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乙酸胁迫耐性基因挖掘及高活性酿酒酵母构建

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词表第19-20页
1 绪论第20-45页
    1.1 纤维素乙醇生产过程中抑制物的来源第20-23页
        1.1.1 预处理过程产生的抑制物第21-23页
        1.1.2 发酵过程中的抑制物第23页
    1.2 抑制物对酵母细胞的影响第23-34页
        1.2.1 乙酸对酵母细胞的影响第23-32页
        1.2.2 呋喃类和酚类物质对酵母细胞的影响第32-33页
        1.2.3 发酵过程中抑制物对酵母细胞的影响第33-34页
    1.3 过程工程的调整提高纤维素乙醇发酵效率第34-39页
        1.3.1 脱毒处理第34-35页
        1.3.2 金属离子对酿酒酵母耐受性的影响第35-38页
        1.3.3 氨基酸与酿酒酵母耐受性的关系第38-39页
        1.3.4 其它物质对酿酒酵母耐受性的影响第39页
    1.4 遗传改造手段提高纤维素乙醇发酵效率第39-43页
        1.4.1 菌株的进化工程改造第39-40页
        1.4.2 菌株的全局调控策略第40-41页
        1.4.3 菌株的胁迫响应的系统认知第41-43页
        1.4.4 菌株的定向靶点改造第43页
    1.5 本论文的研究思路与研究意义第43-45页
2 硫酸锌添加对全局基因转录水平和代谢物含量的影响第45-68页
    2.1 引言第45页
    2.2 实验材料与方法第45-51页
        2.2.1 菌株第45页
        2.2.2 培养基第45页
        2.2.3 主要仪器和试剂第45-46页
        2.2.4 菌株培养和发酵第46-47页
        2.2.5 分析方法第47-51页
    2.3 实验结果与讨论第51-67页
        2.3.1 硫酸锌添加对酵母细胞生理性能的影响第51-54页
        2.3.2 硫酸锌添加对胞内代谢物的影响第54-59页
        2.3.3 硫酸锌添加对酵母细胞基因转录水平的影响第59-67页
    2.4 本章小结第67-68页
3 膜转运蛋白Ady2p与酵母细胞胁迫耐性的关系第68-85页
    3.1 引言第68页
    3.2 材料与方法第68-73页
        3.2.1 菌株第68页
        3.2.2 培养基第68-69页
        3.2.3 主要仪器和试剂第69页
        3.2.4 菌株构建第69-72页
        3.2.5 菌株培养和发酵第72页
        3.2.6 分析方法第72-73页
    3.3 实验结果与讨论第73-84页
        3.3.1 麦角固醇与酵母乙酸耐受性的关系第73-75页
        3.3.2 麦角固醇对弱酸膜转运蛋白的影响第75-76页
        3.3.3 转运蛋白Ady2p对胁迫条件下酵母生长的影响第76-80页
        3.3.4 转运蛋白Ady2p对胁迫条件下酵母发酵的影响第80-82页
        3.3.5 转运蛋白Ady2p提高菌株乙酸耐受性的机理探究第82-84页
    3.4 本章小结第84-85页
4 嘌呤代谢关键基因过表达提高酿酒酵母环境胁迫耐受性第85-100页
    4.1 引言第85页
    4.2 实验材料与方法第85-89页
        4.2.1 菌株第85页
        4.2.2 培养基第85-86页
        4.2.3 主要仪器和试剂第86页
        4.2.4 菌株构建第86-87页
        4.2.5 菌株培养和发酵第87页
        4.2.6 分析方法第87-89页
    4.3 实验结果与讨论第89-99页
        4.3.1 ADE基因过表达对胁迫条件下酵母生长的影响第89-91页
        4.3.2 ADE基因过表达对胁迫条件下酵母发酵的影响第91-94页
        4.3.3 ADE基因过表达对ROS含量及抗氧化酶活的影响第94-95页
        4.3.4 ADE基因过表达对关键基因表达量的影响第95-96页
        4.3.5 ADE基因过表达对胞内能荷的影响第96-97页
        4.3.6 ADE基因过表达对胞内氨基酸含量的影响第97-99页
    4.4 本章小结第99-100页
5 锌指蛋白Ppr1p和Set5p与酿酒酵母环境胁迫耐受性的研究第100-117页
    5.1 引言第100页
    5.2 实验材料与方法第100-103页
        5.2.1 菌株第100-101页
        5.2.2 培养基第101页
        5.2.3 主要仪器和试剂第101页
        5.2.4 菌株构建第101-103页
        5.2.5 菌株培养和发酵第103页
        5.2.6 分析方法第103页
    5.3 实验结果与讨论第103-116页
        5.3.1 过表达含锌指结构蛋白对胁迫条件下酵母生长和发酵的影响第103-106页
        5.3.2 过表达含锌指结构蛋白对酵母抗氧化性及能量影响第106-107页
        5.3.3 过表达含锌指结构蛋白对胞内关键基因表达量的影响第107-108页
        5.3.4 SET5基因突变体对酵母胁迫耐受性的影响第108-115页
        5.3.5 基因SET5,ADY2和ADE17与酵母胁迫耐受性的关系第115-116页
    5.4 本章小结第116-117页
6 SET5过表达对酿酒酵母全局蛋白表达水平的影响第117-135页
    6.1 引言第117页
    6.2 实验材料与方法第117-119页
        6.2.1 菌株第117页
        6.2.2 培养基第117页
        6.2.3 主要仪器和试剂第117页
        6.2.4 菌株构建第117-118页
        6.2.5 菌株培养和发酵第118页
        6.2.6 分析方法第118-119页
    6.3 实验结果与讨论第119-134页
        6.3.1 总体蛋白水平的变化第119-123页
        6.3.2 中心碳代谢相关变化的蛋白第123-125页
        6.3.3 MAPK途径相关变化的蛋白第125-129页
        6.3.4 胁迫响应蛋白表达水平的分析第129-130页
        6.3.5 与蛋白加工过程相关的蛋白第130-133页
        6.3.6 与组蛋白修饰相关的变化蛋白第133-134页
        6.3.7 变化蛋白的转录因子分析第134页
    6.4 本章小结第134-135页
7 结论与展望第135-137页
    7.1 主要结论第135页
    7.2 创新点第135-136页
    7.3 展望第136-137页
参考文献第137-152页
作者简介第152页
攻读博士学位期间科研项目及科研成果第152-154页
致谢第154页

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