型干扰素产生的分子机制初步研究 | 第69-70页 |
| 5.1.2 PBo V NP1负调控Ⅰ型干扰素信号转导的分子机制初步研究 | 第70-71页 |
| 5.1.3 PBo V NP1蛋白拮抗IRF3及IRF9 DNA结合活性分子机制的细节研究 | 第71-73页 |
| 5.1.4 PBo V NP1诱导NF-κB激活的生物学意义 | 第73-74页 |
| 5.1.5 PBo V NP1亚细胞定位相关区域研究 | 第74页 |
| 5.1.6 PBo V NP1免疫调控相关区域研究 | 第74-75页 |
| 5.1.7 PBo V NP1与宿主蛋白互作的生物学意义 | 第75-76页 |
| 5.2 结论 | 第76-78页 |
| 参考 文献 | 第78-88页 |
| 附录 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
