| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词 | 第12-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-34页 |
| 1.1 水杨酸的研究概况 | 第14-19页 |
| 1.1.1 SA的生物合成和代谢 | 第14-15页 |
| 1.1.2 水杨酸的受体以及参与植物抗病的信号通路 | 第15-16页 |
| 1.1.3 水杨酸对植物生长发育的影响 | 第16-19页 |
| 1.2 花粉管的极性生长 | 第19-33页 |
| 1.2.1 花粉管极性生长的研究概况 | 第19-20页 |
| 1.2.2 植物中的小G蛋白 | 第20-23页 |
| 1.2.3 ROP1调控花粉管生长的机制研究 | 第23-25页 |
| 1.2.4 囊泡运输和胞吞/胞吐作用 | 第25-27页 |
| 1.2.5 果胶质及细胞壁的合成 | 第27-28页 |
| 1.2.6 花粉管顶端的钙离子及其介导的信号转导途径 | 第28-31页 |
| 1.2.7 细胞骨架及马达蛋白 | 第31-32页 |
| 1.2.8 ROP与其他激素之间的关系 | 第32-33页 |
| 1.3 本论文的工作设想 | 第33-34页 |
| 第2章 水杨酸和水杨酸甲酯对拟南芥花粉管生长的影响 | 第34-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第34-39页 |
| 2.1.1 拟南芥的种植方法 | 第34-35页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第35页 |
| 2.1.3 实验试剂的配置 | 第35页 |
| 2.1.4 拟南芥花粉管体外培养的条件及方法 | 第35页 |
| 2.1.5 NahG基因全长的分离与克隆 | 第35页 |
| 2.1.6 DH5α超级感受态的制备 | 第35-36页 |
| 2.1.7 GV3101农杆菌热激感受态的制备 | 第36-37页 |
| 2.1.8 DNA胶回收 | 第37页 |
| 2.1.9 质粒的提取 | 第37页 |
| 2.1.10 拟南芥的转化 | 第37-38页 |
| 2.1.11 利用CTAB法对植物gDNA提取 | 第38-39页 |
| 2.1.12 农杆菌热激转化法 | 第39页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第39-47页 |
| 2.2.1 不同植物激素对拟南芥花粉体外生长的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.2 不同浓度的水杨酸对拟南芥花粉管体外生长的影响 | 第40-42页 |
| 2.2.3 pH对花粉管生长的影响 | 第42页 |
| 2.2.4 内源性水杨酸对花粉管生长的调控 | 第42-45页 |
| 2.2.5 水杨酸甲酯促进花粉管的体外生长 | 第45页 |
| 2.2.6 内源性的水杨酸通过不依赖于传统的SA受体来调控花粉管极性生长 | 第45-46页 |
| 2.2.7 讨论 | 第46-47页 |
| 第3章 SA/MeSA对拟南芥花粉管内吞途径的影响 | 第47-54页 |
| 3.1 材料和方法: | 第47-48页 |
| 3.1.1 材料 | 第47页 |
| 3.1.2 FM4-64染色和定量统计分析 | 第47-48页 |
| 3.1.3 cFRAP(corrected florescence recovery after photobleaching)的实验步骤 | 第48页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第48-54页 |
| 3.2.1 SA抑制花粉管内吞,而MeSA促进花粉管的内吞 | 第48页 |
| 3.2.2 SA/MeSA通过依赖网格蛋白的内吞调控花粉管的生长 | 第48-51页 |
| 3.2.3 水杨酸和水杨酸甲酯对花粉管外排途径的影响 | 第51-53页 |
| 3.2.4 讨论 | 第53-54页 |
| 第4章 SA/MeSA对花粉管顶端ROP1活性的影响 | 第54-60页 |
| 4.1 材料和方法 | 第54-55页 |
| 4.1.1 花粉管顶端活性ROP1的检测及分析 | 第54页 |
| 4.1.2 GFP-REN1荧光信号的测定和数据分析 | 第54-55页 |
| 4.1.3 Matlab程序代码的统计方法 | 第55页 |
| 4.1.4 Gfp-ROP1, ren1-3的表型分析 | 第55页 |
| 4.2 结果与分析 | 第55-60页 |
| 4.2.1 SA/MeSA对CRIB4-GFP的影响 | 第55页 |
| 4.2.2 SA/MeSA对REN1的影响 | 第55-56页 |
| 4.2.3 SA/MeSA对突变体ren1-3和过表达植株gfp-rop1花粉管体外生长的影响 | 第56-58页 |
| 4.2.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第5章 SA/MeSA对花粉管细胞壁果胶分布,calcium和actin的影响 | 第60-67页 |
| 5.1 材料和方法 | 第61-62页 |
| 5.1.1 拟南芥花粉管的荧光免疫组化定量分析 | 第61页 |
| 5.1.2 YC3.6花粉管钙离子信号强度的检测 | 第61页 |
| 5.1.3 Life-act标记花粉管微丝的检测方法 | 第61-62页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第62-67页 |
| 5.2.1 SA/MeSA对花粉管细胞壁果胶分布的影响 | 第62-63页 |
| 5.2.2 SA和MeSA对calcium和actin的影响 | 第63-65页 |
| 5.2.3 讨论 | 第65-67页 |
| 第6章 MES6对ROP1活性的影响 | 第67-77页 |
| 6.1 材料和方法 | 第67-68页 |
| 6.1.1 材料 | 第67页 |
| 6.1.2. 植物组织RNA提取以及CDNA的反转录 | 第67-68页 |
| 6.1.3 cDNA的反转录 | 第68页 |
| 6.1.4 MES6过表达和互补转基因载体的构建 | 第68页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第68-77页 |
| 6.2.1 MES6和BSMT1在拟南芥花粉管中的亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 6.2.2 缺失突变体mes6-1的表型分析 | 第69-72页 |
| 6.2.3 MES6对花粉管ROP1活性和分布的影响 | 第72-75页 |
| 6.2.4 讨论 | 第75-77页 |
| 讨论与结论 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-93页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表和完成的学术论文目录 | 第93-94页 |
| 附录B | 第94-96页 |
| 附表1. 本研究中所用到的引物 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
