| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-15页 |
| 1.1 凡纳滨对虾的生物学简介及养殖现状 | 第10-11页 |
| 1.2 水产动物抗寒相关基因研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 MT的介绍及研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3.1 MT的结构及生理功能 | 第12页 |
| 1.3.2 MT的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 Troponin/的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.5 研究的内容和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 低温处理凡纳滨对虾仔虾cDNA全长文库的构建 | 第15-25页 |
| 2.1 低温实验准备 | 第15页 |
| 2.2 cDNA文库的构建 | 第15-17页 |
| 2.2.1 材料 | 第15页 |
| 2.2.2 total RNA的提取和纯化 | 第15-16页 |
| 2.2.3 cDNA合成 | 第16页 |
| 2.2.4 双链cDNA与载体的连接和转化 | 第16页 |
| 2.2.5 序列的拼接与生物信息学分析 | 第16-17页 |
| 2.3 结果 | 第17-24页 |
| 2.3.1 样品total RNA提取 | 第17-18页 |
| 2.3.2 mRNA纯化 | 第18页 |
| 2.3.3 cDNA合成、酶切及分级分离 | 第18-19页 |
| 2.3.4 cDNA的分级分离 | 第19页 |
| 2.3.5 文库滴度及重组效率的测定 | 第19-20页 |
| 2.3.6 ESTs的测序及初步分析 | 第20-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 MT基因的克隆与表达分析 | 第25-34页 |
| 3.1 材料和方法 | 第25-26页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.2 RNA的提取和逆转录 | 第25-26页 |
| 3.1.3 引物设计 | 第26页 |
| 3.1.4 基因克隆与测序 | 第26页 |
| 3.1.5 MT的定量表达研究 | 第26页 |
| 3.2 结果与分析 | 第26-32页 |
| 3.2.1 序列分析 | 第27-28页 |
| 3.2.2 同源性分析 | 第28-29页 |
| 3.2.3 表达分析 | 第29-32页 |
| 3.3 讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 Troponin 13种不同的剪接体的比较分析 | 第34-39页 |
| 4.1 序列分析 | 第34页 |
| 4.2 同源性分析 | 第34-35页 |
| 4.3 生物信息学分析 | 第35-37页 |
| 4.4 进化树构建 | 第37-38页 |
| 4.5 讨论 | 第38-39页 |
| 第五章 小结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第45页 |