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Anti-CRISPR蛋白AcrF3抑制I-F型CRISPR-Cas系统的分子机制研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩写汇总第15-20页
1 引言第20-46页
    1.1 CRISPR-Cas系统介绍第20-32页
        1.1.1 CRISPR-Cas系统的研究背景第20-23页
        1.1.2 CRISPR-Cas系统的原理和基础第23-26页
        1.1.3 CRISPR-Cas系统的分类第26-27页
        1.1.4 CRISPR-Cas系统的步骤第27-32页
    1.2 CRISPR-Cas系统与其他基因组编辑工具的比较第32-40页
        1.2.1 大范围核酸酶简介第32-35页
        1.2.2 锌指核酸酶简介第35-36页
        1.2.3 转录激活子样效应因子核酸酶简介第36-38页
        1.2.4 CRISPR-Cas系统的特点第38-40页
    1.3 anti-CRISPR基因第40-42页
        1.3.1 anti-CRISPR基因的发现第40-41页
        1.3.2 anti-CRISPR蛋白的作用机制第41-42页
    1.4 AcrF3抑制Cas3的研究意义第42-46页
2 材料与方法第46-63页
    2.1 实验材料第46页
    2.2 实验试剂第46-49页
        2.2.1 蛋白质表达载体构建第46-47页
        2.2.2 蛋白质表达与纯化第47-48页
        2.2.3 PaCas3-AcrF3复合物结晶与优化第48页
        2.2.4 生化实验第48-49页
    2.3 实验方法第49-63页
        2.3.1 蛋白质表达载体构建第49-56页
        2.3.2 蛋白质表达与纯化第56-59页
        2.3.3 PaCas3-AcrF3复合物结晶与优化第59-61页
        2.3.4 生化实验第61-63页
3 结果与讨论第63-100页
    3.1 蛋白质表达和纯化第63-71页
        3.1.1 AcrF3的纯化第63-65页
        3.1.2 PaCas3与AcrF3的相互作用及其复合物纯化第65-69页
        3.1.3 EcCas3与AcrF3的相互作用第69-71页
    3.2 PaCas3-AcrF3复合物的结晶与结构解析第71-79页
        3.2.1 PaCas3-AcrF3复合物的结晶与晶体优化第71-73页
        3.2.2 PaCas3-AcrF3复合物晶体的数据收集与处理第73-79页
    3.3 PaCas3-AcrF3复合物晶体结构第79-96页
        3.3.1 PaCas3-AcrF3复合物的整体结构第79-80页
        3.3.2 PaCas3氨基端的Cas2结构域第80-82页
        3.3.3 PaCas3的结构第82-83页
        3.3.4 PaCas3的HD核酸酶结构域第83-86页
        3.3.5 ADP结合状态的PaCas3第86-87页
        3.3.6 AcrF3二聚体的结构第87-88页
        3.3.7 AcrF3与PaCas3的相互作用第88-94页
        3.3.8 AcrF3抑制PaCas3的分子机制第94-96页
    3.4 讨论第96-99页
    3.5 结论第99-100页
参考文献第100-119页
作者简历第119页

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