| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 肝癌的研究背景 | 第12-16页 |
| 1.1.1 肝癌分类 | 第12页 |
| 1.1.2 肝癌的诊断 | 第12-13页 |
| 1.1.3 肝癌的治疗 | 第13-16页 |
| 1.2 细胞运动 | 第16-18页 |
| 1.3 肝癌侵袭转移的分子基础 | 第18-19页 |
| 1.4 RAI14的研究背景 | 第19-20页 |
| 1.5 Palladin研究背景 | 第20-21页 |
| 1.6 选题背景和研究意义 | 第21页 |
| 1.7 研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 实验方法 | 第22-43页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.1.1 仪器与材料 | 第22页 |
| 2.1.2 操作步骤 | 第22-23页 |
| 2.2 构建质粒 | 第23-30页 |
| 2.2.1 敲除质粒的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.2 过表达载体的构建 | 第26-30页 |
| 2.3 细胞转染 | 第30-31页 |
| 2.3.1 实验目的 | 第30-31页 |
| 2.3.2 实验材料与仪器 | 第31页 |
| 2.3.3 操作步骤 | 第31页 |
| 2.4 制备慢病毒 | 第31-32页 |
| 2.4.1 磷酸钙沉淀法原理 | 第31页 |
| 2.4.2 试剂准备 | 第31-32页 |
| 2.4.3 材料 | 第32页 |
| 2.4.4 操作步骤 | 第32页 |
| 2.4.5 注意事项 | 第32页 |
| 2.5 慢病毒侵染HepG2细胞以干扰RAI14的表达 | 第32-34页 |
| 2.5.1 实验原理 | 第32-33页 |
| 2.5.2 实验材料与仪器 | 第33页 |
| 2.5.3 操作步骤 | 第33-34页 |
| 2.6 蛋白免疫印迹实验 | 第34页 |
| 2.6.1 实验材料与仪器 | 第34页 |
| 2.7 蛋白酶抑制剂实验 | 第34-36页 |
| 2.7.0 操作步骤 | 第34-35页 |
| 2.7.1 实验原理 | 第35页 |
| 2.7.2 仪器与试剂 | 第35页 |
| 2.7.3 操作步骤 | 第35-36页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR | 第36-39页 |
| 2.8.1 实验原理 | 第36-37页 |
| 2.8.2 仪器与试剂 | 第37页 |
| 2.8.3 操作步骤 | 第37-39页 |
| 2.9 划痕实验 | 第39-40页 |
| 2.9.1 实验原理 | 第39页 |
| 2.9.2 实验材料与仪器 | 第39页 |
| 2.9.3 操作步骤 | 第39-40页 |
| 2.10 Transwell实验 | 第40页 |
| 2.10.1 实验原理 | 第40页 |
| 2.10.2 实验材料与试剂 | 第40页 |
| 2.10.3 操作步骤 | 第40页 |
| 2.11 免疫荧光实验 | 第40-43页 |
| 2.11.1 实验原理 | 第40页 |
| 2.11.2 实验材料及试剂 | 第40-41页 |
| 2.11.3 操作步骤 | 第41-43页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第43-56页 |
| 3.1 数据分析RAI14与肝癌患者生存率的关系 | 第43页 |
| 3.2 沉默表达HepG2细胞中的RAI14 | 第43页 |
| 3.3 转染过表达载体后HepG2细胞中RAI14的表达量 | 第43页 |
| 3.4 敲低和过表达RAI14对HepG2细胞增殖活性的影响 | 第43-45页 |
| 3.5 RAI14对细胞二维平面迁移的影响 | 第45-46页 |
| 3.6 RAI14对细胞穿孔迁移能力的影响 | 第46-49页 |
| 3.7 RAI14对Palladin表达水平的影响 | 第49页 |
| 3.8 蛋白酶抑制剂实验 | 第49-51页 |
| 3.9 实时荧光定量PCR | 第51页 |
| 3.10 免疫荧光实验 | 第51-53页 |
| 3.11 不同细胞系内源RAI14与Palladin表达量比较 | 第53-54页 |
| 3.12 荧光明胶降解实验 | 第54页 |
| 3.13 siRNA干扰HepG2细胞内源RAI14实验 | 第54-55页 |
| 3.14 本章小结 | 第55-56页 |
| 结论与展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
